目的:通過(guò)分析山西不同產(chǎn)地酸棗仁核糖體基因內(nèi)部轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)序列,為酸棗仁藥材鑒定提供DNA分子標(biāo)記方法。方法:采用植物基因組DNA快速提取試劑盒的方法,提取22個(gè)不同產(chǎn)地酸棗仁藥材中的總DNA,以通用引物采用PCR擴(kuò)增rDNA-ITS序列并測(cè)序。采用contig分析軟件進(jìn)行序列拼接、CLUSTAL X軟件進(jìn)行序列比對(duì),再使用MEGA 7.0軟件進(jìn)行遺傳分析并構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)。結(jié)果:種內(nèi)變異位點(diǎn)分析共獲得22條ITS序列,11個(gè)單倍型,根據(jù)單倍型的數(shù)目,單倍型1、單倍型2、單倍型3為酸棗仁的核心單倍型,占所有條帶的60.87%。種間序列分析NJ樹(shù)分為兩大支,正品酸棗仁與偽品枳椇子各一支,聚類分析可以對(duì)酸棗仁及其偽品ITS序列差異進(jìn)行識(shí)別。結(jié)論:rDNA-ITS序列可用于對(duì)山西不同產(chǎn)地酸棗仁的分析,是酸棗仁藥材分子鑒定的有效方法之一。 

【文章頁(yè)數(shù)】：6 頁(yè)

【文章目錄】：
材料
    1. 儀器
    2. 試劑
方法
    1.DNA提取
    2. DNA濃度檢測(cè)
    3. PCR擴(kuò)增
        3.1 引物
        3.2 反應(yīng)體系
        3.3 PCR反應(yīng)體系條件考察
            3.3.1 退火溫度的考察：實(shí)驗(yàn)隨機(jī)選用樣品T1和J2，設(shè)置溫
            3.3.2 DNA模板濃度考察：實(shí)驗(yàn)選用樣品T1和J2考察PCR
        3.4 循環(huán)參數(shù)
    4. 電泳
    5. PCR產(chǎn)物測(cè)序
        5.1 種內(nèi)變異位點(diǎn)分
        5.2 種間序列分析
結(jié)果與序列分析
討論


【參考文獻(xiàn)】：
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