基于PI3K/Akt信號通路探討補(bǔ)腎除濕方對軟骨細(xì)胞凋亡的作用機(jī)制及臨床研究
發(fā)布時(shí)間:2022-10-30 20:20
[目的l臨床研究部分通過補(bǔ)腎除濕方組與硫酸氨基葡萄糖膠囊聯(lián)合雙氯芬酸鈉緩釋片組相對比,分別于治療前后觀察兩組組內(nèi)和組間血清中,白細(xì)胞介素—1β(IL-1 β)、腫瘤壞死因子—α(TNF-α)、基質(zhì)金屬蛋白酶-3(MMP-3)水平及VAS、WOMAC、Lequesne評分,分析其治療膝骨關(guān)節(jié)炎的有效性及安全性。實(shí)驗(yàn)研究部分通過建立人軟骨細(xì)胞凋亡模型,采用補(bǔ)腎除濕方含藥血清干預(yù),以進(jìn)一步探討補(bǔ)腎除濕方對軟骨細(xì)胞凋亡的干預(yù)作用和PI3K/Akt信號通路的影響。[方法]臨床研究:納入早期KOA患者共40例,運(yùn)用隨機(jī)數(shù)字表法,根據(jù)患者就診時(shí)間編號,將入選病例分為試驗(yàn)組及對照組,各20例。試驗(yàn)組予補(bǔ)腎除濕方水煎劑口服,對照組予氨基葡萄糖聯(lián)合雙氯芬酸鈉口服,共服藥4周。分別于治療前后進(jìn)行VAS、WOMAC、Lequesne評分,以及采集血液并檢測血液樣本中IL—1、TNF—α及MMP—3水平。實(shí)驗(yàn)研究:(1)C28/I2人軟骨細(xì)胞的培養(yǎng)與傳代。(2)取生長良好的C28/I2人軟骨細(xì)胞,隨機(jī)分為7組,即空白組、模型組、10%空白血清組、IL-1 β+10%空白血清組、IL-1 β+50含藥血清組、IL...
【文章頁數(shù)】:61 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
英文縮略詞表
第一部分 文獻(xiàn)綜述
1 膝骨關(guān)節(jié)炎概述及PI3K/Akt信號通路研究進(jìn)展
1.1 軟骨細(xì)胞凋亡
1.2 PI3K/Akt信號通路與KOA的相關(guān)性
2 中藥治療膝骨關(guān)節(jié)炎的研究進(jìn)展
2.1 中醫(yī)學(xué)對膝骨關(guān)節(jié)炎病因病機(jī)的認(rèn)識
2.2 中藥復(fù)方防治膝骨關(guān)節(jié)炎的實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展
2.3 中藥有效成分防治膝骨關(guān)節(jié)炎的研究進(jìn)展
參考文獻(xiàn)
第二部分 臨床研究
前言
1 臨床資料
1.1 病例來源
1.2 隨機(jī)分組
2 診療標(biāo)準(zhǔn)
2.1 診斷標(biāo)準(zhǔn)
2.2 納入標(biāo)準(zhǔn)
2.3 排除標(biāo)準(zhǔn)
2.4 脫落標(biāo)準(zhǔn)
3 研究方案
3.1 隨機(jī)分組
3.2 試驗(yàn)組
3.3 對照組
3.4 基礎(chǔ)治療
3.5 觀察指標(biāo)
4 統(tǒng)計(jì)分析
5 結(jié)果
5.1 基線分析
5.2 治療結(jié)束后VAS、WOMAC、Lequesne評分以及基質(zhì)金屬蛋白酶-1、白細(xì)胞介素-1比較
5.3 療效評價(jià)結(jié)果
5.4 不良事件
6 結(jié)論
7 討論
7.1 早期膝骨關(guān)節(jié)炎西醫(yī)治療現(xiàn)狀
7.2 IL-1、TNF-α在骨關(guān)節(jié)炎發(fā)病中的作用
7.3 本研究中補(bǔ)腎除濕方療效作用分析
7.4 存在的問題與展望
參考文獻(xiàn)
第三部分 實(shí)驗(yàn)研究
前言
1 實(shí)驗(yàn)材料
1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
1.3 實(shí)驗(yàn)藥物
1.4 實(shí)驗(yàn)試劑
1.5 實(shí)驗(yàn)儀器
1.6 主要試劑的配制
2 實(shí)驗(yàn)方法
2.1 C28/I2人軟骨細(xì)胞的培養(yǎng)
2.2 正式實(shí)驗(yàn)條件的確定(CCK-8法確定干預(yù)措施的時(shí)效、量效關(guān)系)
2.3 流式細(xì)胞術(shù)檢測各組細(xì)胞凋亡情況
2.4 Western-blot法檢測蛋白表達(dá)
2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3 結(jié)果
3.1 成功建立軟骨細(xì)胞凋亡模型
3.2 補(bǔ)腎除濕方含藥血清的最佳干預(yù)條件
3.3 補(bǔ)腎除濕方含藥血清對細(xì)胞凋亡的影響
3.4 補(bǔ)腎除濕方含藥血清對Bax、caspase-9及Akt蛋白表達(dá)的影響
4 討論
4.1 軟骨細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)
4.2 軟骨細(xì)胞凋亡模型的建立
4.3 PI3K/Akt信號通路與軟骨細(xì)胞凋亡的關(guān)系
4.4 補(bǔ)腎除濕方含藥血清對細(xì)胞凋亡的干預(yù)作用
4.5 關(guān)于中藥復(fù)方體外實(shí)驗(yàn)給藥方式的討論
4.6 存在的問題與展望
參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡歷
附表
附表1: VAS評分
附表2: WOMAC評分
附表3: lequesne評分
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]人臍血間充質(zhì)干細(xì)胞移植對新生大鼠缺氧缺血性腦損傷的神經(jīng)保護(hù)[J]. 周玉,莫國梁,趙婧,方平. 中國組織工程研究. 2019(13)
[2]中藥復(fù)方對骨性關(guān)節(jié)炎干預(yù)機(jī)制的研究進(jìn)展[J]. 張人龍,劉強(qiáng),李戰(zhàn)鷹,解燕晨,王嘉軍. 中國民族民間醫(yī)藥. 2019(01)
[3]哌拉西林他唑巴坦鈉誘導(dǎo)免疫性溶血反應(yīng)的研究[J]. 陽子驥,莫柱寧,焦偉,羅瑞獻(xiàn),黎海瀾,葉冬梅. 中國臨床新醫(yī)學(xué). 2018(12)
[4]中老年人不同季節(jié)血25羥維生素D水平變化及其與骨代謝關(guān)系的研究[J]. 徐國玲,顏曉東. 中國臨床新醫(yī)學(xué). 2018(12)
[5]加味青娥丸對模擬失重狀態(tài)下小鼠骨顯微結(jié)構(gòu)和β-catenin及DKK-1表達(dá)水平的影響[J]. 帥波,沈霖,楊艷萍,馬陳,徐曉娟,盧芙蓉,廖奕. 中國臨床新醫(yī)學(xué). 2018(12)
[6]剖宮產(chǎn)產(chǎn)婦腰麻后低血壓危險(xiǎn)因素前瞻性多元逐步Logistic回歸分析[J]. 史景發(fā),汪勝友. 中國計(jì)劃生育和婦產(chǎn)科. 2018(12)
[7]多奈哌齊聯(lián)合瑞舒伐他汀治療老年血管性癡呆療效及對血清炎癥因子、氧化應(yīng)激的影響[J]. 韓燕,唐春霞. 湖南師范大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2018(06)
[8]針刀加圓鈍針治療梨狀肌綜合征的臨床效果[J]. 周建斌,張瑩瑩,李開平. 中國醫(yī)藥導(dǎo)報(bào). 2018(36)
[9]電針對肢體缺血再灌注誘發(fā)兔肺損傷的影響[J]. 練毅,余劍波,宮麗榮,李靜,張志,張圓,闞永星. 中國中西醫(yī)結(jié)合外科雜志. 2018(06)
[10]3.0T MRI聯(lián)合多層螺旋CT對宮頸癌患者術(shù)前TNM分期及分化程度的診斷價(jià)值[J]. 張海燕,張瑤,彭婕,楊磊. 癌癥進(jìn)展. 2018(14)
博士論文
[1]肝郁脾虛證大鼠肝臟能量代謝紊亂的機(jī)制及逍遙散的調(diào)節(jié)作用[D]. 潘秋霞.北京中醫(yī)藥大學(xué) 2018
[2]肝郁脾虛證大鼠下丘腦nesfatin-1-POMC/OT網(wǎng)絡(luò)的變化及逍遙散的調(diào)節(jié)作用[D]. 馬慶宇.北京中醫(yī)藥大學(xué) 2017
[3]基于IL-1β/MAPKs通路探討威靈仙總皂苷對骨關(guān)節(jié)炎軟骨細(xì)胞凋亡的影響[D]. 趙寶祥.湖北中醫(yī)藥大學(xué) 2016
碩士論文
[1]膝痹通方聯(lián)合富血小板血漿治療中度膝骨關(guān)節(jié)炎的臨床研究[D]. 田永川.中國中醫(yī)科學(xué)院 2018
[2]肝郁脾虛證大鼠十二指腸和下丘腦CCK、CCK1R變化及逍遙散的調(diào)節(jié)作用[D]. 王方方.北京中醫(yī)藥大學(xué) 2018
[3]肝郁脾虛證模型大鼠血管活性腸肽及其受體變化及逍遙散的調(diào)節(jié)作用[D]. 王亭曄.北京中醫(yī)藥大學(xué) 2018
[4]六經(jīng)辨證治療兒童慢性咳嗽的臨床療效評價(jià)研究[D]. 黃玉芳(Wang Yook Fong).廣州中醫(yī)藥大學(xué) 2018
[5]柴馨六君子湯聯(lián)合西藥治療肝郁脾虛型CSG臨床觀察[D]. 莫壯利.廣州中醫(yī)藥大學(xué) 2018
[6]骨癌痛大鼠鞘內(nèi)應(yīng)用嗎啡鎮(zhèn)痛對MOR表達(dá)水平的影響[D]. 劉赫琪.北京市結(jié)核病胸部腫瘤研究所 2018
[7]益腎降濁通絡(luò)方治療早期消渴腎。怅巸商搾稘狃鲎C)的臨床觀察[D]. 劉健飛.長春中醫(yī)藥大學(xué) 2018
[8]基于益氣活血法改善人工全膝關(guān)節(jié)置換術(shù)后早期臨床療效的研究[D]. 邱成新.中國中醫(yī)科學(xué)院 2017
[9]止血祛瘀明目片與復(fù)方血栓通膠囊對照治療RVO“眼底出血”臨床試驗(yàn)[D]. 張淑玲.北京中醫(yī)藥大學(xué) 2017
[10]雷公藤內(nèi)酯醇對SKOV3/DDP細(xì)胞黏附、侵襲和轉(zhuǎn)移能力的影響及機(jī)制探討[D]. 李小莉.南昌大學(xué) 2016
本文編號:3699419
【文章頁數(shù)】:61 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
英文縮略詞表
第一部分 文獻(xiàn)綜述
1 膝骨關(guān)節(jié)炎概述及PI3K/Akt信號通路研究進(jìn)展
1.1 軟骨細(xì)胞凋亡
1.2 PI3K/Akt信號通路與KOA的相關(guān)性
2 中藥治療膝骨關(guān)節(jié)炎的研究進(jìn)展
2.1 中醫(yī)學(xué)對膝骨關(guān)節(jié)炎病因病機(jī)的認(rèn)識
2.2 中藥復(fù)方防治膝骨關(guān)節(jié)炎的實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展
2.3 中藥有效成分防治膝骨關(guān)節(jié)炎的研究進(jìn)展
參考文獻(xiàn)
第二部分 臨床研究
前言
1 臨床資料
1.1 病例來源
1.2 隨機(jī)分組
2 診療標(biāo)準(zhǔn)
2.1 診斷標(biāo)準(zhǔn)
2.2 納入標(biāo)準(zhǔn)
2.3 排除標(biāo)準(zhǔn)
2.4 脫落標(biāo)準(zhǔn)
3 研究方案
3.1 隨機(jī)分組
3.2 試驗(yàn)組
3.3 對照組
3.4 基礎(chǔ)治療
3.5 觀察指標(biāo)
4 統(tǒng)計(jì)分析
5 結(jié)果
5.1 基線分析
5.2 治療結(jié)束后VAS、WOMAC、Lequesne評分以及基質(zhì)金屬蛋白酶-1、白細(xì)胞介素-1比較
5.3 療效評價(jià)結(jié)果
5.4 不良事件
6 結(jié)論
7 討論
7.1 早期膝骨關(guān)節(jié)炎西醫(yī)治療現(xiàn)狀
7.2 IL-1、TNF-α在骨關(guān)節(jié)炎發(fā)病中的作用
7.3 本研究中補(bǔ)腎除濕方療效作用分析
7.4 存在的問題與展望
參考文獻(xiàn)
第三部分 實(shí)驗(yàn)研究
前言
1 實(shí)驗(yàn)材料
1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
1.3 實(shí)驗(yàn)藥物
1.4 實(shí)驗(yàn)試劑
1.5 實(shí)驗(yàn)儀器
1.6 主要試劑的配制
2 實(shí)驗(yàn)方法
2.1 C28/I2人軟骨細(xì)胞的培養(yǎng)
2.2 正式實(shí)驗(yàn)條件的確定(CCK-8法確定干預(yù)措施的時(shí)效、量效關(guān)系)
2.3 流式細(xì)胞術(shù)檢測各組細(xì)胞凋亡情況
2.4 Western-blot法檢測蛋白表達(dá)
2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3 結(jié)果
3.1 成功建立軟骨細(xì)胞凋亡模型
3.2 補(bǔ)腎除濕方含藥血清的最佳干預(yù)條件
3.3 補(bǔ)腎除濕方含藥血清對細(xì)胞凋亡的影響
3.4 補(bǔ)腎除濕方含藥血清對Bax、caspase-9及Akt蛋白表達(dá)的影響
4 討論
4.1 軟骨細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)
4.2 軟骨細(xì)胞凋亡模型的建立
4.3 PI3K/Akt信號通路與軟骨細(xì)胞凋亡的關(guān)系
4.4 補(bǔ)腎除濕方含藥血清對細(xì)胞凋亡的干預(yù)作用
4.5 關(guān)于中藥復(fù)方體外實(shí)驗(yàn)給藥方式的討論
4.6 存在的問題與展望
參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡歷
附表
附表1: VAS評分
附表2: WOMAC評分
附表3: lequesne評分
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]人臍血間充質(zhì)干細(xì)胞移植對新生大鼠缺氧缺血性腦損傷的神經(jīng)保護(hù)[J]. 周玉,莫國梁,趙婧,方平. 中國組織工程研究. 2019(13)
[2]中藥復(fù)方對骨性關(guān)節(jié)炎干預(yù)機(jī)制的研究進(jìn)展[J]. 張人龍,劉強(qiáng),李戰(zhàn)鷹,解燕晨,王嘉軍. 中國民族民間醫(yī)藥. 2019(01)
[3]哌拉西林他唑巴坦鈉誘導(dǎo)免疫性溶血反應(yīng)的研究[J]. 陽子驥,莫柱寧,焦偉,羅瑞獻(xiàn),黎海瀾,葉冬梅. 中國臨床新醫(yī)學(xué). 2018(12)
[4]中老年人不同季節(jié)血25羥維生素D水平變化及其與骨代謝關(guān)系的研究[J]. 徐國玲,顏曉東. 中國臨床新醫(yī)學(xué). 2018(12)
[5]加味青娥丸對模擬失重狀態(tài)下小鼠骨顯微結(jié)構(gòu)和β-catenin及DKK-1表達(dá)水平的影響[J]. 帥波,沈霖,楊艷萍,馬陳,徐曉娟,盧芙蓉,廖奕. 中國臨床新醫(yī)學(xué). 2018(12)
[6]剖宮產(chǎn)產(chǎn)婦腰麻后低血壓危險(xiǎn)因素前瞻性多元逐步Logistic回歸分析[J]. 史景發(fā),汪勝友. 中國計(jì)劃生育和婦產(chǎn)科. 2018(12)
[7]多奈哌齊聯(lián)合瑞舒伐他汀治療老年血管性癡呆療效及對血清炎癥因子、氧化應(yīng)激的影響[J]. 韓燕,唐春霞. 湖南師范大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2018(06)
[8]針刀加圓鈍針治療梨狀肌綜合征的臨床效果[J]. 周建斌,張瑩瑩,李開平. 中國醫(yī)藥導(dǎo)報(bào). 2018(36)
[9]電針對肢體缺血再灌注誘發(fā)兔肺損傷的影響[J]. 練毅,余劍波,宮麗榮,李靜,張志,張圓,闞永星. 中國中西醫(yī)結(jié)合外科雜志. 2018(06)
[10]3.0T MRI聯(lián)合多層螺旋CT對宮頸癌患者術(shù)前TNM分期及分化程度的診斷價(jià)值[J]. 張海燕,張瑤,彭婕,楊磊. 癌癥進(jìn)展. 2018(14)
博士論文
[1]肝郁脾虛證大鼠肝臟能量代謝紊亂的機(jī)制及逍遙散的調(diào)節(jié)作用[D]. 潘秋霞.北京中醫(yī)藥大學(xué) 2018
[2]肝郁脾虛證大鼠下丘腦nesfatin-1-POMC/OT網(wǎng)絡(luò)的變化及逍遙散的調(diào)節(jié)作用[D]. 馬慶宇.北京中醫(yī)藥大學(xué) 2017
[3]基于IL-1β/MAPKs通路探討威靈仙總皂苷對骨關(guān)節(jié)炎軟骨細(xì)胞凋亡的影響[D]. 趙寶祥.湖北中醫(yī)藥大學(xué) 2016
碩士論文
[1]膝痹通方聯(lián)合富血小板血漿治療中度膝骨關(guān)節(jié)炎的臨床研究[D]. 田永川.中國中醫(yī)科學(xué)院 2018
[2]肝郁脾虛證大鼠十二指腸和下丘腦CCK、CCK1R變化及逍遙散的調(diào)節(jié)作用[D]. 王方方.北京中醫(yī)藥大學(xué) 2018
[3]肝郁脾虛證模型大鼠血管活性腸肽及其受體變化及逍遙散的調(diào)節(jié)作用[D]. 王亭曄.北京中醫(yī)藥大學(xué) 2018
[4]六經(jīng)辨證治療兒童慢性咳嗽的臨床療效評價(jià)研究[D]. 黃玉芳(Wang Yook Fong).廣州中醫(yī)藥大學(xué) 2018
[5]柴馨六君子湯聯(lián)合西藥治療肝郁脾虛型CSG臨床觀察[D]. 莫壯利.廣州中醫(yī)藥大學(xué) 2018
[6]骨癌痛大鼠鞘內(nèi)應(yīng)用嗎啡鎮(zhèn)痛對MOR表達(dá)水平的影響[D]. 劉赫琪.北京市結(jié)核病胸部腫瘤研究所 2018
[7]益腎降濁通絡(luò)方治療早期消渴腎。怅巸商搾稘狃鲎C)的臨床觀察[D]. 劉健飛.長春中醫(yī)藥大學(xué) 2018
[8]基于益氣活血法改善人工全膝關(guān)節(jié)置換術(shù)后早期臨床療效的研究[D]. 邱成新.中國中醫(yī)科學(xué)院 2017
[9]止血祛瘀明目片與復(fù)方血栓通膠囊對照治療RVO“眼底出血”臨床試驗(yàn)[D]. 張淑玲.北京中醫(yī)藥大學(xué) 2017
[10]雷公藤內(nèi)酯醇對SKOV3/DDP細(xì)胞黏附、侵襲和轉(zhuǎn)移能力的影響及機(jī)制探討[D]. 李小莉.南昌大學(xué) 2016
本文編號:3699419
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