大血藤總酚及其抗類風濕性關(guān)節(jié)炎骨破壞作用研究
發(fā)布時間:2022-07-15 14:02
類風濕性關(guān)節(jié)炎(Rheumatoid Arthritis,RA)是一種以關(guān)節(jié)滑膜炎癥、關(guān)節(jié)慢性炎癥、關(guān)節(jié)破壞為主的多系統(tǒng)性自身免疫性疾病,其主要特征是關(guān)節(jié)滑膜炎癥和骨、軟骨進行性的破壞。臨床表現(xiàn)為骨關(guān)節(jié)畸形、強直、功能喪失,對人類的健康和生活質(zhì)量造成了嚴重的影響。且在類風濕性關(guān)節(jié)炎的炎癥滑膜組織中會產(chǎn)生炎性因子,從而影響破骨細胞的增殖和分化。大血藤具有活血、清熱解毒、祛風止痛的功效。用于治療跌撲腫痛、痛經(jīng)、風濕痹痛等癥狀。本研究以大血藤總酚為對象,研究其對類風濕性關(guān)節(jié)炎骨破壞的作用,以期為大血藤在類風濕關(guān)節(jié)炎防治中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。從大血藤乙酸乙酯層分離出單體化合物,通過~1H-NMR、13C-NMR、ESI-MS、ROSY、DEPT等現(xiàn)代波譜學技術(shù)鑒定該單體化合物為(-)-表兒茶素;以(-)-表兒茶素為控制指標,建立大血藤總酚的含量測定方法,對大血藤總酚進行富集純化,通過靜態(tài)吸附解析實驗,以吸附率和解析率為指標,分別從HZ818、AB-8、SP825、HP20、XAD16N五種大孔吸附樹脂中篩選出最優(yōu)大孔吸附樹脂為SP825進行富集純化,采用紫外-可見分光光度...
【文章頁數(shù)】:118 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
縮略詞注釋表
摘要
Abstract
第一章 前言
1.1 大血藤研究背景
1.2 大血藤酚類化合物的研究現(xiàn)狀
1.3 大血藤酚類的藥理作用研究
1.4 破骨細胞與RA骨破壞的關(guān)系
1.5 腎虛與類風濕性關(guān)節(jié)炎的相關(guān)性研究
1.6 研究目的及意義
第二章 大血藤總酚富集純化
2.1 實驗材料及儀器
2.1.1 實驗材料
2.1.2 主要儀器及試劑
2.2 實驗方法
2.2.1 單體化合物的結(jié)構(gòu)鑒定和純度分析
2.2.2 大血藤總酚富集純化
2.3 結(jié)果與分析
2.3.1 化合物的物理性質(zhì)及波譜數(shù)據(jù)
2.3.2 化合物的結(jié)構(gòu)解析
2.3.3 化合物純度測定
2.3.4 大血藤總酚富集純化
2.3.5 大孔樹脂富集純化工藝優(yōu)化
2.3.6 紫外-可見分光光度法測定大血藤總酚含量
2.3.7 總酚含量的計算
2.4 小結(jié)與討論
第三章 大血藤總酚對破骨細胞活性的影響
3.1 實驗材料及儀器
3.1.1 實驗材料
3.1.2 實驗儀器及試劑
3.2 實驗方法
3.2.1 骨髓細胞的分離與培養(yǎng)
3.2.2 骨磨片的制備
3.2.3 對骨髓細胞存活率的影響
3.2.4 實驗分組
3.2.5 TRAP染色
3.2.6 TRAP酶活力測定
3.2.7 骨吸收陷窩面積測定
3.3 統(tǒng)計學分析
3.4 結(jié)果與分析
3.4.1 對骨髓細胞存活的影響
3.4.2 TRAP陽性細胞數(shù)及TRAP酶活力測定
3.4.3 骨陷窩面積
3.5 小結(jié)與討論
第四章 大鼠腎虛CIA模型的建立
4.1 實驗材料及儀器
4.1.1 實驗材料
4.1.2 實驗藥品及試劑
4.1.3 實驗儀器
4.1.4 實驗溶液的配制
4.1.5 實驗動物
4.2 實驗方法
4.2.1 腎虛CIA大鼠模型的建立
4.3 統(tǒng)計學分析
4.4 結(jié)果與分析
4.4.1 腎虛癥大鼠模型的建立
4.4.2 注射牛II型膠原蛋白誘導腎虛CIA模型
4.4.3 血清ELISA檢測結(jié)果
4.4.4 血清生化指標檢測結(jié)果
4.4.5 各組大鼠關(guān)節(jié)影像學結(jié)構(gòu)的影響
4.4.6 大鼠踝關(guān)節(jié)病理學的影響
4.5 小結(jié)與討論
第五章 大血藤總酚對腎虛CIA大鼠的作用
5.1 實驗材料及儀器
5.2 實驗方法
5.2.1 實驗分組
5.2.2 腎虛CIA大鼠模型的建立及給藥
5.2.3 檢測指標
5.3 統(tǒng)計學分析
5.4 結(jié)果與分析
5.4.1 體征觀察
5.4.2 體重變化
5.4.3 足趾腫脹度
5.4.4 關(guān)節(jié)炎指數(shù)評分
5.4.5 脾臟指數(shù)
5.4.6 血清ELISA檢測結(jié)果
5.4.7 血清生化指標檢測結(jié)果
5.4.8 各組大鼠關(guān)節(jié)影像學結(jié)構(gòu)的影響
5.4.9 大鼠踝關(guān)節(jié)病理學的影響
5.5 小結(jié)與討論
第六章 結(jié)論
參考文獻
致謝
附錄:化合物A-1譜圖
發(fā)表論文情況
【參考文獻】:
期刊論文
[1]針刀鏡關(guān)節(jié)清理術(shù)聯(lián)合臭氧注射治療類風濕關(guān)節(jié)炎的療效觀察[J]. 姜瑞國,邢倩,徐曉娜. 中國中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2019(05)
[2]類風濕關(guān)節(jié)炎病證結(jié)合研究進展[J]. 趙夜雨,高明利,王恩隆,黃子辰. 遼寧中醫(yī)藥大學學報. 2019(05)
[3]大血藤在治療盆腔炎性疾病中的應(yīng)用[J]. 郭星瑤,劉卉,馮智敏,湛潔. 亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥. 2019(02)
[4]大血藤現(xiàn)代研究進展[J]. 張瑩瑩,李詒光,季巧遇,李青. 亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥. 2018(11)
[5]類風濕性關(guān)節(jié)炎骨破壞的中醫(yī)藥研究進展[J]. 周平生,賈冬梅,程仕萍. 遼寧中醫(yī)雜志. 2016(11)
[6]大血藤對破骨細胞活性及成骨細胞增殖分化作用的研究[J]. 陳麗珍,周英,黃俊飛,張雪,俸婷婷. 中國中藥雜志. 2015(22)
[7]大血藤藥材和飲片中酚類和皂苷類成分的含量[J]. 李浩,趙鳳春,袁賢達,劉曉謙,陳兩綿,閆利華,朱晶晶,高慧敏,王智民. 中國中藥雜志. 2015(10)
[8]破骨細胞形成和功能調(diào)節(jié)的研究進展[J]. 顏艷,林欣,代曉華,王冠華,張林樸,鄒慧儒. 中國修復重建外科雜志. 2014(11)
[9]大血藤藥理作用與臨床應(yīng)用研究進展[J]. 趙秀梅,柯洪琴,于慧斌. 中醫(yī)藥導報. 2014(11)
[10]五花血藤化學成分的研究[J]. 史偉,陳凌云. 云南中醫(yī)學院學報. 2014(03)
碩士論文
[1]基于“溫經(jīng)通絡(luò)法”立方的新痹痛靈方對CIA模型大鼠骨破壞的影響及機制研究[D]. 朱豐林.南京中醫(yī)藥大學 2015
[2]補腎祛寒治尪湯對CIA大鼠癥狀及骨破壞情況的影響[D]. 晏銘洋.北京中醫(yī)藥大學 2012
本文編號:3662186
【文章頁數(shù)】:118 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
縮略詞注釋表
摘要
Abstract
第一章 前言
1.1 大血藤研究背景
1.2 大血藤酚類化合物的研究現(xiàn)狀
1.3 大血藤酚類的藥理作用研究
1.4 破骨細胞與RA骨破壞的關(guān)系
1.5 腎虛與類風濕性關(guān)節(jié)炎的相關(guān)性研究
1.6 研究目的及意義
第二章 大血藤總酚富集純化
2.1 實驗材料及儀器
2.1.1 實驗材料
2.1.2 主要儀器及試劑
2.2 實驗方法
2.2.1 單體化合物的結(jié)構(gòu)鑒定和純度分析
2.2.2 大血藤總酚富集純化
2.3 結(jié)果與分析
2.3.1 化合物的物理性質(zhì)及波譜數(shù)據(jù)
2.3.2 化合物的結(jié)構(gòu)解析
2.3.3 化合物純度測定
2.3.4 大血藤總酚富集純化
2.3.5 大孔樹脂富集純化工藝優(yōu)化
2.3.6 紫外-可見分光光度法測定大血藤總酚含量
2.3.7 總酚含量的計算
2.4 小結(jié)與討論
第三章 大血藤總酚對破骨細胞活性的影響
3.1 實驗材料及儀器
3.1.1 實驗材料
3.1.2 實驗儀器及試劑
3.2 實驗方法
3.2.1 骨髓細胞的分離與培養(yǎng)
3.2.2 骨磨片的制備
3.2.3 對骨髓細胞存活率的影響
3.2.4 實驗分組
3.2.5 TRAP染色
3.2.6 TRAP酶活力測定
3.2.7 骨吸收陷窩面積測定
3.3 統(tǒng)計學分析
3.4 結(jié)果與分析
3.4.1 對骨髓細胞存活的影響
3.4.2 TRAP陽性細胞數(shù)及TRAP酶活力測定
3.4.3 骨陷窩面積
3.5 小結(jié)與討論
第四章 大鼠腎虛CIA模型的建立
4.1 實驗材料及儀器
4.1.1 實驗材料
4.1.2 實驗藥品及試劑
4.1.3 實驗儀器
4.1.4 實驗溶液的配制
4.1.5 實驗動物
4.2 實驗方法
4.2.1 腎虛CIA大鼠模型的建立
4.3 統(tǒng)計學分析
4.4 結(jié)果與分析
4.4.1 腎虛癥大鼠模型的建立
4.4.2 注射牛II型膠原蛋白誘導腎虛CIA模型
4.4.3 血清ELISA檢測結(jié)果
4.4.4 血清生化指標檢測結(jié)果
4.4.5 各組大鼠關(guān)節(jié)影像學結(jié)構(gòu)的影響
4.4.6 大鼠踝關(guān)節(jié)病理學的影響
4.5 小結(jié)與討論
第五章 大血藤總酚對腎虛CIA大鼠的作用
5.1 實驗材料及儀器
5.2 實驗方法
5.2.1 實驗分組
5.2.2 腎虛CIA大鼠模型的建立及給藥
5.2.3 檢測指標
5.3 統(tǒng)計學分析
5.4 結(jié)果與分析
5.4.1 體征觀察
5.4.2 體重變化
5.4.3 足趾腫脹度
5.4.4 關(guān)節(jié)炎指數(shù)評分
5.4.5 脾臟指數(shù)
5.4.6 血清ELISA檢測結(jié)果
5.4.7 血清生化指標檢測結(jié)果
5.4.8 各組大鼠關(guān)節(jié)影像學結(jié)構(gòu)的影響
5.4.9 大鼠踝關(guān)節(jié)病理學的影響
5.5 小結(jié)與討論
第六章 結(jié)論
參考文獻
致謝
附錄:化合物A-1譜圖
發(fā)表論文情況
【參考文獻】:
期刊論文
[1]針刀鏡關(guān)節(jié)清理術(shù)聯(lián)合臭氧注射治療類風濕關(guān)節(jié)炎的療效觀察[J]. 姜瑞國,邢倩,徐曉娜. 中國中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2019(05)
[2]類風濕關(guān)節(jié)炎病證結(jié)合研究進展[J]. 趙夜雨,高明利,王恩隆,黃子辰. 遼寧中醫(yī)藥大學學報. 2019(05)
[3]大血藤在治療盆腔炎性疾病中的應(yīng)用[J]. 郭星瑤,劉卉,馮智敏,湛潔. 亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥. 2019(02)
[4]大血藤現(xiàn)代研究進展[J]. 張瑩瑩,李詒光,季巧遇,李青. 亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥. 2018(11)
[5]類風濕性關(guān)節(jié)炎骨破壞的中醫(yī)藥研究進展[J]. 周平生,賈冬梅,程仕萍. 遼寧中醫(yī)雜志. 2016(11)
[6]大血藤對破骨細胞活性及成骨細胞增殖分化作用的研究[J]. 陳麗珍,周英,黃俊飛,張雪,俸婷婷. 中國中藥雜志. 2015(22)
[7]大血藤藥材和飲片中酚類和皂苷類成分的含量[J]. 李浩,趙鳳春,袁賢達,劉曉謙,陳兩綿,閆利華,朱晶晶,高慧敏,王智民. 中國中藥雜志. 2015(10)
[8]破骨細胞形成和功能調(diào)節(jié)的研究進展[J]. 顏艷,林欣,代曉華,王冠華,張林樸,鄒慧儒. 中國修復重建外科雜志. 2014(11)
[9]大血藤藥理作用與臨床應(yīng)用研究進展[J]. 趙秀梅,柯洪琴,于慧斌. 中醫(yī)藥導報. 2014(11)
[10]五花血藤化學成分的研究[J]. 史偉,陳凌云. 云南中醫(yī)學院學報. 2014(03)
碩士論文
[1]基于“溫經(jīng)通絡(luò)法”立方的新痹痛靈方對CIA模型大鼠骨破壞的影響及機制研究[D]. 朱豐林.南京中醫(yī)藥大學 2015
[2]補腎祛寒治尪湯對CIA大鼠癥狀及骨破壞情況的影響[D]. 晏銘洋.北京中醫(yī)藥大學 2012
本文編號:3662186
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