發(fā)布時間：2022-02-08 20:50

　　重組人成纖維細胞生長因子10（Recombinant human fibroblast growth factor10,rh FGF-10）被廣泛應用于皮膚損傷修復,同時其也有促進毛發(fā)生長的作用。然而,其不穩(wěn)定性、透皮吸收效果差等缺點限制了其臨床應用。因此本研究主要針對其不足之處,利用基因工程技術使rh FGF-10基因與油體蛋白基因oleosin在紅花中融合表達oleosin-rh FGF-10蛋白,通過融合表達對rh FGF進行結構修飾使oleosin-rh FGF-10能克服傳統(tǒng)rh FGF-10的不足之處,并對其相關藥理學活性進行實驗探究。轉基因紅花種植后待長出6-8片新葉,初步進行0.1%Basta抗性篩選,選擇具有抗性的株系對其基因組進行PCR鑒定和Southern blot鑒定,待紅花種子成熟后從種子中提取總油體蛋白,SDS-PAGE和Western blotting鑒定轉基因紅花種子中是否能成功表達出目的蛋白oleosin-rh FGF-10蛋白。將oleosin-rh FGF-10進行抗胰蛋白酶實驗,經(jīng)SDS-PAGE電泳和Western blotting來驗證目的蛋... 

【文章來源】：吉林農(nóng)業(yè)大學吉林省

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

基因組PCR鑒定結果

圖 1.2 基因組 Southern blot 鑒定Fig 1.2 Southern blot detection of genomeM：DL15000Marker；b-c：轉基因紅花基因組；d：陰性對照組 轉基因紅花表達目的蛋白鑒定結果基因紅花總油體蛋白經(jīng) SDS-PAGE 和 Western blot 鑒定后如圖 在 45 KDa 左右出現(xiàn)目的條帶，與預期目的蛋白大小相同，而陰帶，說明該株系的紅花種子中能夠成功表達出目的蛋白 oleosin-r

圖 1.4 Western blot 鑒定 oleosin-rhFGF-10 蛋白Fig. 1.4 oleosin-rhFGF-10 was detected by Western blotlot 鑒定結果，其中 M 蛋白 Mark，a 為陽性對照組，b-c 為轉基因，在 45KDa 處出現(xiàn)目的條帶。年來，隨著人們對 FGF-10 研究的不斷深入，發(fā)現(xiàn) FGF-1病方面有著重要的作用。目前，F(xiàn)GF-10 主要被用于治療各傷，肺表皮細胞損傷，角膜損傷，以及 FGF-10 具有良好有潛在的治療脫發(fā)性疾病的應用價值。因此，尋求一種高 FGF-10 的方法既可以滿足人們對 FGF-10 的需求，又可。究將外源重組人成纖維細胞生長因子 10 基因，經(jīng)過相應的的表達載體，利用農(nóng)桿菌遺傳轉化法轉化紅花，最終在紅出重組人成纖維細胞生長因子 10 蛋白，經(jīng)過一系列的鑒

【參考文獻】：
期刊論文
[1]重組人角質細胞生長因子-2對實驗禿毛大鼠的毛發(fā)再生作用[J]. 王澤,黃鵬煌,趙海洋,李海燕,田海山,李校堃.  中國藥理學通報. 2012(12)



本文編號：3615727