目的:基于細(xì)胞色素C氧化酶亞基Ⅰ（COⅠ）序列建立一種新的PCR鑒定方法,以快速鑒別出梅花鹿、馬鹿茸片與馴鹿茸片。方法:采集不同來源的鹿茸片共60批。通過比較梅花鹿、馬鹿與馴鹿等其他偽品的COⅠ基因序列差異,根據(jù)SNP鑒別位點(diǎn)設(shè)計(jì)梅花鹿茸、馬鹿茸同馴鹿茸的鑒別引物Cne-F、Rt-F、Co-R,并對(duì)影響聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）結(jié)果的主要因素變性時(shí)間、退火溫度、退火時(shí)間、延伸時(shí)間等進(jìn)行方法學(xué)考察和優(yōu)化。結(jié)果:該實(shí)驗(yàn)構(gòu)建的雙位點(diǎn)特異PCR鑒別體系,基于COⅠ的鑒別位點(diǎn),可通過PCR擴(kuò)增獲得294 bp的梅花鹿、馬鹿特異片段,而產(chǎn)生514 bp的馴鹿特異片段,偽品及陰性對(duì)照無條帶。結(jié)論:該實(shí)驗(yàn)建立對(duì)梅花鹿、馬鹿及馴鹿等其他偽品鹿茸的PCR鑒別方法簡(jiǎn)便、可靠。 

【文章來源】：世界中醫(yī)藥. 2020,15(10)

【文章頁(yè)數(shù)】：5 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與儀器
    1.1 材料
    1.2 試劑
    1.3 儀器
2 方法
    2.1 鹿茸樣品基因組DNA的提取
    2.2 PCR擴(kuò)增及序列測(cè)定
    2.3 系統(tǒng)鄰接樹構(gòu)建
    2.4 位點(diǎn)特異性PCR引物設(shè)計(jì)及PCR條件考察
    2.5 鹿茸片PCR鑒別方法驗(yàn)證
3 結(jié)果
    3.1 系統(tǒng)鄰接樹信息分析結(jié)果
    3.2 PCR反應(yīng)條件以及體系
    3.3 鹿茸片PCR鑒別方法驗(yàn)證
4 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]《中國(guó)藥典》收載動(dòng)物藥材DNA條形碼鑒定研究策略與方法[J]. 姚輝,張輝,陳士林.  中國(guó)現(xiàn)代中藥. 2019(09)
[2]鹿茸、鹿角的位點(diǎn)特異性PCR鑒別[J]. 錢潤(rùn),田娜,張雪艷,蔣超,袁媛.  中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志. 2019(17)
[3]鹿茸炮制方法、化學(xué)成分以及藥理作用研究進(jìn)展[J]. 王亞蘋,張凱月,張輝,高穎.  吉林中醫(yī)藥. 2019(04)
[4]梅花鹿鹿茸片及近源品種真?zhèn)舞b別[J]. 李明月,王倩雯,石瑤,張敏.  中國(guó)林副特產(chǎn). 2019(01)
[5]鹿茸的藥材鑒別[J]. 祝之友.  中國(guó)中醫(yī)藥現(xiàn)代遠(yuǎn)程教育. 2018(18)
[6]基于雙重PCR技術(shù)的鹿茸及其偽品DNA指紋特征和鑒定[J]. 高麗君,何程遠(yuǎn),李盈諾,巴宏宇,李梓僮,夏薇,李明成,苑廣信,張麗華,艾金霞.  吉林大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2018(04)
[7]鹿產(chǎn)品鑒別的研究進(jìn)展[J]. 董世武,王磊,周永娜,邢秀梅.  經(jīng)濟(jì)動(dòng)物學(xué)報(bào). 2018(04)
[8]鹿茸的化學(xué)成分及質(zhì)量控制方法研究進(jìn)展[J]. 郭曉晗,程顯隆,李明華,張文娟,魏鋒,馬雙成.  藥物分析雜志. 2018(04)
[9]鹿茸的性狀及顯微鑒別[J]. 張小冬,李垠含,劉穎.  甘肅醫(yī)藥. 2018(02)
[10]鹿茸藥效物質(zhì)基礎(chǔ)、藥理作用、臨床應(yīng)用及質(zhì)量控制的研究進(jìn)展[J]. 王楠,高曉霞,代子彥,郝晉琪,秦雪梅.  中草藥. 2017(22)



本文編號(hào)：3634040