合歡皮抗焦慮活性部位作用機理研究及主要活性成分對PC12細胞凋亡的影響
發(fā)布時間：2022-07-29 10:43
焦慮癥屬于一種慢性、長期、反復發(fā)作的精神性疾病,可造成身心兩方面的異常,嚴重者甚至威脅生命,影響患者及家人生活質量。目前,臨床抗焦慮藥物普遍存在一些明顯的副作用,因此開發(fā)安全、高效、低毒的天然抗焦慮藥物具有重要的理論意義和實際應用價值。合歡皮,為豆科植物合歡Albizia julibrissin Durazz.的干燥樹皮,是中醫(yī)常用的傳統(tǒng)鎮(zhèn)靜安神類中藥,其藥理作用廣泛,具有鎮(zhèn)靜、抗焦慮、抗腫瘤、抗生育、PAF受體拮抗等活性�，F代研究表明合歡皮能夠改善焦慮模型小鼠的焦慮樣行為,但尚未有關于其抗焦慮作用的細胞及分子機制的研究報道。本項目組前期的研究表明,木脂素類物質是合歡皮主要的抗焦慮有效物質。本文采用經典抗焦慮活性評價模型對分離得到的木脂素類物質抗焦慮主要活性部位（S-75部位）及其主要活性成分進行抗焦慮作用機制研究,研究內容分為以下三個部分:從整體動物水平,考察合歡皮S-75部位對急性應激后高架十字迷宮模型小鼠腦組織中5-HT1A受體(5-HT1AR)、GABAA受體（GABAAR）及5-HT
【文章頁數】：93 頁
【學位級別】：碩士
【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略詞表
前言
第一章 合歡皮木脂素類物質抗焦慮主要活性部位作用機制的整體研究..
1 實驗材料
1.1 儀器
1.2 試劑
1.3 實驗動物及分組
2 實驗方法
2.1 S-75部位對急性應激后高架十字迷宮模型小鼠腦組織中GABA_AR和5-HT_(1A)R蛋白表達量的影響
2.2 S-75部位對急性應激后高架十字迷宮模型小鼠腦組織中GABA_AR和5-HT_(1A)RmRNA表達量的影響
2.3 S-75部位對急性應激后高架十字迷宮模型小鼠腦組織中PKA,CREB,BDNF和TRKB蛋白表達量的影響
2.4 S-75部位對急性應激后高架十字迷宮模型小鼠腦組織中cAMP水平的影響
2.5 數據分析
3 實驗結果
3.1 S-75部位對急性應激后高架十字迷宮模型小鼠腦組織中GABA_AR和5-HT_(1A)R蛋白表達量的影響
3.2 S-75部位對急性應激后高架十字迷宮模型小鼠腦組織中GABA_AR和5-HT_(1A)RmRNA表達量的影響
3.3 S-75部位對急性應激后高架十字迷宮模型小鼠腦組織中PKA,CREB,BDNF和TRKB蛋白表達量的影響
3.4 S-75部位對急性應激后高架十字迷宮模型小鼠腦組織中cAMP水平的影響
4 討論
5 結論
第二章 合歡皮木脂素類物質抗焦慮主要活性部位對皮質酮誘導的PC12細胞損傷的保護作用
1 實驗材料
1.1 儀器
1.2 試劑與試藥
1.3 細胞株
2 實驗方法
2.1 PC12細胞培養(yǎng)
2.2 皮質酮(corticosterone,CORT)誘導PC12細胞損傷模型制備
2.3 受體阻斷劑及陽性藥的濃度篩選
2.4 S-75部位對皮質酮誘導的PC12細胞的保護作用
2.5 S-75部位及其協(xié)同受體阻斷劑對皮質酮誘導的PC12細胞中5-HT_(1A)R和GABA_ARmRNA表達量的影響
2.6 S-75部位及5-HT_(1A)R受體阻斷劑對皮質酮誘導的PC12細胞中PKA，CREB，BDNF和TRKB蛋白表達量的影響
2.7 S-75部位及5-HT_(1A)R受體阻斷劑對皮質酮誘導的PC12細胞中cAMP水平的影響
2.8 數據分析
3 實驗結果
3.1 皮質酮對PC12細胞損傷的MTT測定結果
3.2 受體阻斷劑及陽性藥的濃度篩選
3.3 S-75部位對皮質酮誘導的PC12細胞增殖的影響
3.4 S-75部位及其協(xié)同受體阻斷劑對皮質酮誘導的PC12細胞中5-HT_(1A)R和GABA_ARmRNA表達量的影響
3.5 S-75部位及5-HT_(1A)R受體阻斷劑對皮質酮誘導的PC12細胞中PKA,CREB,BDNF和TRKB蛋白表達量的影響
3.6 S-75部位及5-HT_(1A)R受體阻斷劑對皮質酮誘導的PC12細胞中cAMP水平的影響
4 討論
5 結論
第三章 木脂素類物質主要活性成分對皮質酮損傷的PC12細胞凋亡及線粒體凋亡信號通路的影響
1 實驗材料
1.1 儀器
1.2 試劑及試藥
2 實驗方法
2.1 S-75部位及其主要活性成分對皮質酮誘導的PC12細胞增殖的影響
2.2 SRG對皮質酮誘導的PC12細胞的保護作用
2.3 SRG對皮質酮誘導的PC12細胞LDH滲漏的影響
2.4 AnnexinV-FITC/PI雙染法流式細胞術檢測SRG對皮質酮誘導的PC12細胞凋亡的影響
2.5 TUNEL原位凋亡檢測試劑盒(熒光法檢測DNA片段化)檢測SRG對皮質酮誘導的PC12細胞凋亡的影響
2.6 SRG對皮質酮誘導的PC12細胞內[Ca~(2+)]的影響
2.7 SRG對皮質酮誘導的PC12細胞線粒體膜電位(?Ψm)的影響
2.8 SRG對皮質酮誘導的PC12細胞中CREB,BDNF,Bcl-2,Bax,細胞色素C(Cyt-C)和Caspase-3蛋白表達量的影響
2.9 數據分析
3 實驗結果
3.1 S-75部位及其主要活性成分對皮質酮誘導的PC12細胞增殖的影響
3.2 SRG對皮質酮誘導的PC12細胞的保護作用
3.3 SRG對皮質酮誘導的PC12細胞LDH滲漏的影響
3.4 AnnexinV-FITC/PI雙染法流式細胞術檢測SRG對皮質酮誘導的PC12細胞凋亡的影響
3.5 TUNEL原位凋亡檢測試劑盒(熒光法檢測DNA片段化)檢測SRG對皮質酮誘導的PC12細胞凋亡的影響
3.6 SRG對皮質酮誘導的PC12細胞內[Ca~(2+)]的影響
3.7 SRG對皮質酮誘導的PC12細胞線粒體膜電位(?Ψm)的影響.
3.8 SRG對皮質酮誘導的PC12細胞中CREB,BDNF,Bcl-2,Bax,細胞色素C(Cyt-C)和Caspase-3蛋白表達量的影響
4 討論
5 結論
結語與創(chuàng)新
文獻綜述
參考文獻
發(fā)表論文
致謝
【參考文獻】：
期刊論文
[1]慢性焦慮刺激對成年雌性大鼠性激素水平的影響[J]. 鄭源,張瀲,張良圣,張明祥,陳燕,羅堯岳,吳濤,梁雨. 湖南中醫(yī)藥大學學報. 2015(01)
[2]舒郁寧心湯對焦慮大鼠行為及血清神經肽和皮質酮水平的影響[J]. 王靜,陳利平,王發(fā)渭,孫志高,許成勇. 中國中醫(yī)急癥. 2013(09)
[3]舒肝顆粒治療更年期焦慮癥的機制研究[J]. 宋志宇,龐劍月,隋凈凈,李恒芬. 中藥藥理與臨床. 2013(03)
[4]Brain-derived neurotrophic factor prevents beta-amyloid-induced apoptosis of pheochromocytoma cells by regulating Bax/Bcl-2 expression[J]. Zhikun Sun1,Xingrong Ma2,Hongqi Yang1,Jiahua Zhao1,Jiewen Zhang1 1Department of Neurology,Henan Provincial People’s Hospital,Zhengzhou 450003,Henan Province,China 2Department of Neurology,the First Affiliated Hospital,Zhengzhou University,Zhengzhou 450052,Henan Province,China. Neural Regeneration Research. 2012(05)
[5]幾種抗焦慮藥的臨床應用及不良反應的比較研究[J]. 嚴貴亮,段建榮. 中國藥事. 2011(11)
[6]神經肽Y系統(tǒng)在高劑量咖啡因、可可堿誘導的大鼠焦慮行為中的作用機制[J]. 潘集陽,廖繼武,田徑,劉亞平. 實用醫(yī)學雜志. 2011(18)
[7]廣泛性焦慮患者血一氧化氮、一氧化氮合酶的含量研究[J]. 張晨,沈鑫華. 現代實用醫(yī)學. 2011(07)
[8]纈草素抗焦慮作用及其機制的初探[J]. 王延麗,劉勇,石晉麗,郭建友,鄭虎占,翟玉靜. 中國藥理學通報. 2011(04)
[9]解慮安神湯抗焦慮作用與GABAA-R關系的初步研究[J]. 周寧娜,曹東,何曉山,宋波,唐當柱. 云南中醫(yī)中藥雜志. 2011(02)
[10]安神解慮方對廣泛性焦慮大鼠腦磁共振波譜變化的干預作用[J]. 唐啟盛,李寧,羅斌,侯秀娟,黃育玲,臧鳳超,方芳. 中國中西醫(yī)結合雜志. 2011(01)
博士論文
[1]安神方抗焦慮作用的療效觀察及相關機制研究[D]. 張雪.南方醫(yī)科大學 2012
[2]酸棗仁湯抗焦慮作用的神經-內分泌-免疫網絡調節(jié)機制[D]. 王欣.北京中醫(yī)藥大學 2004
碩士論文
[1]合歡皮抗焦慮部位血清藥物化學初步研究及其化學成分分離[D]. 范小龍.湖北中醫(yī)藥大學 2016
[2]合歡皮提取物抗焦慮活性篩選及其對腦內神經遞質的影響[D]. 田微.湖北中醫(yī)藥大學 2015
[3]合歡皮水溶性木脂素部位提取純化工藝及其質量分析[D]. 方志興.湖北中醫(yī)藥大學 2014
[4]多巴胺受體拮抗劑對新生大鼠缺氧缺血腦損傷后焦慮樣行為及黑質酪氨酸羥化酶表達的影響[D]. 陶惠康.中南大學 2014
本文編號：3666316
【文章頁數】：93 頁
【學位級別】：碩士
【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略詞表
前言
第一章 合歡皮木脂素類物質抗焦慮主要活性部位作用機制的整體研究..
1 實驗材料
1.1 儀器
1.2 試劑
1.3 實驗動物及分組
2 實驗方法
2.1 S-75部位對急性應激后高架十字迷宮模型小鼠腦組織中GABA_AR和5-HT_(1A)R蛋白表達量的影響
2.2 S-75部位對急性應激后高架十字迷宮模型小鼠腦組織中GABA_AR和5-HT_(1A)RmRNA表達量的影響
2.3 S-75部位對急性應激后高架十字迷宮模型小鼠腦組織中PKA,CREB,BDNF和TRKB蛋白表達量的影響
2.4 S-75部位對急性應激后高架十字迷宮模型小鼠腦組織中cAMP水平的影響
2.5 數據分析
3 實驗結果
3.1 S-75部位對急性應激后高架十字迷宮模型小鼠腦組織中GABA_AR和5-HT_(1A)R蛋白表達量的影響
3.2 S-75部位對急性應激后高架十字迷宮模型小鼠腦組織中GABA_AR和5-HT_(1A)RmRNA表達量的影響
3.3 S-75部位對急性應激后高架十字迷宮模型小鼠腦組織中PKA,CREB,BDNF和TRKB蛋白表達量的影響
3.4 S-75部位對急性應激后高架十字迷宮模型小鼠腦組織中cAMP水平的影響
4 討論
5 結論
第二章 合歡皮木脂素類物質抗焦慮主要活性部位對皮質酮誘導的PC12細胞損傷的保護作用
1 實驗材料
1.1 儀器
1.2 試劑與試藥
1.3 細胞株
2 實驗方法
2.1 PC12細胞培養(yǎng)
2.2 皮質酮(corticosterone,CORT)誘導PC12細胞損傷模型制備
2.3 受體阻斷劑及陽性藥的濃度篩選
2.4 S-75部位對皮質酮誘導的PC12細胞的保護作用
2.5 S-75部位及其協(xié)同受體阻斷劑對皮質酮誘導的PC12細胞中5-HT_(1A)R和GABA_ARmRNA表達量的影響
2.6 S-75部位及5-HT_(1A)R受體阻斷劑對皮質酮誘導的PC12細胞中PKA，CREB，BDNF和TRKB蛋白表達量的影響
2.7 S-75部位及5-HT_(1A)R受體阻斷劑對皮質酮誘導的PC12細胞中cAMP水平的影響
2.8 數據分析
3 實驗結果
3.1 皮質酮對PC12細胞損傷的MTT測定結果
3.2 受體阻斷劑及陽性藥的濃度篩選
3.3 S-75部位對皮質酮誘導的PC12細胞增殖的影響
3.4 S-75部位及其協(xié)同受體阻斷劑對皮質酮誘導的PC12細胞中5-HT_(1A)R和GABA_ARmRNA表達量的影響
3.5 S-75部位及5-HT_(1A)R受體阻斷劑對皮質酮誘導的PC12細胞中PKA,CREB,BDNF和TRKB蛋白表達量的影響
3.6 S-75部位及5-HT_(1A)R受體阻斷劑對皮質酮誘導的PC12細胞中cAMP水平的影響
4 討論
5 結論
第三章 木脂素類物質主要活性成分對皮質酮損傷的PC12細胞凋亡及線粒體凋亡信號通路的影響
1 實驗材料
1.1 儀器
1.2 試劑及試藥
2 實驗方法
2.1 S-75部位及其主要活性成分對皮質酮誘導的PC12細胞增殖的影響
2.2 SRG對皮質酮誘導的PC12細胞的保護作用
2.3 SRG對皮質酮誘導的PC12細胞LDH滲漏的影響
2.4 AnnexinV-FITC/PI雙染法流式細胞術檢測SRG對皮質酮誘導的PC12細胞凋亡的影響
2.5 TUNEL原位凋亡檢測試劑盒(熒光法檢測DNA片段化)檢測SRG對皮質酮誘導的PC12細胞凋亡的影響
2.6 SRG對皮質酮誘導的PC12細胞內[Ca~(2+)]的影響
2.7 SRG對皮質酮誘導的PC12細胞線粒體膜電位(?Ψm)的影響
2.8 SRG對皮質酮誘導的PC12細胞中CREB,BDNF,Bcl-2,Bax,細胞色素C(Cyt-C)和Caspase-3蛋白表達量的影響
2.9 數據分析
3 實驗結果
3.1 S-75部位及其主要活性成分對皮質酮誘導的PC12細胞增殖的影響
3.2 SRG對皮質酮誘導的PC12細胞的保護作用
3.3 SRG對皮質酮誘導的PC12細胞LDH滲漏的影響
3.4 AnnexinV-FITC/PI雙染法流式細胞術檢測SRG對皮質酮誘導的PC12細胞凋亡的影響
3.5 TUNEL原位凋亡檢測試劑盒(熒光法檢測DNA片段化)檢測SRG對皮質酮誘導的PC12細胞凋亡的影響
3.6 SRG對皮質酮誘導的PC12細胞內[Ca~(2+)]的影響
3.7 SRG對皮質酮誘導的PC12細胞線粒體膜電位(?Ψm)的影響.
3.8 SRG對皮質酮誘導的PC12細胞中CREB,BDNF,Bcl-2,Bax,細胞色素C(Cyt-C)和Caspase-3蛋白表達量的影響
4 討論
5 結論
結語與創(chuàng)新
文獻綜述
參考文獻
發(fā)表論文
致謝
【參考文獻】：
期刊論文
[1]慢性焦慮刺激對成年雌性大鼠性激素水平的影響[J]. 鄭源,張瀲,張良圣,張明祥,陳燕,羅堯岳,吳濤,梁雨. 湖南中醫(yī)藥大學學報. 2015(01)
[2]舒郁寧心湯對焦慮大鼠行為及血清神經肽和皮質酮水平的影響[J]. 王靜,陳利平,王發(fā)渭,孫志高,許成勇. 中國中醫(yī)急癥. 2013(09)
[3]舒肝顆粒治療更年期焦慮癥的機制研究[J]. 宋志宇,龐劍月,隋凈凈,李恒芬. 中藥藥理與臨床. 2013(03)
[4]Brain-derived neurotrophic factor prevents beta-amyloid-induced apoptosis of pheochromocytoma cells by regulating Bax/Bcl-2 expression[J]. Zhikun Sun1,Xingrong Ma2,Hongqi Yang1,Jiahua Zhao1,Jiewen Zhang1 1Department of Neurology,Henan Provincial People’s Hospital,Zhengzhou 450003,Henan Province,China 2Department of Neurology,the First Affiliated Hospital,Zhengzhou University,Zhengzhou 450052,Henan Province,China. Neural Regeneration Research. 2012(05)
[5]幾種抗焦慮藥的臨床應用及不良反應的比較研究[J]. 嚴貴亮,段建榮. 中國藥事. 2011(11)
[6]神經肽Y系統(tǒng)在高劑量咖啡因、可可堿誘導的大鼠焦慮行為中的作用機制[J]. 潘集陽,廖繼武,田徑,劉亞平. 實用醫(yī)學雜志. 2011(18)
[7]廣泛性焦慮患者血一氧化氮、一氧化氮合酶的含量研究[J]. 張晨,沈鑫華. 現代實用醫(yī)學. 2011(07)
[8]纈草素抗焦慮作用及其機制的初探[J]. 王延麗,劉勇,石晉麗,郭建友,鄭虎占,翟玉靜. 中國藥理學通報. 2011(04)
[9]解慮安神湯抗焦慮作用與GABAA-R關系的初步研究[J]. 周寧娜,曹東,何曉山,宋波,唐當柱. 云南中醫(yī)中藥雜志. 2011(02)
[10]安神解慮方對廣泛性焦慮大鼠腦磁共振波譜變化的干預作用[J]. 唐啟盛,李寧,羅斌,侯秀娟,黃育玲,臧鳳超,方芳. 中國中西醫(yī)結合雜志. 2011(01)
博士論文
[1]安神方抗焦慮作用的療效觀察及相關機制研究[D]. 張雪.南方醫(yī)科大學 2012
[2]酸棗仁湯抗焦慮作用的神經-內分泌-免疫網絡調節(jié)機制[D]. 王欣.北京中醫(yī)藥大學 2004
碩士論文
[1]合歡皮抗焦慮部位血清藥物化學初步研究及其化學成分分離[D]. 范小龍.湖北中醫(yī)藥大學 2016
[2]合歡皮提取物抗焦慮活性篩選及其對腦內神經遞質的影響[D]. 田微.湖北中醫(yī)藥大學 2015
[3]合歡皮水溶性木脂素部位提取純化工藝及其質量分析[D]. 方志興.湖北中醫(yī)藥大學 2014
[4]多巴胺受體拮抗劑對新生大鼠缺氧缺血腦損傷后焦慮樣行為及黑質酪氨酸羥化酶表達的影響[D]. 陶惠康.中南大學 2014
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