目的:肺癌是全世界最為常見的惡性腫瘤之一,其發(fā)病率和死亡率在癌癥中均居第一位,隨著肺癌病程的發(fā)展,癌細胞極易發(fā)生侵襲、轉(zhuǎn)移,這也是肺癌難以治愈,生存率低的主要原因。目前治療肺癌方式不足,亟需研究開發(fā)新的抗肺癌藥物,以延長患者的生存期,提高患者的生存質(zhì)量。中藥重樓（Rhizoma Paridis）是傳統(tǒng)中醫(yī)配伍抗癌方劑的常用藥物,現(xiàn)代藥理學研究證明重樓具有抗腫瘤、鎮(zhèn)定止痛、抑菌消炎等作用,重樓皂苷是其主要活性成分。目前研究報道較多的是常見重樓皂苷Ⅰ、重樓皂苷Ⅵ和重樓皂苷Ⅶ,事實上重樓中還有很多具有生物活性的皂苷類成分。此外,相關(guān)的研究多為探討重樓皂苷誘導癌細胞凋亡和自噬性死亡,關(guān)于重樓皂苷抑制癌細胞侵襲、轉(zhuǎn)移作用及相關(guān)機制尚未見廣泛報道�；谝陨舷嚓P(guān)資料,本研究擬選取肺腺癌A549細胞模型作為研究對象,研究九種重樓皂苷單體（重樓皂苷Ⅰ、重樓皂苷Ⅱ、重樓皂苷Ⅲ、重樓皂苷Ⅴ、重樓皂苷Ⅵ、重樓皂苷Ⅶ、重樓皂苷H、纖細薯蕷皂苷、17-羥基纖細薯蕷皂苷）對A549細胞生長抑制及侵襲、轉(zhuǎn)移作用的影響;并通過以上實驗結(jié)果篩選出抑制作用強的重樓皂苷Ⅱ進行深入研究,從PI3K/AKT/mTOR信號通路切入... 

【文章來源】：湖北中醫(yī)藥大學湖北省

【文章頁數(shù)】：101 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略詞表
前言
第一章 九種重樓皂苷抑制A549細胞生長、遷移、侵襲的作用研究
    1.1 實驗材料
        1.1.1 細胞來源
        1.1.2 實驗試劑
        1.1.3 主要試劑的配制
        1.1.4 實驗儀器和設(shè)備
    1.2 實驗方法與步驟
        1.2.1 細胞培養(yǎng)
        1.2.2 MTT法測定九種重樓皂苷對A549 細胞的生長抑制作用
        1.2.3 Transwell法檢測九種重樓皂苷對A549 細胞侵襲能力的影響
        1.2.4 劃痕實驗檢測重樓皂苷對A549 細胞遷移能力的影響
        1.2.5 統(tǒng)計分析
    1.3 .實驗結(jié)果
        1.3.1 九種重樓皂苷對A549 細胞的增殖均具有抑制作用
        1.3.2 九種重樓皂苷均能抑制A549 細胞的侵襲能力
        1.3.3 九種重樓皂苷均能抑制A549 細胞的遷移作用
    1.4 小結(jié)與討論
第二章 重樓皂苷Ⅱ抑制A549 細胞侵襲和遷移的作用機制研究
    2.1 實驗材料
        2.1.1 細胞來源
        2.1.2 實驗試劑
        2.1.3 主要試劑的配制
        2.1.4 主要儀器和設(shè)備
    2.2 實驗方法與步驟
        2.2.1 細胞培養(yǎng)
        2.2.2 采用Real-time PCR檢測細胞中m RNA的表達
        2.2.3 采用Western blotting檢測細胞蛋白表達
        2.2.4 統(tǒng)計分析
    2.3 實驗結(jié)果
        2.3.1 重樓皂苷Ⅱ?qū)549 細胞中MMP-1、MMP-2和MMP-9 基因水平的調(diào)控
        2.3.2 重樓皂苷Ⅱ?qū)549 細胞中MMP-1、MMP-2和MMP-9 蛋白表達的調(diào)控
        2.3.3 重樓皂苷Ⅱ?qū)549 細胞中PI3K/AKT/mTOR信號通路的調(diào)控
    2.4. 小結(jié)與討論
第三章 重樓皂苷Ⅱ平衡溶解度、穩(wěn)定性及油水分配系數(shù)的測定
    3.1 實驗材料
        3.1.1 實驗試劑
        3.1.2 實驗儀器
    3.2 實驗方法與步驟
        3.2.1 溶液的配制
        3.2.2 確定重樓皂苷Ⅱ的紫外吸收波長
        3.2.3 平衡溶解度的測定
        3.2.4 不同pH值下重樓皂苷Ⅱ穩(wěn)定性的考察
        3.2.5 不同pH值下重樓皂苷Ⅱ表觀油水分配系數(shù)測定
    3.3 實驗結(jié)果
        3.3.1 重樓皂苷Ⅱ紫外波長掃描
        3.3.2 方法學考察
        3.3.3 重樓皂苷Ⅱ平衡溶解度的測定
        3.3.4 不同pH值條件下重樓皂苷Ⅱ穩(wěn)定性的考察
        3.3.5 重樓皂苷Ⅱ油水分配系數(shù)的測定
    3.4 小結(jié)與討論
結(jié)語
參考文獻
附錄 文獻綜述
    參考文獻
攻讀學位期間發(fā)表的科研成果目錄
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
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[2]人參皂苷Rg3抗腫瘤作用的研究進展[J]. 王洪羽,金宏,劉威,高連叢,韓柳.  世界最新醫(yī)學信息文摘. 2018(68)
[3]知母皂苷BII在模擬人體胃腸道環(huán)境及生物樣品中的穩(wěn)定性研究[J]. 劉艷平,余自成.  中國現(xiàn)代應用藥學. 2018(05)
[4]重樓皂苷抗腫瘤作用機制的研究進展[J]. 張鴻飛,梅其炳,張峰,劉新利,孟瑾,孫陽.  癌變·畸變·突變. 2018(02)
[5]重樓皂苷Ⅰ聯(lián)合順鉑抗肺癌的體內(nèi)外協(xié)同增效研究[J]. 石寒冰,牟海軍,趙丹,畢紅霞,牛英才,劉波,姜云飛.  齊齊哈爾醫(yī)學院學報. 2017(19)
[6]重樓皂苷聯(lián)合順鉑對人肺腺癌A549細胞凋亡及遷徙轉(zhuǎn)移的影響[J]. 牟海軍,石寒冰,趙丹,畢紅霞,牛英才,劉波,姜云飛.  齊齊哈爾醫(yī)學院學報. 2017(19)
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[8]重樓皂苷類成分分析方法的研究進展[J]. 劉丹,戈勛,逯雙,王信,孫萍,曹廣尚,孫洪勝.  中國醫(yī)院藥學雜志. 2017(12)
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碩士論文
[1]黃芪抗腫瘤的有效成分及作用機制的研究進展[D]. 李亞男.重慶醫(yī)科大學 2017
[2]重樓活性單體PP-26對肝癌HepG2細胞的增殖抑制作用及其機制[D]. 劉紀明.暨南大學 2016
[3]重樓總皂苷抗腫瘤機制研究[D]. 李濤.陜西師范大學 2013



本文編號：3638161