目的:1.體外細(xì)胞實驗探討（1）重樓皂苷I對人去勢抵抗性前列腺癌PC3與DU145細(xì)胞生長的抑制作用及分子機制;（2）重樓皂苷I聯(lián)合恩雜魯胺對PC3與DU145細(xì)胞生長的抑制增強作用及分子機制。2.體內(nèi)動物實驗探討（1）重樓皂苷I對人去勢抵抗性前列腺癌DU145裸鼠移植瘤的抑制作用及相關(guān)通路蛋白或RNA表達(dá)的影響,以了解重樓皂苷I體內(nèi)抗前列腺癌機制;（2）重樓皂苷I聯(lián)合恩雜魯胺對DU145裸鼠移植瘤的抑制增強作用及相關(guān)通路蛋白或RNA表達(dá)的影響,以了解聯(lián)合給藥在體內(nèi)抗前列腺癌的協(xié)同作用機制。方法:第一部分:1.MTT法（四甲基偶氮唑鹽比色法）觀察PPI對去勢抵抗性前列腺癌PC3和DU145細(xì)胞的生長是否具有抑制作用及時間與劑量依賴關(guān)系;沉默LncRNA HOTAIR對PC3和DU145細(xì)胞的生長是否有抑制作用;過表達(dá)HOTAIR、EZH2、DNMT1能否逆轉(zhuǎn)PPI對PC3和DU145細(xì)胞的生長抑制作用。2.流式細(xì)胞術(shù)檢測PPI對PC3和DU145細(xì)胞周期的影響。3.細(xì)胞遷移實驗（劃痕實驗）檢測PPI對PC3和DU145細(xì)胞遷移能力的影響。4.細(xì)胞侵襲實驗（Transwell侵襲實驗）檢... 

【文章來源】：廣州中醫(yī)藥大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：91 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

APPI對細(xì)胞生長的影響

表 1A2 PPI 對 PC3 細(xì)胞活力的影響 (%, ±s,n=3)PPI（μM）Cell viability24h 48h 72h0 1.00±0.00 1.00±0.00 1.00±0.000.4 0.85±0.05*0.88±0.02*0.84±0.04*0.8 0.79±0.04*0.80±0.06*0.79±0.03*1.2 0.75±0.04*0.64±0.03*0.50±0.01*1.6 0.70±0.04*0.55±0.05*0.42±0.02*2.0 0.55±0.04*0.45±0.02*0.33±0.01*2.4 0.46±0.04*0.38±0.02*0.32±0.02*注：* 與空白組（未加藥組）相比，P<0.05。3.1.1.2 不同劑量 PPI 給藥檢測細(xì)胞周期結(jié)果顯示：PPI 能引起 PC3 和 DU145 細(xì)胞阻滯于 S 期，且隨 PPI 劑量的增加，S 期阻滯程度則越大，在 PC3 細(xì)胞 PPI 1.6μM組與空白組差異有統(tǒng)計學(xué)意義，在 DU145 細(xì)胞 PPI 1.2μM、1.6μM 組與空白組差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)（圖 1B，表 1B1-2）。

廣州中醫(yī)藥大學(xué) 2018 屆碩士學(xué)位論文表 1B2 PPI 對 DU145 細(xì)胞周期的影響 (%, ±s,n=3)CON（μM）phase0 0.8 1.2 1.6G0/G1 69.03±1.99 64.47±2.59 61.42±3.67 59.86±2.55S 21.38±1.00 24.92±1.78 27.01±2.86*28.86±1.43*G2/M 9.591±1.25 10.61±1.41 11.57±0.95 11.28±1.61注：* 與空白對照組相比，P<0.05。3.1.1.3 細(xì)胞遷移實驗（劃痕實驗）結(jié)果顯示：經(jīng) PPI（1.2μM）處理后的 PC3及 DU145 細(xì)胞的劃痕寬度明顯比空白組大，向中央劃痕區(qū)域遷移能力明顯減弱，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；說明 PPI 能抑制細(xì)胞的遷移能力（圖 1C，表 1C）。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]長鏈非編碼RNA與表觀遺傳調(diào)控[J]. 胡亮,侯敢,黃迪南.  基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué). 2016(12)
[2]重樓皂苷抗腫瘤作用機制研究進(jìn)展[J]. 盧偉,潘夢,楊光義,張晨寧,胡培.  中國藥師. 2016(12)
[3]zeste基因增強子同源物2抑制劑GSK126對前列腺癌細(xì)胞的作用及機制[J]. 林偉仁,陳亞天,曾玲暉,應(yīng)榮彪,朱鋒.  浙江大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2016 (04)
[4]長鏈非編碼RNA-HOTAIR對前列腺癌細(xì)胞周期和侵襲影響的實驗研究[J]. 朱意,虞日考,紀(jì)阿林,姚曉霖,方家杰,金曉東.  中華男科學(xué)雜志. 2015(09)
[5]重樓皂苷Ⅰ對人乳腺癌細(xì)胞MCF-7體內(nèi)外生長的抑制作用[J]. 胡煒彥,李菊,賀智勇,付昆,張榮平.  中成藥. 2015(07)
[6]重樓皂苷影響JAK/STAT3通路誘導(dǎo)結(jié)直腸癌細(xì)胞凋亡[J]. 滕文靜,周超,曹曉靖,孫長崗,秦寶寧.  時珍國醫(yī)國藥. 2015(04)
[7]長鏈非編碼RNA HOTAIR在惡性腫瘤中的研究進(jìn)展[J]. 李雨薇,王裕民,張雪瑩,薛丹,鄺彪,潘序雅,荊益州,李小玲,周鳴,熊煒,曾朝陽,李桂源.  生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 2015(03)
[8]重樓皂苷Ⅰ對膀胱癌細(xì)胞凋亡的影響[J]. 姜福瓊,王劍松,鄧丹琪,劉馨.  中國實驗方劑學(xué)雜志. 2014(18)
[9]長鏈非編碼RNA與表觀遺傳調(diào)控[J]. 陳宇寧,熊興東.  生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 2014(08)
[10]重樓皂苷Ⅰ通過PI3K/Akt途徑誘導(dǎo)胰腺癌PANC-1細(xì)胞凋亡的研究[J]. 江皓,趙鵬軍,馬勝林.  腫瘤學(xué)雜志. 2014(02)



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