目的:觀察異鉤藤堿（Isorhynchophylline,IRN）對β-淀粉樣蛋白25-35(beta amyloid peptides 25-35,Aβ_25-35)損傷的大鼠腎上腺髓質(zhì)嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞（rat pheochromocytoma cell,PC12）凋亡的保護(hù)作用,并探討其可能的作用機(jī)制。方法:（1）接種傳代培養(yǎng)PC12細(xì)胞。（2）將對數(shù)生長期的PC12細(xì)胞分為正常對照（Control）組、模型（Model）組以及6個濃度梯度的IRN組。其中IRN干預(yù)的各組先以不同濃度梯度的IRN作用于PC12細(xì)胞2h后,再與20μmol/L的Aβ_25-35共孵育24h。CCK-8（Cell Counting Kit-8,CCK-8）法檢測細(xì)胞存活率;結(jié)晶紫比色法測定細(xì)胞增殖率,篩選出3個IRN的干預(yù)濃度。（3）流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡率。（4）比色法檢測細(xì)胞丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）及谷胱甘肽過氧化物酶（glutathione peroxidase,G... 

【文章來源】：遵義醫(yī)科大學(xué)貴州省

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

不同濃度IRN對Aβ25-35處理的PC12細(xì)胞增殖率的影響（4×10）

02 04 06 0C o n t r o l M o d e l I R N - 5 I R N - 2 0 I R N - 8 0Celprolifera*#*圖 3 不同濃度 IRN 對 Aβ25-35處理的 PC12 細(xì)胞增殖率的影響Fig.3 The influence of different concentrations of IRN on Aβ25-35induced PC12 cellsproliferationNote:*P <0.05 vs Control group;#P<0.05 vs Model group3.3 Rhodamine123 熒光染色法檢測細(xì)胞線粒體膜電位如圖 4，在熒光倒置顯微鏡下觀察，Control 組 PC12 細(xì)胞熒光強(qiáng)度低，膜電位耗散量低。Model 組 PC12 細(xì)胞熒光增強(qiáng)，膜電位耗散量高。IRN 組干預(yù)后 PC12熒光強(qiáng)度減低，膜電位耗散量減低。

圖 5 不同濃度 IRN 對 Aβ25-35處理的 PC12 細(xì)胞內(nèi)活性氧水平（10×40）（標(biāo)尺= 20 μm）Fig.5 The alteration of intracellular ROS level on Aβ25-35induced PC12 cells（10×40）3.5 流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡率如表 3、圖 6 和圖 7 所示。與 Control 組比較，Model 組 PC12 細(xì)胞凋亡率升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。與 Model 組比較，IRN 組 PC12 細(xì)胞凋亡率下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。IRN 各組間比較，IRN-20 組細(xì)胞凋亡率降低最為明顯，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號：3609909