目的與背景:缺氧誘導型轉錄因子-1（HIF-1）,是介導腫瘤細胞和組織適應缺氧微環(huán)境的異二聚體轉錄因子,對腫瘤生長施加不同的影響的重要的癌癥標志物。文獻已經(jīng)報道HIF-1在多種病因引起的肝病發(fā)病機理中起作用。來源于唇形科植物的尾葉香茶菜因其抗炎、抗腫瘤作用備受關注,但其有效成分:二萜類化合物尾葉香茶菜素A以HIF-1α為作用靶標的抗腫瘤作用機制尚不十分明確。因此,此次研究探討尾葉香茶菜素A對HIF-lα及其靶基因的影響。方法:首先,用熒光素酶報告基因實驗以及細胞存活實驗,檢測藥物對HIF-lα轉錄活性及細胞毒性的影響。其次,免疫印跡分析實驗檢驗尾葉香茶菜素A對Hep3B/Sk-hepl細胞中HIF-lα的蛋白水平以及作用機制;接下來用免疫熒光染色實驗進一步驗證尾葉香茶菜素A對乏氧誘導的HIF-lα的蛋白細胞核內的累積的影響。然后,RT-PCR驗證尾葉香茶菜素A可對HIF-lα調控的靶基因VEGF mRNA的表達的影響。最后,MTT細胞增殖實驗、細胞集落實驗、EdU實驗、流式細胞周期實驗以及免疫印跡分析實驗檢驗尾葉香茶菜素A對肝癌細胞增殖的影響。結果:熒光素酶報告基因實驗以及細胞存活實驗... 

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略詞簡表
第一章 前言
    1.1 肝癌的介紹
        1.1.1 肝癌的發(fā)生率
        1.1.2 肝癌的治療手段
    1.2 缺氧和癌癥
    1.3 HIF的介紹
        1.3.1 HIF的結構
        1.3.2 HIF-1α的降解
        1.3.3 HIF-1α的合成
        1.3.4 HIF-1α在癌癥中的作用
    1.4 尾葉香茶菜素A的介紹
第二章 實驗材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 細胞株及來源
        2.1.2 藥物
        2.1.3 儀器
        2.1.4 試劑及抗體
        2.1.5 藥品及試劑配制
    2.2 實驗方法
        2.2.1 復蘇細胞
        2.2.2 細胞培養(yǎng)
        2.2.3 MTT法檢測細胞存活率實驗
        2.2.4 熒光素酶報告基因實驗
        2.2.5 免疫印跡分析實驗
        2.2.6 免疫熒光染色實驗
        2.2.7 RT-PCR實驗
        2.2.8 細胞周期實驗
        2.2.9 Colony formation實驗
        2.2.10 EdU檢測細胞增殖實驗
第三章 結果
    3.1 尾葉香茶菜素A對肝癌細胞中HIF-1α表達的影響
        3.1.1 熒光素酶報告基因實驗結果
        3.1.2 細胞存活實驗結果
        3.1.3 免疫印跡分析實驗結果
        3.1.4 免疫熒光染色實驗結果
    3.2 尾葉香茶菜素A對肝癌細胞中HIF-1α調控的靶基因的影響
        3.2.1 尾葉香茶菜素A對肝癌細胞中VEGF表達的影響
        3.2.2 尾葉香茶菜素A對肝癌細胞增殖的影響
第四章 討論
第五章 結論
參考文獻
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]Hypoxia inducible factor in hepatocellular carcinoma:A therapeutic target[J]. Daniel Lin,Jennifer Wu.  World Journal of Gastroenterology. 2015(42)
[2]肝癌綜合治療的現(xiàn)狀[J]. 郭武華,張吉翔.  世界華人消化雜志. 2008(20)
[3]Hepatocellular carcinoma: current management and recent advances[J]. Wan-Yee Lau,Eric C. H. Lai.  Hepatobiliary ＆ Pancreatic Diseases International. 2008(03)
[4]世界香茶菜屬植物地理分布及其藥用前景[J]. 陳林姣,李植華,賴小平.  中藥材. 1996(04)



本文編號：3707285