發(fā)布時間：2022-05-10 20:29

　　目的:積雪草酸（Asiatic acid,ASA）是中藥材積雪草的主要化學成份之一是五環(huán)三萜類化合物。研究顯示積雪草酸具有很好的肝保護作用,本研究采用硫代乙酰胺（TAA）誘導小鼠肝纖維化模型,采用不用刺激物活化肝星狀細胞,小鼠巨噬細胞以及人單核巨噬細胞,探討積雪草酸通過Lipin1-TLR4-NLRP3信號通路對肝纖維化的改善作用和具體的調控機制。方法:腹腔注射TAA（200mg/kg或100mg/kg）,共五周,制作小鼠肝纖維化模型。并每天灌胃小鼠以不同劑量的積雪草酸（5mg/kg、10mg/kg、20mg/kg）,每天灌胃,連續(xù)4周。最后一次給藥18h后,獲得小鼠血清和肝臟,保存于存于-80℃冰箱。用血清檢測試劑盒測定血清中谷丙氨酸轉氨酶（Alanine aminotransferase,ALT）、天門冬氨酸轉氨酶（Aspartate aminotransferase,AST）的水平。肝臟組織做H&E染色、Masson染色、天狼猩紅染色與IHC免疫組織化學4種方法染色,觀察肝組織病理學改變。檢測肝纖維化指標α-SMA與炎性因子TLR4和Lipin-1/2的蛋白與mRNA表達... 

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略詞表
第一章 緒論
第二章 積雪草酸改善TAA誘導體內(nèi)肝纖維化的模型
    2.1 實驗材料
        2.1.1 實驗器材
        2.1.2 實驗試劑
    2.2 實驗方法
        2.2.1 動物飼養(yǎng)管理
        2.2.2 生化指標的測定
        2.2.3 H&E染色
        2.2.4 Masson三色膠原染色
        2.2.5 天狼猩紅染色實驗
        2.2.6 免疫組化實驗
        2.2.7 組織熒光染色實驗
        2.2.8 Western bloting
        2.2.9 RT-PCR檢測mRNA的表達
        2.2.10 統(tǒng)計學處理
    2.3 實驗結果
        2.3.1 積雪草酸對硫代乙酰胺模型小鼠血清中ALT、AST含量的影響
        2.3.2 積雪草酸對硫代乙酰胺模型小鼠肝臟組織形態(tài)學的影響
        2.3.3 積雪草酸對肝纖維化指標的影響
        2.3.4 積雪草酸對Lipin-1和P2X7R/NLRP3信號通路的影響
        2.3.5 積雪草酸肝纖維化模型中對TLR4信號通路的影響
        2.3.6 積雪草酸對炎癥因子表達的抑制作用
第三章 積雪草酸抑制TGF-β誘導的肝星狀細胞活化與LPS對巨噬細胞的激活
    3.1
        3.1.1 實驗器材
        3.1.2 實驗試劑
    3.2 體內(nèi)實驗方法
        3.2.1 細胞培養(yǎng)與處理
        3.2.2 MTT實驗
        3.2.3 細胞實驗方法
    3.3 統(tǒng)計學處理
    3.4 實驗結果
        3.4.1 積雪草酸對細胞毒性的研究
        3.4.2 積雪草酸與TGF-β活化t-HSC細胞對肝纖維化指標的影響
        3.4.3 積雪草酸對TGF-β活化t-HSC細胞中P2X7R,Lipin-1,Lipin-2,NLRP3表達的影響
        3.4.4 積雪草酸對活化的t-HSC細胞中TLR4信號通路的影響
        3.4.5 積雪草酸對EtOH活化t-HSC細胞中Lipin-1-P2X7R-NLRP-3表達的影響
        3.4.6 積雪草酸對EtOH活化的t-HSC細胞中TLR4信號通路的影響
        3.4.7 積雪草酸對LPS激活的Raw 264.7細胞中P2X7R,Lipin-1,NLRP-3表達的影響
        3.4.8 積雪草酸對LPS激活的Raw 264.7細胞中TLR4信號通路的影響
        3.4.9 積雪草酸對LPS激活的THP-1細胞中P2X7R,Lipin-1,NLRP-3的表達與TLR4信號通路的影響
第四章 討論
參考文獻
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號：3652645