重組人成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子10（Recombinant human fibroblast growth factor10,rh FGF-10）被廣泛應(yīng)用于皮膚損傷修復(fù),同時(shí)其也有促進(jìn)毛發(fā)生長(zhǎng)的作用。然而,其不穩(wěn)定性、透皮吸收效果差等缺點(diǎn)限制了其臨床應(yīng)用。因此本研究主要針對(duì)其不足之處,利用基因工程技術(shù)使rh FGF-10基因與油體蛋白基因oleosin在紅花中融合表達(dá)oleosin-rh FGF-10蛋白,通過(guò)融合表達(dá)對(duì)rh FGF進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾使oleosin-rh FGF-10能克服傳統(tǒng)rh FGF-10的不足之處,并對(duì)其相關(guān)藥理學(xué)活性進(jìn)行實(shí)驗(yàn)探究。轉(zhuǎn)基因紅花種植后待長(zhǎng)出6-8片新葉,初步進(jìn)行0.1%Basta抗性篩選,選擇具有抗性的株系對(duì)其基因組進(jìn)行PCR鑒定和Southern blot鑒定,待紅花種子成熟后從種子中提取總油體蛋白,SDS-PAGE和Western blotting鑒定轉(zhuǎn)基因紅花種子中是否能成功表達(dá)出目的蛋白o(hù)leosin-rh FGF-10蛋白。將oleosin-rh FGF-10進(jìn)行抗胰蛋白酶實(shí)驗(yàn),經(jīng)SDS-PAGE電泳和Western blotting來(lái)驗(yàn)證目的蛋... 

【文章來(lái)源】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省

【文章頁(yè)數(shù)】：61 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

基因組PCR鑒定結(jié)果

圖 1.2 基因組 Southern blot 鑒定Fig 1.2 Southern blot detection of genomeM：DL15000Marker；b-c：轉(zhuǎn)基因紅花基因組；d：陰性對(duì)照組 轉(zhuǎn)基因紅花表達(dá)目的蛋白鑒定結(jié)果基因紅花總油體蛋白經(jīng) SDS-PAGE 和 Western blot 鑒定后如圖 在 45 KDa 左右出現(xiàn)目的條帶，與預(yù)期目的蛋白大小相同，而陰帶，說(shuō)明該株系的紅花種子中能夠成功表達(dá)出目的蛋白 oleosin-r

圖 1.4 Western blot 鑒定 oleosin-rhFGF-10 蛋白Fig. 1.4 oleosin-rhFGF-10 was detected by Western blotlot 鑒定結(jié)果，其中 M 蛋白 Mark，a 為陽(yáng)性對(duì)照組，b-c 為轉(zhuǎn)基因，在 45KDa 處出現(xiàn)目的條帶。年來(lái)，隨著人們對(duì) FGF-10 研究的不斷深入，發(fā)現(xiàn) FGF-1病方面有著重要的作用。目前，F(xiàn)GF-10 主要被用于治療各傷，肺表皮細(xì)胞損傷，角膜損傷，以及 FGF-10 具有良好有潛在的治療脫發(fā)性疾病的應(yīng)用價(jià)值。因此，尋求一種高 FGF-10 的方法既可以滿足人們對(duì) FGF-10 的需求，又可。究將外源重組人成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子 10 基因，經(jīng)過(guò)相應(yīng)的的表達(dá)載體，利用農(nóng)桿菌遺傳轉(zhuǎn)化法轉(zhuǎn)化紅花，最終在紅出重組人成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子 10 蛋白，經(jīng)過(guò)一系列的鑒

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]重組人角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子-2對(duì)實(shí)驗(yàn)禿毛大鼠的毛發(fā)再生作用[J]. 王澤,黃鵬煌,趙海洋,李海燕,田海山,李校堃.  中國(guó)藥理學(xué)通報(bào). 2012(12)



本文編號(hào)：3615727