目的:研究雷公藤紅素在煙曲霉菌性角膜炎中的抑炎作用及其作用機制。方法:1、煙曲霉菌感染小鼠角膜建立小鼠真菌性角膜炎模型。使用雷公藤紅素或相應(yīng)濃度的二甲基亞砜（DMSO）在感染1天拆線后進(jìn)行局部處理,使用裂隙燈對感染后1天、3天和5天的小鼠角膜進(jìn)行拍照并記錄臨床評分。采用HE染色法對比感染后3天不同處理組中炎性細(xì)胞浸潤情況。2、采用q RT-PCR、ELISA和Western blot法檢測煙曲霉菌感染后雷公藤紅素處理組和溶劑對照處理組中小鼠角膜的促炎因子、抑炎因子以及LOX-1的m RNA以及蛋白表達(dá)水平改變情況。3、收取經(jīng)過不同處理后的小鼠原代腹腔巨噬細(xì)胞,分為正常組、雷公藤紅素預(yù)處理組、溶劑對照預(yù)處理組、真菌刺激組、雷公藤紅素預(yù)處理加菌刺激組以及溶劑對照預(yù)處理加菌刺激組,用于體外細(xì)胞實驗檢測相關(guān)炎癥指標(biāo)。采用q RT-PCR、ELISA法檢測各處理組中促炎因子IL-1β、TNF-α、MIP-2的m RNA以及蛋白表達(dá)水平改變情況;采用q RT-PCR、ELISA法檢測巨噬細(xì)胞各處理組中抑炎因子IL-10和TGF-β的m RNA以及蛋白表達(dá)水平改變情況。4、采用q RT-PCR法檢測... 

【文章頁數(shù)】：51 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
引言
材料與方法
    1 實驗材料
        1.1 實驗對象
        1.2 實驗主要儀器與設(shè)備
        1.3 實驗主要相關(guān)耗材
    2 實驗方法
        2.1 煙曲霉菌培養(yǎng)與菌絲的制備
        2.2 C57BL/6 小鼠真菌性角膜炎動物模型構(gòu)建
        2.3 雷公藤紅素的制備與保存
        2.4 C57BL/6 小鼠角膜經(jīng)雷公藤紅素局部處理實驗
        2.5 小鼠腹腔原代巨噬細(xì)胞提取方法
        2.6 CCK-8 檢測雷公藤紅素藥物毒性實驗
        2.7 小鼠腹腔原代巨噬細(xì)胞培養(yǎng)、藥物預(yù)處理以及煙曲霉菌菌絲刺激實驗
        2.8 qRT-PCR
        2.9 Western Blot
        2.10 ELISA
        2.11 HE染色
    3 統(tǒng)計學(xué)處理
結(jié)果
    1 雷公藤紅素對于C57BL/6小鼠角膜臨床表現(xiàn)的影響
    2 雷公藤紅素對煙曲霉菌感染后的小鼠角膜中促炎因子、LOX-1和抑炎因子表達(dá)的影響
    3 雷公藤紅素對煙曲霉菌感染后小鼠腹腔原代巨噬細(xì)胞中促炎因子和抑炎因子表達(dá)的影響
    4 雷公藤紅素處理后感染煙曲霉菌的小鼠腹腔原代巨噬細(xì)胞中LOX-1、p38MAPK和p-p38MAPK表達(dá)變化
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    綜述參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
附錄
致謝



本文編號：3704665