基于MAPK信號(hào)通路的香葉木素抗腫瘤活性及機(jī)制研究
發(fā)布時(shí)間:2022-08-11 18:02
近年來我國惡性腫瘤發(fā)病率、死亡率呈持續(xù)增長趨勢(shì),一方面可能是民眾健康普查重視程度不夠高,社會(huì)腫瘤防治宣傳相對(duì)薄弱,導(dǎo)致早期篩查診斷普及率低,大多數(shù)癌癥患者確診時(shí)已處于中晚期,治療效果相對(duì)較差,另一方面生態(tài)環(huán)境問題日益嚴(yán)峻,癌癥發(fā)病率居高不下與空氣污染、飲用水安全等問題密切相關(guān)。香葉木素是天然黃酮類化合物的一種,具有抗腫瘤、抗炎、抗氧化以及保護(hù)中樞神經(jīng)系統(tǒng)等作用。本文將對(duì)香葉木素的體外和體內(nèi)抗腫瘤活性進(jìn)行研究,并探討其可能的作用機(jī)制。目的:觀察香葉木素在體外對(duì)五種人源腫瘤細(xì)胞株生長的抑制作用,并進(jìn)一步探究其對(duì)篩選出的最敏感瘤株人乳腺癌細(xì)胞MCF-7生長抑制的作用機(jī)制;其次研究香葉木素對(duì)H22腹水瘤小鼠和H22實(shí)體瘤小鼠的影響,評(píng)價(jià)其體內(nèi)藥效。方法:采用MTT法檢測(cè)不同濃度香葉木素對(duì)人乳腺癌細(xì)胞MCF-7、人肝癌細(xì)胞Hep G2、人胃癌細(xì)胞MGC-803、人前列腺癌細(xì)胞PC3和人卵巢癌細(xì)胞SK-OV-3的增殖抑制作用;倒置顯微鏡觀察香葉木素作用前后MCF-7細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化;Annexin V-FITC/PI雙染法結(jié)合流式細(xì)胞儀檢測(cè)香葉木素誘導(dǎo)MCF-7細(xì)胞凋亡的凋亡率;PI染色法結(jié)合流式...
【文章頁數(shù)】:80 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
縮略詞表
前言
第一章 香葉木素體外抗腫瘤活性篩選
1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器
1.1 細(xì)胞株
1.2 藥物
1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
1.4 實(shí)驗(yàn)試劑與耗材
1.5 試劑的配制
2 實(shí)驗(yàn)方法
2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇、傳代及凍存
2.2 MTT比色法
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
4 實(shí)驗(yàn)討論
第二章 香葉木素抑制人乳腺癌MCF-7 細(xì)胞增殖的機(jī)制探討
1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器
1.1 細(xì)胞株
1.2 藥物
1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
1.4 實(shí)驗(yàn)試劑與耗材
1.5 試劑的配制
2 實(shí)驗(yàn)方法
2.1 細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察
2.2 雙染法測(cè)細(xì)胞凋亡
2.3 線粒體膜電位檢測(cè)
2.4 細(xì)胞周期檢測(cè)
2.5 蛋白印記
2.6 統(tǒng)計(jì)分析
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.1 細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化
3.2 香葉木素誘導(dǎo)人乳腺癌MCF-7 細(xì)胞凋亡
3.3 香葉木素對(duì)人乳腺癌MCF-7 細(xì)胞線粒體膜電位的影響
3.4 香葉木素使人乳腺癌MCF-7 細(xì)胞發(fā)生周期阻滯
3.5 香葉木素對(duì)人乳腺癌MCF-7 細(xì)胞MAPK信號(hào)通路蛋白表達(dá)的影響
4 實(shí)驗(yàn)討論
4.1 細(xì)胞形態(tài)學(xué)的變化
4.2 Annexin V-PI雙染法檢測(cè)細(xì)胞凋亡
4.3 JC-1 熒光探針檢測(cè)線粒體膜電位變化
4.4 PI染色法檢測(cè)細(xì)胞周期
4.5 MAPK信號(hào)通路
第三章 香葉木素體內(nèi)抗腫瘤作用探究
1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器
1.1 細(xì)胞株
1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
1.3 藥物
1.4 實(shí)驗(yàn)儀器
1.5 實(shí)驗(yàn)試劑與耗材
1.6 試劑的配制
2 實(shí)驗(yàn)方法
2.1 H22小鼠實(shí)體瘤模型
2.2 H22小鼠腹水瘤模型
2.3 統(tǒng)計(jì)分析
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.1 香葉木素對(duì)小鼠H22實(shí)體瘤抑制作用
3.2 香葉木素對(duì)小鼠H22腹水瘤抑制作用
4 實(shí)驗(yàn)討論
4.1 香葉木素對(duì)H22實(shí)體瘤小鼠脾指數(shù)和胸腺指數(shù)的影響
4.2 香葉木素對(duì)H22實(shí)體瘤小鼠腫瘤生長的影響
4.3 香葉木素對(duì)H22腹水瘤小鼠血清中ALT、AST的影響
4.4 香葉木素對(duì)H22腹水瘤小鼠生存時(shí)間的影響
結(jié)語與創(chuàng)新
正文參考文獻(xiàn)
附錄
1 文獻(xiàn)綜述
綜述參考文獻(xiàn)
2 研究生期間發(fā)表論文
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]腫瘤登記工作中Excel軟件的應(yīng)用技巧[J]. 朱健,蔣俊杰,陳永勝,陳建國. 中國慢性病預(yù)防與控制. 2016(08)
[2]倒置顯微鏡技術(shù)發(fā)展趨勢(shì)[J]. 崔志英. 科技傳播. 2016(13)
[3]溴隱亭對(duì)垂體泌乳素腺瘤血管形成的影響及其分子作用機(jī)制研究[J]. 陳宏謀,鄭捷敏,閆憲磊,劉全,黎耀,肖振勇,陳家康. 實(shí)用心腦肺血管病雜志. 2016(03)
[4]2009-2014年山東省泰安市居民原發(fā)性肝癌生存狀況分析[J]. 鄧陽,陳清梅,陳睿. 中華腫瘤防治雜志. 2016(01)
[5]JNK介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡[J]. 張倩,張東君,叢霞,李華濤,曹榮峰,田文儒. 中國畜牧雜志. 2015(23)
[6]納米銀參與的化學(xué)發(fā)光法測(cè)定蜘蛛香中的香葉木素[J]. 李麗,周紅暇,劉焱,王科玲,左學(xué)紅,王燦. 中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志. 2015(20)
[7]植物總黃酮抗腫瘤作用機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 陳凱,陳錢,黃成然,林峰,龐苗苗,姜婷云,沈楠. 吉林醫(yī)藥學(xué)院學(xué)報(bào). 2015(04)
[8]二苯乙烯苷對(duì)正常人肝細(xì)胞增殖的抑制率及影響因素研究[J]. 李娜,馬致潔,孟雅坤,王亞,李曉菲,涂燦,張雅銘,牛明,趙艷玲,肖小河,康廷國,游云,王伽伯. 中國藥物警戒. 2015(07)
[9]三種黃酮清除自由基活性的研究[J]. 鄒淑君,許樹軍,付起風(fēng),徐暘. 化學(xué)工程師. 2015(05)
[10]花生殼化學(xué)成分研究[J]. 左愛學(xué),孫赟,錢紹祥,饒高雄. 中藥材. 2015(02)
博士論文
[1]毛瓣無患子果皮、懷菊和石榴花生物活性成分的研究[D]. 謝媛媛.沈陽藥科大學(xué) 2009
碩士論文
[1]紅景天苷抗肝癌作用及其機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究[D]. 何小喜.廣西醫(yī)科大學(xué) 2014
[2]壁虎勻漿液抗小鼠腎包膜下移植H22肝癌的實(shí)驗(yàn)研究[D]. 趙華山.河北聯(lián)合大學(xué) 2014
本文編號(hào):3675129
【文章頁數(shù)】:80 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
縮略詞表
前言
第一章 香葉木素體外抗腫瘤活性篩選
1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器
1.1 細(xì)胞株
1.2 藥物
1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
1.4 實(shí)驗(yàn)試劑與耗材
1.5 試劑的配制
2 實(shí)驗(yàn)方法
2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇、傳代及凍存
2.2 MTT比色法
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
4 實(shí)驗(yàn)討論
第二章 香葉木素抑制人乳腺癌MCF-7 細(xì)胞增殖的機(jī)制探討
1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器
1.1 細(xì)胞株
1.2 藥物
1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
1.4 實(shí)驗(yàn)試劑與耗材
1.5 試劑的配制
2 實(shí)驗(yàn)方法
2.1 細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察
2.2 雙染法測(cè)細(xì)胞凋亡
2.3 線粒體膜電位檢測(cè)
2.4 細(xì)胞周期檢測(cè)
2.5 蛋白印記
2.6 統(tǒng)計(jì)分析
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.1 細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化
3.2 香葉木素誘導(dǎo)人乳腺癌MCF-7 細(xì)胞凋亡
3.3 香葉木素對(duì)人乳腺癌MCF-7 細(xì)胞線粒體膜電位的影響
3.4 香葉木素使人乳腺癌MCF-7 細(xì)胞發(fā)生周期阻滯
3.5 香葉木素對(duì)人乳腺癌MCF-7 細(xì)胞MAPK信號(hào)通路蛋白表達(dá)的影響
4 實(shí)驗(yàn)討論
4.1 細(xì)胞形態(tài)學(xué)的變化
4.2 Annexin V-PI雙染法檢測(cè)細(xì)胞凋亡
4.3 JC-1 熒光探針檢測(cè)線粒體膜電位變化
4.4 PI染色法檢測(cè)細(xì)胞周期
4.5 MAPK信號(hào)通路
第三章 香葉木素體內(nèi)抗腫瘤作用探究
1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器
1.1 細(xì)胞株
1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
1.3 藥物
1.4 實(shí)驗(yàn)儀器
1.5 實(shí)驗(yàn)試劑與耗材
1.6 試劑的配制
2 實(shí)驗(yàn)方法
2.1 H22小鼠實(shí)體瘤模型
2.2 H22小鼠腹水瘤模型
2.3 統(tǒng)計(jì)分析
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.1 香葉木素對(duì)小鼠H22實(shí)體瘤抑制作用
3.2 香葉木素對(duì)小鼠H22腹水瘤抑制作用
4 實(shí)驗(yàn)討論
4.1 香葉木素對(duì)H22實(shí)體瘤小鼠脾指數(shù)和胸腺指數(shù)的影響
4.2 香葉木素對(duì)H22實(shí)體瘤小鼠腫瘤生長的影響
4.3 香葉木素對(duì)H22腹水瘤小鼠血清中ALT、AST的影響
4.4 香葉木素對(duì)H22腹水瘤小鼠生存時(shí)間的影響
結(jié)語與創(chuàng)新
正文參考文獻(xiàn)
附錄
1 文獻(xiàn)綜述
綜述參考文獻(xiàn)
2 研究生期間發(fā)表論文
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]腫瘤登記工作中Excel軟件的應(yīng)用技巧[J]. 朱健,蔣俊杰,陳永勝,陳建國. 中國慢性病預(yù)防與控制. 2016(08)
[2]倒置顯微鏡技術(shù)發(fā)展趨勢(shì)[J]. 崔志英. 科技傳播. 2016(13)
[3]溴隱亭對(duì)垂體泌乳素腺瘤血管形成的影響及其分子作用機(jī)制研究[J]. 陳宏謀,鄭捷敏,閆憲磊,劉全,黎耀,肖振勇,陳家康. 實(shí)用心腦肺血管病雜志. 2016(03)
[4]2009-2014年山東省泰安市居民原發(fā)性肝癌生存狀況分析[J]. 鄧陽,陳清梅,陳睿. 中華腫瘤防治雜志. 2016(01)
[5]JNK介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡[J]. 張倩,張東君,叢霞,李華濤,曹榮峰,田文儒. 中國畜牧雜志. 2015(23)
[6]納米銀參與的化學(xué)發(fā)光法測(cè)定蜘蛛香中的香葉木素[J]. 李麗,周紅暇,劉焱,王科玲,左學(xué)紅,王燦. 中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志. 2015(20)
[7]植物總黃酮抗腫瘤作用機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 陳凱,陳錢,黃成然,林峰,龐苗苗,姜婷云,沈楠. 吉林醫(yī)藥學(xué)院學(xué)報(bào). 2015(04)
[8]二苯乙烯苷對(duì)正常人肝細(xì)胞增殖的抑制率及影響因素研究[J]. 李娜,馬致潔,孟雅坤,王亞,李曉菲,涂燦,張雅銘,牛明,趙艷玲,肖小河,康廷國,游云,王伽伯. 中國藥物警戒. 2015(07)
[9]三種黃酮清除自由基活性的研究[J]. 鄒淑君,許樹軍,付起風(fēng),徐暘. 化學(xué)工程師. 2015(05)
[10]花生殼化學(xué)成分研究[J]. 左愛學(xué),孫赟,錢紹祥,饒高雄. 中藥材. 2015(02)
博士論文
[1]毛瓣無患子果皮、懷菊和石榴花生物活性成分的研究[D]. 謝媛媛.沈陽藥科大學(xué) 2009
碩士論文
[1]紅景天苷抗肝癌作用及其機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究[D]. 何小喜.廣西醫(yī)科大學(xué) 2014
[2]壁虎勻漿液抗小鼠腎包膜下移植H22肝癌的實(shí)驗(yàn)研究[D]. 趙華山.河北聯(lián)合大學(xué) 2014
本文編號(hào):3675129
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