發(fā)布時(shí)間：2022-11-01 21:28

　　目的:1.建立高效液相色譜（HPLC）法同時(shí)測(cè)定丹參飲中四種酚性成分丹參素（DSS）、原兒茶酸（PCC）、原兒茶醛（PCL）和丹酚酸B（Sal B）的含量。2.研究這四種酚性成分對(duì)棕櫚酸鈉（SPA）刺激的人臍靜脈細(xì)胞融合細(xì)胞（EA.hy926）表達(dá)細(xì)胞間黏附分子（ICAM-1）的影響及其作用機(jī)制。方法:1.建立HPLC法測(cè)定丹參飲中四種酚性成分的含量:采用Genmini5μm C18 110A（250×4.60mm,5μm）色譜柱,以乙腈（A）-0.05%三氟乙酸（B）溶液為流動(dòng)相,梯度洗脫（0~7min,2%A→10%A;7~20min,10%A→23%A;20~35min,23%A→27%A;35~38min,27%A→38%A;38~42min,38%A;42~43min,38%A→2%A;43~56min,2%A）,流速0.8ml/min,柱溫為25℃,檢測(cè)波長(zhǎng)288nm,進(jìn)樣量15μl。然后進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證,最后測(cè)定丹參飲中四種酚性成分的含量。2.四種酚性成分對(duì)SPA誘導(dǎo)EA.hy926表達(dá)ICAM-1的影響。設(shè)置對(duì)照組、模型組、受試藥組、陽(yáng)性對(duì)照藥組。對(duì)照組以牛血清蛋白（BS... 

【文章頁(yè)數(shù)】：68 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
中英文詞縮略表
前言
第1章 實(shí)驗(yàn)材料
    1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
    1.2 實(shí)驗(yàn)藥物
    1.3 試劑及配制
    1.4 實(shí)驗(yàn)儀器
第2章 實(shí)驗(yàn)方法
    2.1 丹參飲中四種酚性成分的含量測(cè)定
        2.1.1 溶液的制備
        2.1.2 色譜條件與系統(tǒng)適用性
        2.1.3 方法學(xué)驗(yàn)證
        2.1.4 含量測(cè)定
    2.2 EA.hy926的復(fù)蘇、培養(yǎng)與傳代、凍存
        2.2.1 細(xì)胞復(fù)蘇
        2.2.2 細(xì)胞培養(yǎng)與傳代
        2.2.3 細(xì)胞凍存
    2.3 MTT法檢測(cè)SPA刺激EA.hy926的生存率及藥物的影響
    2.4 FCM檢測(cè)SPA刺激EA.hy926引起細(xì)胞凋亡及藥物的影響
    2.5 油紅染色法檢測(cè)SPA刺激EA.hy926形成泡沫細(xì)胞及藥物的影響
    2.6 ELISA法檢測(cè)SPA刺激的EA.hy926 ICAM-1 蛋白表達(dá)水平及藥物的影響
    2.7 WB法檢測(cè)SPA刺激的EA.hy926對(duì)TLRs/MyD88/NF-κB通路和ICAM-1 的作用及藥物的影響
    2.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
第3章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 丹參飲中四種酚性成分的含量
        3.1.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性
        3.1.2 方法學(xué)驗(yàn)證
        3.1.3 含量測(cè)定
    3.2 SPA刺激EA.hy926的生存率及藥物的影響
    3.3 SPA刺激EA.hy926引起細(xì)胞凋亡及藥物的影響
    3.4 SPA刺激EA.hy926形成泡沫細(xì)胞及藥物的影響
    3.5 SPA刺激的EA.hy926ICAM-1 蛋白表達(dá)水平及藥物的影響（ELISA法）
    3.6 SPA刺激的EA.hy926對(duì)TLRs/MyD88/NF-κB通路和ICAM-1的作用及藥物的影響(WB法)
第4章 討論
第5章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間的研究成果


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]丹參飲精品中藥與普通中藥對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化模型大鼠藥理作用的比較[J]. 李環(huán),焦亞斌.  長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào). 2014(06)
[2]HPLC法同時(shí)測(cè)定丹參注射液中8種成分[J]. 李安平,楊錫,丁永輝,趙建邦.  蘭州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2012(03)
[3]HPLC法測(cè)定火絨草中原兒茶酸、原兒茶醛、綠原酸和咖啡酸[J]. 姜鴻,王光函,張穎,尤獻(xiàn)民.  中成藥. 2011(11)
[4]加味丹參飲對(duì)血瘀證兔心肌缺血再灌注損傷的影響[J]. 李鑫輝,黃政德,葛金文.  中國(guó)中醫(yī)藥信息雜志. 2011(06)
[5]丹參飲治療冠心病心絞痛60例[J]. 佟麗娟.  實(shí)用中醫(yī)內(nèi)科雜志. 2011(05)
[6]加味丹參飲對(duì)血瘀證心肌缺血再灌注損傷家兔內(nèi)皮細(xì)胞保護(hù)作用研究[J]. 李鑫輝,黃政德,葛金文.  中國(guó)藥師. 2011(01)
[7]高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定丹參中4種酚酸類成分的含量[J]. 王偉,李焱,謝曉梅,周銅水.  安徽醫(yī)藥. 2010(11)
[8]復(fù)方丹參飲治療慢性穩(wěn)定型心絞痛伴高脂血癥的臨床觀察[J]. 胡振波,姜賀,徐京育.  中醫(yī)藥學(xué)報(bào). 2009(01)
[9]丹參藥材水溶性成分含量的HPLC法分析[J]. 李曼玲,馮偉紅,康琛,梁日欣,楊洪軍,何希榮,黃璐琦.  中國(guó)中醫(yī)藥信息雜志. 2008(08)
[10]HPLC法測(cè)定丹參類注射液中4種水溶性成分含量[J]. 潘英妮,袁丹,付文衛(wèi),王愛萍,鹿野美弘.  沈陽(yáng)藥科大學(xué)學(xué)報(bào). 2004(03)



本文編號(hào)：3700131