基于代謝組學的車葉草苷抗衰老作用評價及機制研究
發(fā)布時間:2022-08-01 16:53
衰老是生物進程的必然階段,同時伴隨著各種增齡性和退行性疾病,如心腦血管疾病、糖尿病、呼吸系統(tǒng)疾病、癌癥等。因此延緩機體衰老,提高生命的質(zhì)量,具有重要的意義。車葉草苷(Asperuloside)可以從杜仲科(Eucommiaecae)、茜草科(Rubiaceae)拉拉藤屬(Galium)、巴戟天屬(Morinda)等植物中提取分離得到的一種環(huán)烯醚萜化合物。近年來的藥理研究表明,車葉草苷具有抗炎鎮(zhèn)痛、降血壓、抗細胞染色體誘變作用多種藥理活性,但是關于車葉草苷抗衰老的研究卻很少。本文以車葉草苷為研究對象,以果蠅為模式生物,對車葉草苷抗氧化、延緩衰老的作用進行評價。旨在研究車葉草苷的抗氧化和延緩衰老的作用及機制,為車葉草苷的研究與開發(fā)利用提供試驗理論依據(jù)。實驗研究的主要結果如下:1.車葉草苷延長野生型黑腹果蠅的壽命及作用機制以OR系野生型黑腹果蠅為模式生物,考察車葉草苷對自然衰老模型中雄性果蠅的平均壽命、最高壽命、半數(shù)死亡時間的影響。在15 d齡和35 d齡時,檢測雄果蠅體內(nèi)CAT的含量。在35 d齡時進行雙氧水急性氧化損傷實驗,研究車葉草苷對氧化應激的保護作用。在0、15和35 d齡時,采用...
【文章頁數(shù)】:89 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
縮略詞英文注釋表
第一章 緒論
1.1 衰老的研究進展
1.1.1 自由基學說
1.1.2 端粒學說
1.1.3 DNA損傷學說
1.1.4 遺傳學說
1.1.5 線粒體學說
1.2 代謝組學
1.2.1 代謝組學分析流程
1.2.2 基于代謝組學的分析技術手段
1.2.3 代謝組學的應用
1.3 車葉草苷藥理活性的研究概述
1.3.1 抗炎
1.3.2 鎮(zhèn)痛
1.3.3 降血壓
1.3.4 抗細胞染色體誘變
1.3.5 抗肥胖
1.3.6 抗菌
1.3.7 抗腫瘤
1.3.8 其他藥理作用
1.4 本課題研究的背景和意義
1.5 本課題的主要研究思路、技術路線、研究內(nèi)容和創(chuàng)新點
1.5.1 實驗技術路線
1.5.2 主要研究內(nèi)容
1.5.3 創(chuàng)新點
第二章 車葉草苷延長OR果蠅的壽命及機制研究
2.1 實驗材料
2.1.1 實驗藥物
2.1.2 實驗動物
2.1.3 培養(yǎng)基配制
2.1.3.1 基礎培養(yǎng)基的配制
2.1.3.2 給藥培養(yǎng)基的配制
2.1.4 實驗試劑
2.1.5 實驗儀器
2.2 試驗方法
2.2.1 車葉草苷對OR果蠅壽命的影響
2.2.1.1 果蠅性別辨別
2.2.1.2 實驗果蠅分組
2.2.1.3 果蠅考察指標
2.2.2 果蠅垂直攀爬能力的檢測
2.2.3 果蠅體內(nèi)CAT活力的測定
2.2.4 雙氧水急性氧化果蠅模型壽命試驗
2.2.5 果蠅體內(nèi)衰老相關基因表達的測定
2.2.5.1 果蠅總RNA的提取
2.2.5.2 RNA純度和濃度的測定
2.2.5.3 RNA完整性的檢測
2.2.5.4 RNA逆轉(zhuǎn)錄
2.2.5.5 qRT-PCR反應
2.2.5.6 試驗數(shù)據(jù)分析
2.3 實驗結果
2.3.1 車葉草苷延長了OR果蠅的壽命
2.3.2 車葉草苷對OR果蠅垂直爬行能力的影響
2.3.3 車葉草苷對OR果蠅CAT活力的影響
2.3.4 車葉草苷改善了OR果蠅的抗氧化應激能力
2.3.5 車葉草苷調(diào)節(jié)OR果蠅體內(nèi)衰老相關基因的表達量
2.4 討論
2.5 本章小結
第三章 車葉草苷延長w1118 果蠅的壽命
3.1 實驗材料
3.1.1 實驗藥物
3.1.2 實驗動物
3.1.3 培養(yǎng)基配制
3.1.3.1 基礎培養(yǎng)基的配制
3.1.3.2 給藥培養(yǎng)基的配制
3.1.4 主要試劑
3.1.5 主要儀器
3.2 實驗方法
3.2.1 攝食限制w1118 果蠅模型壽命試驗
3.2.1.1 實驗分組
3.2.1.2 指標考察
3.2.2 車葉草苷延長w1118 果蠅的壽命
3.2.2.1 果蠅分組
3.2.2.2 指標考察
3.2.3 w1118 果蠅的急性損傷實驗
3.2.4 w1118 果蠅味覺行為學檢測
3.2.4.1 果蠅腹部紅色程度的考察
3.2.4.2 建立果蠅攝食量標準曲線
3.2.4.4 比色法測定果蠅攝食量
3.2.5 w1118 果蠅總SOD1 活性檢測
3.2.6 統(tǒng)計學分析
3.3 實驗結果
3.3.1 攝食限制對w1118 果蠅壽命的影響
3.3.2 車葉草苷對w1118 果蠅壽命的影響
3.3.3 車葉草苷改善了w1118 果蠅的抗氧化應激能力
3.3.4 車葉草苷對w1118 果蠅食物攝入的影響
3.3.5 車葉草苷對w1118 果蠅體內(nèi)SOD1 活力的影響
3.4 討論
3.5 本章小結
第四章 基于GC-MS技術w1118 果蠅代謝組學的研究
4.1 實驗材料
4.1.1 主要儀器
4.1.2 主要試劑
4.1.3 實驗動物
4.1.4 實驗藥物
4.2 實驗方法
4.2.1 果蠅的培養(yǎng)
4.2.2 樣品預處理
4.2.3 GC-MS分析條件
4.2.4 統(tǒng)計學分析
4.3 實驗結果
4.3.1 果蠅樣品的GC-MS分析
4.3.2 果蠅樣品的GC-MS數(shù)據(jù)的統(tǒng)計學分析
4.4 討論
4.5 本章小結
第五章 全文總結與展望
5.1 研究工作總結
5.2 工作展望
參考文獻
致謝
攻讀碩士學位期間發(fā)表的學術論文及其他科研成果
【參考文獻】:
期刊論文
[1]車葉草苷的研究進展[J]. 洪慶,徐曼麗,湯建. 中國野生植物資源. 2018(04)
[2]雞矢藤環(huán)烯醚萜苷體外抗腫瘤活性研究[J]. 李紅霞,楊磊,陳小麗,代小蘭,徐立. 中國藥師. 2017(12)
[3]中醫(yī)藥對帕金森病動物模型的治療機制[J]. 吳斌,趙書志,王修敏,董其謙,鄭國慶. 中國中藥雜志. 2011(18)
[4]梔子環(huán)烯醚萜苷治療腦缺血損傷的作用機制研究[J]. 楊軍宣,張海燕,趙成城,黃勤挽,楊明. 中國實驗方劑學雜志. 2010(06)
[5]女貞子中2種主要裂環(huán)環(huán)醚萜苷成分的分離鑒定及其抗氧化活性研究[J]. 李陽,左燕,孫文基. 中藥材. 2007(05)
[6]山茱萸環(huán)烯醚萜苷對局灶性腦缺血模型大鼠神經(jīng)功能和神經(jīng)元損傷的影響[J]. 張麗,李春陽,趙玲,王文,張?zhí)m,李林. 中國康復理論與實踐. 2007(03)
[7]巴戟天屬植物環(huán)烯醚萜類化學成分和藥理活性研究進展[J]. 徐吉銀,楚桐麗,丁平. 廣州中醫(yī)藥大學學報. 2006(03)
[8]老齡大鼠心臟和腦組織中NO、SOD和MDA含量與衰老的關系[J]. 宋春梅,馬洪波,王長文,李永進. 吉林醫(yī)藥學院學報. 2005(03)
[9]杜仲葉浸提物制劑對大鼠血壓及心率的影響[J]. 翟文俊. 陜西教育學院學報. 2004(04)
[10]復方杜仲葉合劑對人體降壓作用的實驗研究[J]. 張瑛朝,張延敏,郭代立,馬朝宣. 中成藥. 2001(06)
博士論文
[1]雞屎藤(Paederia scandens)活性物質(zhì)和鎮(zhèn)痛藥理活性研究[D]. 陳宇峰.第二軍醫(yī)大學 2009
碩士論文
[1]桂花提取物的抗氧化及延緩衰老作用研究[D]. 黃玲艷.揚州大學 2017
[2]阿司匹林對果蠅抗衰老作用及其機制研究[D]. 宋朝春.四川農(nóng)業(yè)大學 2016
[3]蓮子多糖抗衰老功能及其分子機制的研究[D]. 張延秀.福建農(nóng)林大學 2013
[4]雞矢藤環(huán)烯醚萜苷鎮(zhèn)痛作用及機制的實驗研究[D]. 劉梅.安徽醫(yī)科大學 2009
[5]攝食限制對雄果蠅(Drosophila melanogaster)壽命和生殖能力的影響[D]. 車娜克.陜西師范大學 2007
[6]梓醇對永久性腦缺血大鼠保護作用及藥動學研究[D]. 陳立.重慶醫(yī)科大學 2007
本文編號:3667823
【文章頁數(shù)】:89 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
縮略詞英文注釋表
第一章 緒論
1.1 衰老的研究進展
1.1.1 自由基學說
1.1.2 端粒學說
1.1.3 DNA損傷學說
1.1.4 遺傳學說
1.1.5 線粒體學說
1.2 代謝組學
1.2.1 代謝組學分析流程
1.2.2 基于代謝組學的分析技術手段
1.2.3 代謝組學的應用
1.3 車葉草苷藥理活性的研究概述
1.3.1 抗炎
1.3.2 鎮(zhèn)痛
1.3.3 降血壓
1.3.4 抗細胞染色體誘變
1.3.5 抗肥胖
1.3.6 抗菌
1.3.7 抗腫瘤
1.3.8 其他藥理作用
1.4 本課題研究的背景和意義
1.5 本課題的主要研究思路、技術路線、研究內(nèi)容和創(chuàng)新點
1.5.1 實驗技術路線
1.5.2 主要研究內(nèi)容
1.5.3 創(chuàng)新點
第二章 車葉草苷延長OR果蠅的壽命及機制研究
2.1 實驗材料
2.1.1 實驗藥物
2.1.2 實驗動物
2.1.3 培養(yǎng)基配制
2.1.3.1 基礎培養(yǎng)基的配制
2.1.3.2 給藥培養(yǎng)基的配制
2.1.4 實驗試劑
2.1.5 實驗儀器
2.2 試驗方法
2.2.1 車葉草苷對OR果蠅壽命的影響
2.2.1.1 果蠅性別辨別
2.2.1.2 實驗果蠅分組
2.2.1.3 果蠅考察指標
2.2.2 果蠅垂直攀爬能力的檢測
2.2.3 果蠅體內(nèi)CAT活力的測定
2.2.4 雙氧水急性氧化果蠅模型壽命試驗
2.2.5 果蠅體內(nèi)衰老相關基因表達的測定
2.2.5.1 果蠅總RNA的提取
2.2.5.2 RNA純度和濃度的測定
2.2.5.3 RNA完整性的檢測
2.2.5.4 RNA逆轉(zhuǎn)錄
2.2.5.5 qRT-PCR反應
2.2.5.6 試驗數(shù)據(jù)分析
2.3 實驗結果
2.3.1 車葉草苷延長了OR果蠅的壽命
2.3.2 車葉草苷對OR果蠅垂直爬行能力的影響
2.3.3 車葉草苷對OR果蠅CAT活力的影響
2.3.4 車葉草苷改善了OR果蠅的抗氧化應激能力
2.3.5 車葉草苷調(diào)節(jié)OR果蠅體內(nèi)衰老相關基因的表達量
2.4 討論
2.5 本章小結
第三章 車葉草苷延長w1118 果蠅的壽命
3.1 實驗材料
3.1.1 實驗藥物
3.1.2 實驗動物
3.1.3 培養(yǎng)基配制
3.1.3.1 基礎培養(yǎng)基的配制
3.1.3.2 給藥培養(yǎng)基的配制
3.1.4 主要試劑
3.1.5 主要儀器
3.2 實驗方法
3.2.1 攝食限制w1118 果蠅模型壽命試驗
3.2.1.1 實驗分組
3.2.1.2 指標考察
3.2.2 車葉草苷延長w1118 果蠅的壽命
3.2.2.1 果蠅分組
3.2.2.2 指標考察
3.2.3 w1118 果蠅的急性損傷實驗
3.2.4 w1118 果蠅味覺行為學檢測
3.2.4.1 果蠅腹部紅色程度的考察
3.2.4.2 建立果蠅攝食量標準曲線
3.2.4.4 比色法測定果蠅攝食量
3.2.5 w1118 果蠅總SOD1 活性檢測
3.2.6 統(tǒng)計學分析
3.3 實驗結果
3.3.1 攝食限制對w1118 果蠅壽命的影響
3.3.2 車葉草苷對w1118 果蠅壽命的影響
3.3.3 車葉草苷改善了w1118 果蠅的抗氧化應激能力
3.3.4 車葉草苷對w1118 果蠅食物攝入的影響
3.3.5 車葉草苷對w1118 果蠅體內(nèi)SOD1 活力的影響
3.4 討論
3.5 本章小結
第四章 基于GC-MS技術w1118 果蠅代謝組學的研究
4.1 實驗材料
4.1.1 主要儀器
4.1.2 主要試劑
4.1.3 實驗動物
4.1.4 實驗藥物
4.2 實驗方法
4.2.1 果蠅的培養(yǎng)
4.2.2 樣品預處理
4.2.3 GC-MS分析條件
4.2.4 統(tǒng)計學分析
4.3 實驗結果
4.3.1 果蠅樣品的GC-MS分析
4.3.2 果蠅樣品的GC-MS數(shù)據(jù)的統(tǒng)計學分析
4.4 討論
4.5 本章小結
第五章 全文總結與展望
5.1 研究工作總結
5.2 工作展望
參考文獻
致謝
攻讀碩士學位期間發(fā)表的學術論文及其他科研成果
【參考文獻】:
期刊論文
[1]車葉草苷的研究進展[J]. 洪慶,徐曼麗,湯建. 中國野生植物資源. 2018(04)
[2]雞矢藤環(huán)烯醚萜苷體外抗腫瘤活性研究[J]. 李紅霞,楊磊,陳小麗,代小蘭,徐立. 中國藥師. 2017(12)
[3]中醫(yī)藥對帕金森病動物模型的治療機制[J]. 吳斌,趙書志,王修敏,董其謙,鄭國慶. 中國中藥雜志. 2011(18)
[4]梔子環(huán)烯醚萜苷治療腦缺血損傷的作用機制研究[J]. 楊軍宣,張海燕,趙成城,黃勤挽,楊明. 中國實驗方劑學雜志. 2010(06)
[5]女貞子中2種主要裂環(huán)環(huán)醚萜苷成分的分離鑒定及其抗氧化活性研究[J]. 李陽,左燕,孫文基. 中藥材. 2007(05)
[6]山茱萸環(huán)烯醚萜苷對局灶性腦缺血模型大鼠神經(jīng)功能和神經(jīng)元損傷的影響[J]. 張麗,李春陽,趙玲,王文,張?zhí)m,李林. 中國康復理論與實踐. 2007(03)
[7]巴戟天屬植物環(huán)烯醚萜類化學成分和藥理活性研究進展[J]. 徐吉銀,楚桐麗,丁平. 廣州中醫(yī)藥大學學報. 2006(03)
[8]老齡大鼠心臟和腦組織中NO、SOD和MDA含量與衰老的關系[J]. 宋春梅,馬洪波,王長文,李永進. 吉林醫(yī)藥學院學報. 2005(03)
[9]杜仲葉浸提物制劑對大鼠血壓及心率的影響[J]. 翟文俊. 陜西教育學院學報. 2004(04)
[10]復方杜仲葉合劑對人體降壓作用的實驗研究[J]. 張瑛朝,張延敏,郭代立,馬朝宣. 中成藥. 2001(06)
博士論文
[1]雞屎藤(Paederia scandens)活性物質(zhì)和鎮(zhèn)痛藥理活性研究[D]. 陳宇峰.第二軍醫(yī)大學 2009
碩士論文
[1]桂花提取物的抗氧化及延緩衰老作用研究[D]. 黃玲艷.揚州大學 2017
[2]阿司匹林對果蠅抗衰老作用及其機制研究[D]. 宋朝春.四川農(nóng)業(yè)大學 2016
[3]蓮子多糖抗衰老功能及其分子機制的研究[D]. 張延秀.福建農(nóng)林大學 2013
[4]雞矢藤環(huán)烯醚萜苷鎮(zhèn)痛作用及機制的實驗研究[D]. 劉梅.安徽醫(yī)科大學 2009
[5]攝食限制對雄果蠅(Drosophila melanogaster)壽命和生殖能力的影響[D]. 車娜克.陜西師范大學 2007
[6]梓醇對永久性腦缺血大鼠保護作用及藥動學研究[D]. 陳立.重慶醫(yī)科大學 2007
本文編號:3667823
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