【研究目的】絲石竹皂苷元（Gypsogenin）,齊墩果烷型五環(huán)三萜化合物,主要以糖苷形式存在于石竹科（Caryophyllaceae）石頭花屬（Gypsophila）植物絲石竹（Gypsophila oldhamiana Miq.）的根莖中,具有抗癌、抗氧化、降血糖、降膽固醇、抗菌、抑制α-葡萄糖苷酶和乙酰膽堿酯酶等藥理作用。對(duì)絲石竹（Gypsophila oldhamiana Miq.）中的Gypsogenin進(jìn)行提取分離,并對(duì)其進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾,研究衍生物對(duì)癌細(xì)胞增殖、細(xì)胞凋亡與細(xì)胞周期的影響�！狙芯糠椒ā坎捎醚趸X、硅膠、Sephadex LH-20、ODS等柱色譜、HPLC、重結(jié)晶等手段,對(duì)Gypsogenin進(jìn)行提取分離。經(jīng)過(guò)一系列反應(yīng)對(duì)Gypsogenin的3位羥基、23位醛基和28位羧基進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾,根據(jù)化合物的理化性質(zhì)并結(jié)合UV、IR、NMR、MS等波譜技術(shù)對(duì)分離得到的絲石竹皂苷元進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。采用MTT法進(jìn)行人肺腺癌（A549）、人結(jié)腸癌（LOVO）、人卵巢癌（SKOV3）和人肝癌（HepG2）細(xì)胞毒性的篩選。在此基礎(chǔ)上,進(jìn)一步研究活性較好的化合物對(duì)細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡的... 

【文章來(lái)源】：濟(jì)南大學(xué)山東省

【文章頁(yè)數(shù)】：119 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

（a）陰性對(duì)照；（b,c）化合物4和7g濃度分別為5μM時(shí)的細(xì)胞形態(tài)

圖 3.2 化合物 4 和 7g 濃度為 5 μM 時(shí)的凋亡率實(shí)驗(yàn)染色原理（Propidium，簡(jiǎn)稱 PI）是一種具有染色性質(zhì)的染料，生熒光。細(xì)胞不同時(shí)期的脫氧核苷酸含量是不同的，測(cè)定可以間接獲得細(xì)胞周期的信息，而對(duì)脫氧核糖核以以直觀的方式呈現(xiàn)出來(lái)[46]。與藥物作用LOVO）細(xì)胞在二氧化碳培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)48 h，取生長(zhǎng)正酶消化細(xì)胞，稀釋細(xì)胞數(shù)至1×106個(gè)/mL，于6孔板內(nèi)種

每管細(xì)胞樣品中加入0.5 mL碘化丙啶染色液，緩慢并充分重懸細(xì)胞沉淀，37oC避光溫浴30分鐘后用流式細(xì)胞儀檢測(cè)。結(jié)果顯示：化合物4和7g能使人結(jié)腸癌（LOVO）細(xì)胞在S期受阻（見(jiàn)圖3.3）。abcde圖 3.3 （a）陰性對(duì)照；（b, c）化合物 4 濃度分別為 5 和 10 μM 時(shí)對(duì)細(xì)胞周期的影響；（d, e）化合物 7g 濃度分別為 5 和 10 μM 時(shí)對(duì)細(xì)胞周期的影響3.5 結(jié)果與討論以絲竹皂苷元為先導(dǎo)物進(jìn)行結(jié)構(gòu)優(yōu)化，共獲得 32 個(gè)衍生物。通過(guò)觀察上述實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)：3 位酰化、28 位羧基成酰胺，23 位醛基成腙或肟時(shí)，MTT 所測(cè)得 IC50值較先導(dǎo)化合物絲石竹皂苷元明顯降低，細(xì)胞毒活性明顯增加。其中，化合物 4 和 7g 對(duì)人結(jié)腸癌（LOVO）細(xì)胞 IC50值最小，兩者可通過(guò)阻滯細(xì)胞周期、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡等途徑抑制癌細(xì)胞增殖，具有顯著抑制癌細(xì)胞增殖的作用，對(duì)絲石竹皂苷元的化學(xué)和藥理活性研究具有重要的參考意義，為抗癌藥物的開(kāi)發(fā)和利用奠定了

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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