靈芝（Ganoderma lucidum）（Leyss.ex Fr.Krast）是一種珍貴的藥用真菌,具有廣泛的藥理活性。近年來(lái)人們對(duì)它深層發(fā)酵的產(chǎn)物如三萜類物質(zhì)、多糖和漆酶等做了很多相應(yīng)的研究。開(kāi)發(fā)和挖掘新的靈芝資源具有重要意義。作者在岳麓山考察并發(fā)現(xiàn)野生靈芝,采用組織分離法獲得了靈芝菌種,經(jīng)過(guò)18S菌種鑒定及構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(shù),初步鑒定該菌株為靈芝菌株;并采取液體發(fā)酵的方法,研究了發(fā)酵液中漆酶、三萜和多糖等幾種活性物質(zhì)的產(chǎn)量并對(duì)其進(jìn)行了初步應(yīng)用研究。主要研究?jī)?nèi)容及結(jié)果如下:1、麓山靈芝的菌種分離及鑒定:通過(guò)組織分離法獲得靈芝菌種,提取菌絲體的DNA進(jìn)行18S菌種鑒定,并用該菌株的18S序列與基因庫(kù)中相關(guān)18S序列構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(shù),發(fā)現(xiàn)麓山靈芝與基因庫(kù)中靈芝AY705969.1序列相似對(duì)99%,初步鑒定為松杉靈芝菌株,命名為麓山靈芝。2、麓山靈芝發(fā)酵菌絲體三萜類物質(zhì)研究:測(cè)定了基礎(chǔ)培養(yǎng)條件下該靈芝菌種深層發(fā)酵活性產(chǎn)物的產(chǎn)量,發(fā)現(xiàn)該菌株中性三萜含量遠(yuǎn)高于酸性三萜。通過(guò)靜置和震蕩培養(yǎng)確定了先震動(dòng)后靜置的培養(yǎng)方法更有利于三萜合成。然后通過(guò)改良培養(yǎng)基培養(yǎng),靈芝總?cè)�、中性三萜和酸性三萜產(chǎn)量分別為5... 

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖２．１分離得到的靈芝菌種

麓山靈芝的菌種鑒定及幾種活性產(chǎn)物的初步分析??２．４．２菌種ＩＴＳ測(cè)序??在進(jìn)行麓山靈芝菌種鑒定時(shí)，我們首先選用較常用的ＩＴＳ法，引物為ＩＴＳ通??用引物ＩＴＳ４和ＩＴＳ１，ＰＣＲ過(guò)后送測(cè)序公司測(cè)序結(jié)果發(fā)現(xiàn)在反測(cè)序時(shí)，分別在４１５??位點(diǎn)和１６０位點(diǎn)出現(xiàn)雙峰，因此判斷麓山靈芝可能發(fā)生基因突變，所以改用１８Ｓ??法來(lái)進(jìn)行鑒定。??￣：?￣?＂?：?￣￣ｉ．ｉ」４－１?＂ＪＴ！?￣?ｒ?￣?Ｔ￣￣＇?￣?￣＊？－－??＂＂＂＂－？?，＇＂＊．＇＇■＇

１１天的菌絲來(lái)測(cè)定發(fā)酵胞內(nèi)三萜的量。麩皮是一種相對(duì)來(lái)說(shuō)較為廉價(jià)和常見(jiàn)的物??質(zhì)，且含有多種微量元素和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。為了提高三萜的產(chǎn)量，根據(jù)文獻(xiàn)，我們首??先用麩皮替換土豆來(lái)進(jìn)行培養(yǎng)基優(yōu)化。由圖３ａ可以看出，在麩皮培養(yǎng)基培養(yǎng)條件??下，振蕩加靜置培養(yǎng)第十天三萜含量達(dá)到最高，與基礎(chǔ)培養(yǎng)基相比，該種靈芝總??三萜的含量增加了?９３％，中性三萜的含量增加了?８５．６％，而生物量和酸性三萜含??量卻沒(méi)有很大變化，這說(shuō)明我們發(fā)現(xiàn)的這株靈芝是一株高產(chǎn)中性三萜的靈芝。??１＾?Ｉ?１?Ｉ?Ｐ?Ｉ?１?１??ｒ＿?＿?＿?■?ｒ?■?■?■??：ｔ?■?■?■?■?Ｂ??先震蕩后靜置培養(yǎng)天數(shù)（Ｄ）?１先震蕩后靜置培養(yǎng)??２２??

【參考文獻(xiàn)】：
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