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基于PI3K-Akt/PKB信號(hào)通路的陽(yáng)和平喘顆粒干預(yù)支氣管哮喘氣道重塑機(jī)制研究

發(fā)布時(shí)間:2022-02-20 23:17
  陽(yáng)和平喘顆粒是安徽中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院呼吸內(nèi)科以“補(bǔ)腎化痰”為理念,在“陽(yáng)和湯”和“平喘湯”組方的基礎(chǔ)上,結(jié)合多年的臨床實(shí)踐,化裁而成。方中含有麻黃、熟地、當(dāng)歸等九味中藥,功擅止咳化痰,兼具斂肺補(bǔ)腎,主治腎陽(yáng)虛型哮喘。陽(yáng)和平喘顆粒是該方經(jīng)現(xiàn)代制劑工藝制備而成的特色中藥制劑。目的:陽(yáng)和平喘顆粒臨床主要用于治療腎陽(yáng)虛型支氣管哮喘(bronchial asthma,BA),療效確切,但具體作用機(jī)制尚未明確。本研究以PI3K/PKB信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路為基礎(chǔ),探討陽(yáng)和平喘顆粒治療BA的潛在分子機(jī)制。方法:1陽(yáng)和平喘顆粒對(duì)腎陽(yáng)虛型支氣管哮喘大鼠PI3K/PKB信號(hào)通路的調(diào)控作用采用卵清白蛋白(OVA)致敏及腹腔注射氫化可的松的方法復(fù)制腎陽(yáng)虛型BA大鼠模型。取正常大鼠10只作為正常組,另取造模成功的大鼠分為模型組,陽(yáng)和平喘顆粒給藥組(14.76、7.38、3.69 g/kg)和桂龍咳喘寧組(1.0 g/kg),每組10只。給藥2周后,HE染色觀察BA大鼠支氣管病變情況,Real-time PCR檢測(cè)胞內(nèi)磷脂酰肌醇激酶(PI3K)、蛋白激酶B(PKB)、腎上腺素受體(AR)和增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)mR... 

【文章來(lái)源】:安徽中醫(yī)藥大學(xué)安徽省

【文章頁(yè)數(shù)】:75 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
中文摘要
ABSTRACT
英文縮略詞(Abbreviation)
前言
實(shí)驗(yàn)一 陽(yáng)和平喘顆粒對(duì)腎陽(yáng)虛型支氣管哮喘大鼠PI3K/PKB信號(hào)通路的調(diào)控作用
    1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.2 實(shí)驗(yàn)藥物
        1.3 試劑
        1.4 儀器
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 哮喘模型的建立
        2.2 腎陽(yáng)虛模型的建立
        2.3 給藥方案
        2.4 大鼠一般形態(tài)學(xué)觀察
        2.5 氣道平滑肌組織的采集
        2.6 UPLC-PDA對(duì)陽(yáng)和平喘顆粒的定性研究
        2.7 病理組織學(xué)檢測(cè)
        2.8 Realtime-PCR檢測(cè)PI3K、PKB、PCNA、ARmRNA的表達(dá)
        2.9 Western-blot檢測(cè)PI3K、PKB、PCNA、AR蛋白的表達(dá)
        2.10 ELISA檢測(cè)PIP2,PIP3,IL-6,IL-8,IL-1β和EPI的表達(dá)
    3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    4 結(jié)果
        4.1 大鼠行為狀態(tài)的觀察
        4.2 陽(yáng)和平喘顆粒有效成分定性研究
        4.3 大鼠肺組織病理改變
        4.4 陽(yáng)和平喘顆粒對(duì)BA大鼠PI3K/PKB通路的調(diào)節(jié)作用
        4.5 陽(yáng)和平喘顆粒對(duì)大鼠組織炎癥因子IL-6,IL-8,IL-1β表達(dá)的影響
        4.6 陽(yáng)和平喘顆粒對(duì)大鼠腎上腺素軸功能的影響
        4.7 陽(yáng)和平喘顆粒對(duì)支氣管哮喘大鼠細(xì)胞增殖的影響
    5 討論
        5.1 動(dòng)物模型的選擇依據(jù)
        5.2 BA與PI3K/PKB信號(hào)通路
        5.3 BA與炎癥因子
        5.4 BA與EPI,AR
實(shí)驗(yàn)二 陽(yáng)和平喘顆粒含藥血清對(duì)OVA誘導(dǎo)的BA大鼠ASMCs中PI3K/PKB信號(hào)通路的調(diào)控作用
    1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.2 實(shí)驗(yàn)藥物
        1.3 試劑
        1.4 儀器
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 陽(yáng)和平喘顆粒含藥血清的制備
        2.2 氣道平滑肌細(xì)胞的培養(yǎng)
        2.3 MTT法篩選陽(yáng)和平喘顆粒含藥血清最佳作用時(shí)間和濃度
        2.4 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)分組
        2.5 Realtime-PCR檢測(cè)PI3K、PKB、PCNA、ARmRNA的表達(dá)
        2.6 Western-blot檢測(cè)PI3K、PKB、PCNA蛋白的表達(dá)
        2.7 酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)PIP2,PIP3,IL-6,IL-8,IL-1β的表達(dá)
    3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    4 結(jié)果
        4.1 陽(yáng)和平喘顆粒最佳濃度含藥血清和最佳作用時(shí)間篩選
        4.2 陽(yáng)和平喘顆粒對(duì)BA大鼠肺組織PI3K、PKB表達(dá)的影響
        4.3 陽(yáng)和平喘顆粒對(duì)BA大鼠肺組織PIP2、PIP3表達(dá)的影響
        4.4 陽(yáng)和平喘顆粒含藥血清對(duì)ASMCs增殖的影響
    5 討論
        5.1 陽(yáng)和平喘顆粒含藥血清對(duì)ASMCs增殖的影響
        5.2 陽(yáng)和平喘顆粒含藥血清對(duì)PI3K/PKB信號(hào)通路的影響
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
個(gè)人簡(jiǎn)介
致謝


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[10]小青龍湯聯(lián)合中藥封包治療外寒里飲型支氣管哮喘的臨床研究[J]. 曹芬芬,萬(wàn)麗玲,劉美年,丁兆輝,葉超,王麗華.  中醫(yī)藥通報(bào). 2017(04)

博士論文
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本文編號(hào):3636006

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