目的:積雪草酸（Asiatic acid,ASA）是中藥材積雪草的主要化學(xué)成份之一是五環(huán)三萜類(lèi)化合物。研究顯示積雪草酸具有很好的肝保護(hù)作用,本研究采用硫代乙酰胺（TAA）誘導(dǎo)小鼠肝纖維化模型,采用不用刺激物活化肝星狀細(xì)胞,小鼠巨噬細(xì)胞以及人單核巨噬細(xì)胞,探討積雪草酸通過(guò)Lipin1-TLR4-NLRP3信號(hào)通路對(duì)肝纖維化的改善作用和具體的調(diào)控機(jī)制。方法:腹腔注射TAA（200mg/kg或100mg/kg）,共五周,制作小鼠肝纖維化模型。并每天灌胃小鼠以不同劑量的積雪草酸（5mg/kg、10mg/kg、20mg/kg）,每天灌胃,連續(xù)4周。最后一次給藥18h后,獲得小鼠血清和肝臟,保存于存于-80℃冰箱。用血清檢測(cè)試劑盒測(cè)定血清中谷丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶（Alanine aminotransferase,ALT）、天門(mén)冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶（Aspartate aminotransferase,AST）的水平。肝臟組織做H&E染色、Masson染色、天狼猩紅染色與IHC免疫組織化學(xué)4種方法染色,觀(guān)察肝組織病理學(xué)改變。檢測(cè)肝纖維化指標(biāo)α-SMA與炎性因子TLR4和Lipin-1/2的蛋白與mRNA表達(dá)... 

【文章頁(yè)數(shù)】：55 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略詞表
第一章 緒論
第二章 積雪草酸改善TAA誘導(dǎo)體內(nèi)肝纖維化的模型
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)器材
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 動(dòng)物飼養(yǎng)管理
        2.2.2 生化指標(biāo)的測(cè)定
        2.2.3 H&E染色
        2.2.4 Masson三色膠原染色
        2.2.5 天狼猩紅染色實(shí)驗(yàn)
        2.2.6 免疫組化實(shí)驗(yàn)
        2.2.7 組織熒光染色實(shí)驗(yàn)
        2.2.8 Western bloting
        2.2.9 RT-PCR檢測(cè)mRNA的表達(dá)
        2.2.10 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
    2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.3.1 積雪草酸對(duì)硫代乙酰胺模型小鼠血清中ALT、AST含量的影響
        2.3.2 積雪草酸對(duì)硫代乙酰胺模型小鼠肝臟組織形態(tài)學(xué)的影響
        2.3.3 積雪草酸對(duì)肝纖維化指標(biāo)的影響
        2.3.4 積雪草酸對(duì)Lipin-1和P2X7R/NLRP3信號(hào)通路的影響
        2.3.5 積雪草酸肝纖維化模型中對(duì)TLR4信號(hào)通路的影響
        2.3.6 積雪草酸對(duì)炎癥因子表達(dá)的抑制作用
第三章 積雪草酸抑制TGF-β誘導(dǎo)的肝星狀細(xì)胞活化與LPS對(duì)巨噬細(xì)胞的激活
    3.1
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)器材
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
    3.2 體內(nèi)實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)與處理
        3.2.2 MTT實(shí)驗(yàn)
        3.2.3 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)方法
    3.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
    3.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.4.1 積雪草酸對(duì)細(xì)胞毒性的研究
        3.4.2 積雪草酸與TGF-β活化t-HSC細(xì)胞對(duì)肝纖維化指標(biāo)的影響
        3.4.3 積雪草酸對(duì)TGF-β活化t-HSC細(xì)胞中P2X7R,Lipin-1,Lipin-2,NLRP3表達(dá)的影響
        3.4.4 積雪草酸對(duì)活化的t-HSC細(xì)胞中TLR4信號(hào)通路的影響
        3.4.5 積雪草酸對(duì)EtOH活化t-HSC細(xì)胞中Lipin-1-P2X7R-NLRP-3表達(dá)的影響
        3.4.6 積雪草酸對(duì)EtOH活化的t-HSC細(xì)胞中TLR4信號(hào)通路的影響
        3.4.7 積雪草酸對(duì)LPS激活的Raw 264.7細(xì)胞中P2X7R,Lipin-1,NLRP-3表達(dá)的影響
        3.4.8 積雪草酸對(duì)LPS激活的Raw 264.7細(xì)胞中TLR4信號(hào)通路的影響
        3.4.9 積雪草酸對(duì)LPS激活的THP-1細(xì)胞中P2X7R,Lipin-1,NLRP-3的表達(dá)與TLR4信號(hào)通路的影響
第四章 討論
參考文獻(xiàn)
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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[2]三七皂苷抵抗納曲酮所致肝纖維化分子機(jī)制研究[D]. 鄭灃.昆明理工大學(xué) 2015
[3]固有免疫信號(hào)因子MyD88和TRIF在CC14致大鼠肝纖維化模型中的表達(dá)[D]. 黃欣.重慶醫(yī)科大學(xué) 2012
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[6]四氯化碳誘導(dǎo)大鼠肝纖維化不同階段ROCK1表達(dá)的實(shí)驗(yàn)性研究[D]. 宋鑫.河北醫(yī)科大學(xué) 2010
[7]金屬硫蛋白拮抗細(xì)菌脂多糖急性肝損傷的機(jī)制研究[D]. 郭雋.四川大學(xué) 2007



本文編號(hào)：3652645