第一部分目的:本實(shí)驗(yàn)觀察理沖生髓飲（LCSSY）有效組分對卵巢癌裸鼠皮下移植瘤組織中微環(huán)境相關(guān)因子的改變,探討LCSSY有效組分對卵巢癌侵襲轉(zhuǎn)移的抑制作用及相關(guān)分子機(jī)制,探索LCSSY對卵巢癌多信號靶點(diǎn)的作用機(jī)制。方法:建立Balb/C裸鼠卵巢癌皮下移植瘤模型,隨機(jī)分為模型組、貝伐單抗組、LCSSY有效組分低劑量組、LCSSY有效組分中劑量組、LCSSY有效組分高劑量組。觀察藥物作用后裸鼠的腫瘤生長情況,各組給藥干預(yù)18天,其中每隔兩天測量瘤體體積,繪制生長趨勢,于最后一次給藥后處死裸鼠,將瘤體稱重,采用RT-PCR檢測瘤體中腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）的mRNA表達(dá)情況;免疫組化法檢測瘤體中人毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞（VEGF）、基質(zhì)金屬蛋白酶-9（MMP9）、IL-1、低氧誘導(dǎo)因子-1（HIF-1）表達(dá);WesrernBlot法檢測轉(zhuǎn)化生長因子-β相關(guān)激酶（Tak1）、去磷酸化轉(zhuǎn)化生長因子-β相關(guān)激酶（p-Tak1）、核因子κB抑制蛋白激酶（IKKα）、去磷酸化核因子κB抑制蛋白激酶（p-IKKα）、核因子κB抑制蛋白（IKBα）、MMP9、TNF-α、I... 

【文章來源】：黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)黑龍江省

【文章頁數(shù)】：103 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
縮略語表
中文摘要
ABSTRACT
前言
文獻(xiàn)綜述
    一、西醫(yī)學(xué)對卵巢癌的研究進(jìn)展
        1. 卵巢癌的病因和流行病學(xué)研究
        2. 卵巢癌的西醫(yī)治療
        3. 卵巢癌的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移的相關(guān)因素
    二、中醫(yī)學(xué)對卵巢癌的研究進(jìn)展及對血管生成的研究
        1. 中醫(yī)學(xué)對卵巢癌概念及病因病機(jī)的認(rèn)識
        2. 中醫(yī)學(xué)對卵巢癌的現(xiàn)代醫(yī)學(xué)治療
    三、 卵巢癌微環(huán)境的研究
        1. 腫瘤微環(huán)境學(xué)說的提出
        2. 中醫(yī)藥在卵巢癌微環(huán)境的研究進(jìn)展
        3. 卵巢癌侵襲轉(zhuǎn)移微環(huán)境的相關(guān)因素分析
    四、理沖生髓飲在治療卵巢癌中的研究進(jìn)展
實(shí)驗(yàn)研究
    實(shí)驗(yàn)一 理沖生髓飲有效組分對卵巢癌侵襲轉(zhuǎn)移微環(huán)境的影響
        1. 實(shí)驗(yàn)材料
            1.1 藥物與試劑
            1.2 儀器與設(shè)備
            1.3 實(shí)驗(yàn)藥物
            1.4 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2. 實(shí)驗(yàn)方法
            2.1 構(gòu)建卵巢癌SKOV3荷瘤鼠模型
            2.2 給藥方法及取材
            2.3 石蠟切片腫瘤組織蘇木精-伊紅(HE)染色
            2.4免疫組化法檢測瘤體中7￡6「、1?1
9、丨1_-1、忖1「-1蛋白的表達(dá)
            2.5 RT-PCR檢測瘤體中TNF-a、IL-ip的mRNA表達(dá)
            2.6 Wesrern Blot 法檢測 Takl、p-Takl、IKKa、p-IKKct、IKBa、MMP9、TNFa、IL1P的蛋白表達(dá)
        3. 統(tǒng)計(jì)分析
        實(shí)驗(yàn)結(jié)果
            1 裸鼠皮下移植瘤模型成功率分析
            2 理沖生髓飲有效組分對裸鼠皮下移植瘤的生長抑制作用
            3 卵巢癌細(xì)胞移植瘤的病理學(xué)特征
            4 免疫組化法檢測瘤體中VEGF、MMP9、IL-1、HIF-1蛋白的表達(dá)
            5 RT-PCR檢測TNF-α、IL-1β基因的mRNA的表達(dá)
            6. 理沖生髓飲有效組分對裸鼠皮下移植瘤的Tak1、p-tak1、IKKα、p-IKKα、IKBα、MMP9、TNFα、IL1β的蛋白影響
    實(shí)驗(yàn)二 理沖生髓飲有效組分藥物血清對卵巢癌細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移的影響
        1. 實(shí)驗(yàn)材料
            1.1 藥物與試劑
            1.2 儀器與設(shè)備
            1.3 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
            1.4 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2. 實(shí)驗(yàn)方法
            2.1 含藥血清的制備
            2.2 SKOV-3細(xì)胞培養(yǎng)
            2.3 理沖生髓飲有效組分藥物血清觀察雞胚絨毛尿囊膜血管生成的情況
            2.4 MTT法檢測理沖生髓飲有效組分含藥血清對卵巢癌SKOV3細(xì)胞的增殖抑制作用
            2.5 劃痕實(shí)驗(yàn)(遷移實(shí)驗(yàn))
            2.6 Transwell細(xì)胞侵襲、轉(zhuǎn)移試驗(yàn)
            2.7 ELISA法檢測人卵巢癌細(xì)胞上清液中VEGF、MMP-9、IL-6、IL-1、TNF-α的濃度
        3. 統(tǒng)計(jì)分析
        實(shí)驗(yàn)結(jié)果
            1 卵巢癌細(xì)胞SKOV3的培養(yǎng)
            2 理沖生髓飲有效組分藥物血清對雞胚絨毛尿囊膜血管生成的影響
            3 MTT法檢測理沖生髓飲有效組分含藥血清對卵巢癌SKOV3細(xì)胞的增殖抑制作用
            4 理沖生髓飲有效組分對卵巢癌細(xì)胞SKOV3的遷移和侵襲作用
            5 Elisa法細(xì)胞上清液中VEGF、MMP-9、IL-6、IL-1、TNF-α的濃度
討論
    一、卵巢癌微環(huán)境相關(guān)因子和侵襲轉(zhuǎn)移的關(guān)系
    二、理沖生髓飲有效組分對卵巢癌侵襲轉(zhuǎn)移微環(huán)境相關(guān)因子的作用
    三、理沖生髓飲有效組分對卵巢癌轉(zhuǎn)移能力的影響
    四、理沖生髓飲有效組分的中醫(yī)理論基礎(chǔ)和實(shí)驗(yàn)研究依據(jù)
    五、不足和展望
結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄
個(gè)人簡歷


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]理沖生髓飲有效組分對卵巢癌組織的相關(guān)基因表達(dá)與血管生成影響[J]. 郭瀅,張艷,韓鳳娟.  中醫(yī)藥學(xué)報(bào). 2018(01)
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[3]益氣活血解毒方加減治療卵巢癌紫杉醇化療后外周神經(jīng)毒性臨床觀察[J]. 馬丹,鄭巧,閆會(huì)苓,盧雯平.  天津中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào). 2014(05)
[4]卵巢子宮內(nèi)膜異位癥惡變與卵巢癌的相關(guān)性研究及預(yù)后分析[J]. 吳雨珂,廖光東,張竹,楊帆,趙倩穎,何艷梅,陳悅,王平,劉輝,王紅靜,郄明蓉.  實(shí)用婦產(chǎn)科雜志. 2014(09)
[5]莪術(shù)-三棱藥對配伍揮發(fā)油成分GC-MS分析[J]. 廖華軍.  遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào). 2014(08)
[6]卵巢癌起源及發(fā)病機(jī)制研究的最新進(jìn)展[J]. 徐燕寧,劉易欣.  解剖科學(xué)進(jìn)展. 2014(03)
[7]晚期卵巢癌中醫(yī)證型分布規(guī)律研究[J]. 夏愷,車煥麗,盧雯平.  新中醫(yī). 2013(04)
[8]益氣活血解毒中藥聯(lián)合樹突狀細(xì)胞疫苗對荷瘤小鼠免疫抑制的調(diào)控[J]. 盧雯平,李向英,李曉,范秀華.  中國中醫(yī)藥信息雜志. 2013(03)
[9]水蛭抑制腫瘤血管生成的作用及其機(jī)制[J]. 李小菊,盧宏達(dá),陳衛(wèi)群,雷章,胡楊,孔慶志.  腫瘤防治研究. 2013(01)
[10]增免抑瘤方聯(lián)合順鉑對鉑類耐藥卵巢癌抑瘤率影響的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 齊聰,張勤華,李久現(xiàn),胡欣欣.  中國中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2012(06)

博士論文
[1]理沖生髓飲有效組分對卵巢癌血管生成影響及JAK2/STAT3信號通路調(diào)控的機(jī)制研究[D]. 張艷.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué) 2016

碩士論文
[1]理沖生髓飲對卵巢癌術(shù)后化療患者減毒作用的療效分析[D]. 夏霽.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué) 2017
[2]卵巢癌患者中醫(yī)證型和心理社會(huì)因素及性格的相關(guān)性研究[D]. 郭瀅.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué) 2015
[3]80例卵巢癌患者中醫(yī)體質(zhì)分布及其相關(guān)因素分析[D]. 孟楠楠.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué) 2015
[4]活血解毒方對晚期卵巢癌患者療效及生活質(zhì)量影響的研究[D]. 夏愷.北京中醫(yī)藥大學(xué) 2014
[5]扶正解毒方對小鼠前胃癌所誘導(dǎo)的腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞干預(yù)作用研究[D]. 黎磊.北京中醫(yī)藥大學(xué) 2013
[6]中醫(yī)藥干預(yù)對婦科惡性腫瘤放化療患者生存質(zhì)量的影響研究[D]. 高雪.成都中醫(yī)藥大學(xué) 2012



本文編號：3639259