2型糖尿�。╰ype 2 diabetes mellitus,T2DM）是一種以持續(xù)高血糖和胰島素抵抗為主要特征的常見慢性代謝性疾病。在胰腺β細(xì)胞中,糖促胰島素分泌（glucose-stimulated insulin secretion,GSIS）作用對(duì)于維持機(jī)體血糖平衡的過程中具有非常重要的作用。課題組前期研究發(fā)現(xiàn),京尼平苷可通過激活胰高血糖素樣肽1受體（glucagon-like peptide-1 receptor,GLP-1R）調(diào)節(jié)GSIS,并且在低、中濃度葡萄糖存在條件下,京尼平苷可快速的增強(qiáng)胰腺β細(xì)胞對(duì)葡萄糖的吸收和代謝,促進(jìn)胰島素分泌,然而,在高糖條件下,京尼平苷卻起著相反的作用,減弱了胰腺β細(xì)胞對(duì)葡萄糖的吸收、代謝和胰島素分泌。由于高血糖會(huì)誘導(dǎo)胰腺β細(xì)胞過度分泌胰島素以滿足身體的需要,從而加速胰腺β細(xì)胞功能障礙和細(xì)胞凋亡,因此,京尼平苷可能有助于防止高血糖造成的胰腺β細(xì)胞損傷和功能障礙、防止或延緩2型糖尿病的形成、減少并發(fā)癥的發(fā)生。但京尼平苷如何在短時(shí)間內(nèi)實(shí)現(xiàn)對(duì)β細(xì)胞胰島素分泌的調(diào)節(jié)的呢?目前還不清楚。結(jié)合文獻(xiàn)和前期工作基礎(chǔ),我們提出假說:京尼平苷可能是通過影響胰腺β... 

【文章頁(yè)數(shù)】：79 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
英文縮寫
1 緒論
    1.1 2型糖尿病的流行病學(xué)
    1.2 2型糖尿病的發(fā)病機(jī)制
        1.2.1 遺傳和環(huán)境因素
        1.2.2 胰島素抵抗
        1.2.3 胰島β細(xì)胞功能受損和凋亡
        1.2.4 高血糖與2型糖尿病及并發(fā)癥
    1.3 GLUT2與2 型糖尿病
    1.4 京尼平苷與糖尿病相關(guān)的研究進(jìn)展
        1.4.1 對(duì)胰腺β細(xì)胞的保護(hù)作用
        1.4.2 激活PPARγ受體作用
        1.4.3 對(duì)糖尿病并發(fā)癥的防治作用
    1.5 本文的立項(xiàng)依據(jù)和研究?jī)?nèi)容
2 京尼平苷對(duì)胰腺β細(xì)胞GLUT2 表達(dá)和內(nèi)吞的影響
    2.1 前言
    2.2 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
        2.2.2 主要溶液
        2.2.3 主要試劑
        2.2.4 主要儀器
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 大鼠胰腺INS-1 細(xì)胞的培養(yǎng)
        2.3.2 細(xì)胞膜蛋白與漿蛋白分離提取
        2.3.3 樣品蛋白濃度測(cè)定
        2.3.4 蛋白免疫印跡分析
        2.3.5 樣品總RNA提取
        2.3.6 RNA逆轉(zhuǎn)錄cDNA
        2.3.7 RT-PCR反應(yīng)
        2.3.8 免疫熒光技術(shù)
        2.3.9 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
    2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.4.1 京尼平苷對(duì)INS-1 細(xì)胞中GLUT2 m RNA和蛋白水平的影響
        2.4.2 不同糖濃度條件下,京尼平苷短時(shí)間作用對(duì)INS-1 細(xì)胞中GLUT2 分布的影響
    2.5 討論與小結(jié)
        2.5.1 討論
        2.5.2 小結(jié)
3 京尼平苷對(duì)胰腺β細(xì)胞GLUT2 內(nèi)吞關(guān)鍵分子的調(diào)節(jié)作用
    3.1 前言
    3.2 實(shí)驗(yàn)材料
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
        3.2.2 主要溶液
        3.2.3 主要試劑
        3.2.4 主要儀器
    3.3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3.1 大鼠胰腺INS-1 細(xì)胞培養(yǎng)
        3.3.2 樣品蛋白濃度測(cè)定
        3.3.3 蛋白免疫印跡分析
        3.3.4 樣品總RNA提取
        3.3.5 RNA逆轉(zhuǎn)錄cDNA
        3.3.6 RT-PCR反應(yīng)
        3.3.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
    3.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.4.1 京尼平苷對(duì)INS-1 細(xì)胞中GnT-IVa mRNA和蛋白水平的影響
        3.4.2 京尼平苷對(duì)INS-1 細(xì)胞中g(shù)alectin-9 mRNA和蛋白水平的影響
        3.4.3 京尼平苷對(duì)INS-1 細(xì)胞中clathrin m RNA和蛋白水平的影響
        3.4.4 不同糖濃度條件下,京尼平苷短時(shí)間作用對(duì)INS-1 細(xì)胞中g(shù)alectin-9 蛋白水平的影響
        3.4.5 不同糖濃度條件下,京尼平苷短時(shí)間作用對(duì)INS-1 細(xì)胞中GnT-IVa蛋白水平的影
        3.4.6 不同糖濃度條件下,京尼平苷短時(shí)間作用對(duì)INS-1 細(xì)胞中GLUT2 蛋白糖基化水平的影響
    3.5 討論與小結(jié)
        3.5.1 討論
        3.5.2 小結(jié)
4 GnT-IVa與京尼平苷短時(shí)間內(nèi)調(diào)節(jié)胰腺β細(xì)胞GLUT2 內(nèi)吞的相關(guān)性
    4.1 前言
    4.2 實(shí)驗(yàn)材料
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
        4.2.2 主要溶液
        4.2.3 主要試劑
        4.2.4 主要儀器
    4.3 實(shí)驗(yàn)方法
        4.3.1 大鼠胰腺INS-1 細(xì)胞培養(yǎng)
        4.3.2 樣品蛋白濃度測(cè)定
        4.3.3 蛋白免疫印跡分析
        4.3.4 siRNA基因干擾
        4.3.5 免疫熒光技術(shù)
        4.3.6 葡萄糖水平測(cè)定
        4.3.7 ATP水平測(cè)定
        4.3.8 胰島素水平檢測(cè)
        4.3.9 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
    4.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.4.1 GnT-IVa siRNA濃度和最優(yōu)序列的選擇
        4.4.2 京尼平苷對(duì)GnT-IVa干擾后的INS-1 細(xì)胞中GLUT2 蛋白糖基化水平的影響
        4.4.3 京尼平苷對(duì)GnT-IVa干擾后的INS-1 細(xì)胞中GLUT2 在細(xì)胞膜上分布的影響
        4.4.4 京尼平苷對(duì)GnT-IVa干擾后的INS-1 細(xì)胞葡萄糖吸收、代謝和胰島素分泌的影響
    4.5 討論與小結(jié)
        4.5.1 討論
        4.5.2 小結(jié)
5 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
致謝
參考文獻(xiàn)
個(gè)人簡(jiǎn)歷、在學(xué)期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文及取得的研究成果


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3701845