目的:為研究柚皮素（NAR）對處于腦缺血再灌注損傷中的神經(jīng)細(xì)胞的保護(hù)作用及其可能機(jī)制,以SD大鼠為實(shí)驗(yàn)對象,采用體外原代大腦皮層神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)氧糖剝奪/再灌注（oxygen and glucose deprivation/reperfusion,OGD/Rep）模型探索柚皮素干預(yù)對處于腦缺血缺氧再灌注損傷的神經(jīng)細(xì)胞在核因子E2相關(guān)因子（Nrf2）通路調(diào)控的抗氧化應(yīng)激層面的作用關(guān)系,明確柚皮素在腦缺血再灌注損傷的神經(jīng)保護(hù)作用方面的機(jī)制。方法:1、將培養(yǎng)好的在對數(shù)生長期的大鼠皮層神經(jīng)元細(xì)胞進(jìn)行免疫熒光染色并進(jìn)行鑒定。2、將SD大鼠的大腦皮層神經(jīng)細(xì)胞建立OGD/Rep模型。3、用不同濃度NAR干預(yù)48h后,檢測細(xì)胞活性及凋亡情況,檢測凋亡相關(guān)蛋白Capase-3、bax、bcl-2、CytC在蛋白和基因?qū)用娴谋磉_(dá)水平。檢測各組細(xì)胞中ROS、MDA和GSH水平及SOD活性。4、通過轉(zhuǎn)染siRNA-Nrf2、OENrf2干擾Nrf2表達(dá),進(jìn)行OGD/Rep培養(yǎng)后,給予80μΜ的NAR處理48h后,檢測細(xì)胞活性及凋亡情況。檢測各組細(xì)胞ROS、MDA和GSH水平及SOD活性。檢測Nrf2蛋白核內(nèi)轉(zhuǎn)移情... 

【文章來源】：廣西中醫(yī)藥大學(xué)廣西壯族自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：90 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
abstract
引言
1 柚皮素對神經(jīng)細(xì)胞氧糖剝奪/再灌注培養(yǎng)模型的線粒體結(jié)構(gòu)及功能作用的實(shí)驗(yàn)研究
    1.1 材料與方法
        1.1.1 材料
        1.1.2 方法
    1.2 結(jié)果
        1.2.1 大鼠皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞元代培養(yǎng)及鑒定
        1.2.2 柚皮素對氧糖剝奪/再灌注模型神經(jīng)元活力和凋亡的影響檢測
    1.3 小結(jié)
2 基于NRF2通路的抗氧化作用研究柚皮素對氧糖剝奪/再灌注模型神經(jīng)細(xì)胞作用的實(shí)驗(yàn)研究
    2.1 材料與方法
        2.1.1 材料
        2.1.2 方法
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 NRF2相關(guān)沉默及過度表達(dá)基因轉(zhuǎn)染效率鑒定
        2.2.2 柚皮素預(yù)處理及NRF2表達(dá)水平對氧糖剝奪/再灌注大鼠大腦皮層神經(jīng)細(xì)胞活性的作用
        2.2.3 柚皮素預(yù)處理及NRF2表達(dá)水平對氧糖剝奪/再灌注大鼠大腦皮層神經(jīng)細(xì)胞氧化應(yīng)激作用的影響
        2.2.4 柚皮素對氧糖剝奪/再灌注大鼠大腦皮層神經(jīng)細(xì)胞NRF2信號通路相關(guān)蛋白的影響
    2.3 小結(jié)
3 討論
    3.1 體外建立氧糖剝奪/再灌注模型的必要性
    3.2 缺血性腦卒中神經(jīng)細(xì)胞缺血缺氧后再灌注中氧化應(yīng)激損傷的機(jī)制
    3.3 NRF2介導(dǎo)的抗氧化通路對缺血再灌注氧化應(yīng)激中神經(jīng)細(xì)胞的的保護(hù)機(jī)制
    3.4 柚皮素對缺血再灌注氧化應(yīng)激中神經(jīng)細(xì)胞的的保護(hù)機(jī)制
    3.5 中醫(yī)學(xué)對缺血性腦卒中及含有柚皮素相關(guān)方藥的認(rèn)識
        3.5.1 中醫(yī)學(xué)對于缺血性腦卒中病因病機(jī)的認(rèn)識
        3.5.2 溫膽湯對于風(fēng)痰阻絡(luò)型中風(fēng)病的治療
        3.5.3 溫膽湯中含柚皮素的相關(guān)藥物對缺血性腦卒中的作用
    3.6 不足與展望
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
縮略詞表
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
個人簡歷及攻讀學(xué)位期間獲得的科研成果


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]中國急性缺血性腦卒中早期血管內(nèi)介入診療指南[J]. 朱武生,劉文華,劉新峰.  中華神經(jīng)科雜志. 2015 (05)
[2]中國缺血性腦卒中和短暫性腦缺血發(fā)作二級預(yù)防指南2014[J]. 王擁軍,王春雪,繆中榮.  中華神經(jīng)科雜志. 2015 (04)
[3]尼莫地平對急性大腦中動脈M1段閉塞及其側(cè)枝循環(huán)的研究[J]. 張冰,盧振產(chǎn),王亞仙.  中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志. 2013(05)
[4]小劑量尿激酶溶栓治腦梗死臨床療效觀察[J]. 程繼東.  當(dāng)代醫(yī)學(xué). 2013(05)
[5]淺談陳皮的藥理作用及臨床應(yīng)用[J]. 王春燕.  中國中醫(yī)藥現(xiàn)代遠(yuǎn)程教育. 2013(03)
[6]DWI/PWI在腦梗死缺血半暗帶量化評定中的應(yīng)用[J]. 李鐵豐,謝平坤,白延軍,陳富星,李輝,鄒煜,湯升,丁穎.  中國現(xiàn)代醫(yī)生. 2012(36)
[7]依達(dá)拉奉對大鼠XRCC1和細(xì)胞凋亡的影響[J]. 王智,薛榮亮,趙紅霞,高慧,魏欣.  實(shí)用藥物與臨床. 2012(09)
[8]可卡因-苯丙胺調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄肽對腦缺血-再灌注損傷小鼠腦保護(hù)機(jī)制的研究[J]. 沙杜鵑,韓勇,顧雙雙,王璐娜,朱震寒,李瑾,李啟明,張均.  中國腦血管病雜志. 2012(08)
[9]依達(dá)拉奉治療急性腦梗死臨床觀察[J]. 謝瑞萍.  臨床醫(yī)藥實(shí)踐. 2012(06)
[10]辛伐他汀對局灶性腦缺血大鼠半暗帶區(qū)緩激肽受體mRNA表達(dá)的影響[J]. 張健穎,張穎冬,高麗,顧昊,蔣藤.  中國臨床神經(jīng)科學(xué). 2011(06)



本文編號：3643433