靈芝（Ganoderma lucidum）（Leyss.ex Fr.Krast）是一種珍貴的藥用真菌,具有廣泛的藥理活性。近年來人們對它深層發(fā)酵的產物如三萜類物質、多糖和漆酶等做了很多相應的研究。開發(fā)和挖掘新的靈芝資源具有重要意義。作者在岳麓山考察并發(fā)現(xiàn)野生靈芝,采用組織分離法獲得了靈芝菌種,經過18S菌種鑒定及構建系統(tǒng)發(fā)育樹,初步鑒定該菌株為靈芝菌株;并采取液體發(fā)酵的方法,研究了發(fā)酵液中漆酶、三萜和多糖等幾種活性物質的產量并對其進行了初步應用研究。主要研究內容及結果如下:1、麓山靈芝的菌種分離及鑒定:通過組織分離法獲得靈芝菌種,提取菌絲體的DNA進行18S菌種鑒定,并用該菌株的18S序列與基因庫中相關18S序列構建系統(tǒng)發(fā)育樹,發(fā)現(xiàn)麓山靈芝與基因庫中靈芝AY705969.1序列相似對99%,初步鑒定為松杉靈芝菌株,命名為麓山靈芝。2、麓山靈芝發(fā)酵菌絲體三萜類物質研究:測定了基礎培養(yǎng)條件下該靈芝菌種深層發(fā)酵活性產物的產量,發(fā)現(xiàn)該菌株中性三萜含量遠高于酸性三萜。通過靜置和震蕩培養(yǎng)確定了先震動后靜置的培養(yǎng)方法更有利于三萜合成。然后通過改良培養(yǎng)基培養(yǎng),靈芝總三萜、中性三萜和酸性三萜產量分別為5... 

【文章來源】：湖南大學湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２．１分離得到的靈芝菌種

麓山靈芝的菌種鑒定及幾種活性產物的初步分析??２．４．２菌種ＩＴＳ測序??在進行麓山靈芝菌種鑒定時，我們首先選用較常用的ＩＴＳ法，引物為ＩＴＳ通??用引物ＩＴＳ４和ＩＴＳ１，ＰＣＲ過后送測序公司測序結果發(fā)現(xiàn)在反測序時，分別在４１５??位點和１６０位點出現(xiàn)雙峰，因此判斷麓山靈芝可能發(fā)生基因突變，所以改用１８Ｓ??法來進行鑒定。??￣：?￣?＂?：?￣￣ｉ．ｉ」４－１?＂ＪＴ！?￣?ｒ?￣?Ｔ￣￣＇?￣?￣＊？－－??＂＂＂＂－？?，＇＂＊．＇＇■＇

１１天的菌絲來測定發(fā)酵胞內三萜的量。麩皮是一種相對來說較為廉價和常見的物??質，且含有多種微量元素和營養(yǎng)物質。為了提高三萜的產量，根據(jù)文獻，我們首??先用麩皮替換土豆來進行培養(yǎng)基優(yōu)化。由圖３ａ可以看出，在麩皮培養(yǎng)基培養(yǎng)條件??下，振蕩加靜置培養(yǎng)第十天三萜含量達到最高，與基礎培養(yǎng)基相比，該種靈芝總??三萜的含量增加了?９３％，中性三萜的含量增加了?８５．６％，而生物量和酸性三萜含??量卻沒有很大變化，這說明我們發(fā)現(xiàn)的這株靈芝是一株高產中性三萜的靈芝。??１＾?Ｉ?１?Ｉ?Ｐ?Ｉ?１?１??ｒ＿?＿?＿?■?ｒ?■?■?■??：ｔ?■?■?■?■?Ｂ??先震蕩后靜置培養(yǎng)天數(shù)（Ｄ）?１先震蕩后靜置培養(yǎng)??２２??

【參考文獻】：
期刊論文
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