發(fā)布時(shí)間：2022-02-26 12:55

　　目的對(duì)白鮮皮多糖（Dictamnus dasycarpus polysaccharide,DDP）進(jìn)行提取、分離純化、結(jié)構(gòu)分析、活性篩選及其抗銀屑病活性研究,為深入開展DDP抗銀屑病的藥效關(guān)系及分子機(jī)制研究提供實(shí)驗(yàn)依據(jù),為DDP用于銀屑病等免疫性疾病治療的研究與開發(fā)奠定基礎(chǔ)。方法（1）通過(guò)水提取醇沉淀法提取白鮮皮多糖,利用苯酚-硫酸法測(cè)定糖含量,硫酸-咔唑法測(cè)定糖醛酸含量,考馬斯亮藍(lán)法測(cè)定蛋白質(zhì)含量;三氯乙酸法除去蛋白質(zhì),活性炭脫色;純化后的多糖通過(guò)膜分離技術(shù)分為分子量大小不同的7段。（2）采用MTT比色分析法測(cè)定DDP體外免疫活性;利用體外清除DPPH自由基（DDPH·）、超氧陰離子自由基（·O₂^-）、羥自由基（·OH）的能力,測(cè)定DDP的抗氧化活性來(lái)篩選活性多糖。（3）建立咪喹莫特乳膏誘導(dǎo)小鼠銀屑病模型,給予篩選所得DDP-D、DDP-E、DDP-F活性多糖,通過(guò)皮膚PASI評(píng)分,背部皮膚的病理形態(tài)學(xué)觀察,小鼠血清中的IL-17、IL-23的表達(dá),考察三種多糖的抗銀屑病活性。（4）DEAE Cellulose-52柱色譜對(duì)DDP-D和DD... 

【文章來(lái)源】：佳木斯大學(xué)黑龍江省

【文章頁(yè)數(shù)】：73 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
前言
第1章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 白鮮皮的研究進(jìn)展
        1.1.1 白鮮皮的化學(xué)成分
        1.1.2 白鮮皮的藥理作用
        1.1.3 白鮮皮的臨床應(yīng)用
    1.2 中藥多糖研究進(jìn)展
        1.2.1 多糖的提取分離方法
        1.2.2 多糖的結(jié)構(gòu)分析方法
        1.2.3 中藥多糖的藥理活性研究
    1.3 銀屑病治療的研究進(jìn)展
        1.3.1 銀屑病的發(fā)病機(jī)制
        1.3.2 銀屑病的治療藥物
    1.4 小結(jié)與展望
第2章 白鮮皮多糖的提取與分離
    2.1 儀器與材料
        2.1.1 儀器
        2.1.2 試劑
        2.1.3 材料
    2.2 方法
        2.2.1 DDP的提取
        2.2.2 多糖含量測(cè)定
        2.2.3 糖醛酸含量測(cè)定
        2.2.4 多糖中蛋白質(zhì)含量測(cè)定
        2.2.5 除蛋白
        2.2.6 除色素
        2.2.7 白鮮皮多糖的膜分離技術(shù)
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 DDP提取
        2.3.2 DDP中的糖含量
        2.3.3 DDP中的糖醛酸含量
        2.3.4 DDP中的蛋白質(zhì)含量
        2.3.5 除蛋白
        2.3.6 除色素
        2.3.7 膜分離
        2.3.8 討論
    2.4 小結(jié)
第3章 不同分子量DDP抗氧化及免疫調(diào)節(jié)活性篩選
    3.1 儀器與材料
        3.1.1 儀器
        3.1.2 試劑
        3.1.3 材料
    3.2 方法
        3.2.1 DDP-A～G免疫活性篩選
        3.2.2 DDP-A～G體外抗氧化活性篩選
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 DDP-A～G免疫調(diào)節(jié)活性
        3.3.2 DDP-A～G抗氧化活性
        3.3.3 討論
    3.4 小結(jié)
第4章 DDP-D、DDP-E和DDP-F抗小鼠銀屑病的研究
    4.1 儀器與材料
        4.1.1 儀器
        4.1.2 試劑
        4.1.3 材料
    4.2 方法
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)分組
        4.2.2 咪喹莫特誘導(dǎo)小鼠銀屑病樣模型的建立
        4.2.3 給藥劑量計(jì)算
        4.2.4 給藥
        4.2.5 觀察
        4.2.6 各組小鼠銀屑病樣皮損嚴(yán)重程度評(píng)分
        4.2.7 樣本取材
        4.2.8 HE染色及形態(tài)觀察
        4.2.9 ELISA法檢測(cè)血清中細(xì)胞因子的含量
        4.2.10 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 小鼠的活動(dòng)度和飲水飲食及體重變化情況
        4.3.2 DDP對(duì)銀屑病小鼠皮損變化的影響
        4.3.3 DDP對(duì)銀屑病小鼠皮膚病理形態(tài)的分析
        4.3.4 DDP對(duì)銀屑病小鼠血清中IL-17和IL-23的影響
        4.3.5 討論
    4.4 小結(jié)
第5章 DDP-D和DDP-E的分離純化及結(jié)構(gòu)解析
    5.1 儀器與材料
        5.1.1 儀器
        5.1.2 試劑
    5.2 方法
        5.2.1 DEAE Cellulose-52柱色譜分離純化DDP-D和DDP-E
        5.2.2 純度及分子量的測(cè)定
        5.2.3 白鮮皮均一多糖單糖組成分析
        5.2.4 高碘酸氧化
        5.2.5 Smith降解
        5.2.6 甲基化分析
        5.2.7 白鮮皮均一多糖紅外光譜分析
    5.3 結(jié)果與討論
        5.3.1 白鮮皮均一多糖分離純化結(jié)果
        5.3.2 均一多糖純度及分子量結(jié)果
        5.3.3 單糖組成分析
        5.3.4 DDP-D1結(jié)構(gòu)特征分析
        5.3.5 DDP-D2結(jié)構(gòu)特征分析
        5.3.6 DDP-E1結(jié)構(gòu)特征分析
        5.3.7 DDP-E2結(jié)構(gòu)特征分析
        5.3.8 討論
    5.4 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
英文縮寫
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)成果


【參考文獻(xiàn)】：
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博士論文
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