近年來,我國對中草藥的重視程度日益加深,中藥以及相關(guān)制劑的研發(fā)引起大家關(guān)注。普遍認(rèn)為中草藥的安全性要優(yōu)于西藥,但同時(shí)也不能忽視因中草藥成分混雜,活性物質(zhì)、藥物機(jī)制以及安全性能探索困難,進(jìn)而導(dǎo)致對中草藥相關(guān)毒性的研究以及研究受試者較少。同時(shí),很多中草藥潛在肝損傷是導(dǎo)致其難以通過臨床前試驗(yàn)、臨床三期檢驗(yàn)的一大重要原因,從而耗費(fèi)大量的時(shí)間和科研精力,因此在新藥研發(fā)的早期評價(jià)中草藥的肝毒性是十分必要的。目前,國內(nèi)外關(guān)于中草藥肝毒性的文獻(xiàn)報(bào)道主要是基于孔板模型以及動物模型;其中,孔板模型結(jié)構(gòu)單一、與體內(nèi)真實(shí)條件相差較大,動物模型周期較長、花費(fèi)高,且個(gè)體差異性較大,因此這兩種模型都存在一定局限性。因此,在本實(shí)驗(yàn)中通過微流控芯片平臺,在平臺內(nèi)按照正常肝血竇結(jié)構(gòu)組成,對應(yīng)培養(yǎng)U937細(xì)胞（人組織淋巴瘤細(xì)胞系）、HUVEC細(xì)胞（人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞系）、LX-2細(xì)胞（人肝星狀細(xì)胞系）以及三維培養(yǎng)的HepG-2細(xì)胞（人肝癌細(xì)胞系）來構(gòu)建以模仿肝血竇組織結(jié)構(gòu)為目的的器官芯片模型,實(shí)現(xiàn)中草藥成分體外肝毒性的評價(jià)。實(shí)驗(yàn)中所用的器官芯片模型主要由上下兩層亞克力板、三層材質(zhì)為PDMS（聚二甲基硅氧烷）的芯片層以及兩片直... 

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
引言
1 緒論
    1.1 微流控芯片技術(shù)介紹
        1.1.1 微流控芯片的概念及發(fā)展
        1.1.2 微流控芯片的制作材料與加工工藝
        1.1.3 微流控芯片在類器官方向的應(yīng)用
    1.2 細(xì)胞外基質(zhì)與3D細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)
    1.3 中藥肝毒性
        1.3.1 肝臟的生理結(jié)構(gòu)與功能
        1.3.2 藥物肝毒性的產(chǎn)生
        1.3.3 中草藥與藥物性肝損傷
    1.4 肝器官芯片藥物篩選模型
    1.5 本論文研究目的和內(nèi)容
2 實(shí)驗(yàn)部分
    2.1 實(shí)驗(yàn)中所用耗材、儀器
        2.1.1 微流控芯片相關(guān)制作耗材及儀器
        2.1.2 常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)的耗材及儀器
        2.1.3 芯片運(yùn)行與檢測的耗材及儀器
    2.2 微流控芯片的設(shè)計(jì)及制作
        2.2.1 微流控芯片設(shè)計(jì)
        2.2.2 微流控芯片制作
    2.3 相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)及表征
        2.3.1 試劑配制
        2.3.2 細(xì)胞培養(yǎng)方法
    2.4 肝微流控器官芯片的搭建及功能驗(yàn)證
        2.4.1 試劑配制
        2.4.2 膜上細(xì)胞的接種及細(xì)胞分化
        2.4.3 芯片搭建
    2.5 肝微流控器官芯片模型對中藥成分肝毒性的評價(jià)
        2.5.1 試劑配制
        2.5.2 96孔板中藥物濃度對細(xì)胞活力的影響
        2.5.3 芯片運(yùn)行
        2.5.4 HepG-2 細(xì)胞的表征及損傷評價(jià)
        2.5.5 芯片上藥物IC50 值的測定
3 結(jié)果與討論
    3.1 肝微流控器官芯片的制作與運(yùn)行
        3.1.1 芯片設(shè)計(jì)
        3.1.2 芯片上HepG-2 細(xì)胞的表征
    3.2 中藥成分肝毒性的評價(jià)
        3.2.1 肝毒性評價(jià)
        3.2.2 對氧化苦參堿肝毒性的評價(jià)
        3.2.3 對吳茱萸堿肝毒性的評價(jià)
        3.2.4 對油酸肝毒性的評價(jià)
        3.2.5 對氯化兩面針堿肝毒性的評價(jià)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表學(xué)術(shù)論文情況
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]微流控芯片的研究及產(chǎn)業(yè)化[J]. 林炳承.  分析化學(xué). 2016(04)
[2]世界衛(wèi)生組織促進(jìn)傳統(tǒng)醫(yī)藥安全性相關(guān)政策回顧[J]. 蘇芮,陳巖,孫鵬,范吉平.  中國中醫(yī)藥信息雜志. 2015(08)
[3]石英微機(jī)械陀螺敏感芯片的抗振動分析與改進(jìn)[J]. 李文蘊(yùn),林日樂,滿欣.  壓電與聲光. 2015(04)



本文編號：3652347