目的:研究苓桂術甘湯中多糖的結構,包括單糖組成以及官能團檢測,并對其抗氧化能力進行評估,為體外生物測定法運用于苓桂術甘湯的質量評價提供基礎。方法:利用高效凝膠色譜對全方多糖分子量進行研究;進一步采用氣相色譜-質譜（GC-MS）柱前衍生化法及紅外光譜掃描分析全方多糖結構組成;采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）及羥基自由基測定全方粗多糖及精多糖的抗氧化能力。結果:全方多糖由單一峰組成,且相對分子質量為3 689 Da,主要由阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖、果糖組成,摩爾比為6. 85∶1. 00∶109. 21∶1. 04∶21. 82,其中葡萄糖和果糖為主要組成成分;紅外結果顯示聚糖結構中存在吡喃糖及糖醛酸,并且糖苷鍵存在2種立體異構（α-糖苷鍵及β-糖苷鍵）;抗氧化研究發(fā)現(xiàn)全方多糖有一定清除DPPH自由基及羥基自由基的能力,粗多糖的活性優(yōu)于精多糖。進一步采用LC-Q-TOF-MS對粗多糖中的其他成分進行定性分析,提示這與甘草中五環(huán)三萜類成分的吸附有關。結論:苓桂術甘湯中多糖及五環(huán)三萜類物質均是苓桂術甘湯抗氧化作用的物質基礎,利用體外生物測定法測定抗氧化活性可作為全面控制苓... 

【文章來源】：中國實驗方劑學雜志. 2020,26(16)北大核心CSCD

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【部分圖文】：

450～800 nm紫外吸收波長掃描結果比較

全方多糖經過三氟乙酸水解并衍生化后進樣，通過GC-MS分析并與NIST Mass Spectrometry Data Center提供的質譜數據庫進行匹配，初步鑒定出5種單糖衍生物，推測分別由阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖、果糖演變而成。進一步利用單糖對照品經過衍生化進樣，并進行保留時間的比對，確定各單糖衍生物的保留時間分別為16.03,21.93,22.22,22.78,28.92/29.18 min，與樣品各峰出峰時間一致。值得注意的是，果糖衍生化后出現(xiàn)2個峰，可能因為果糖與鹽酸羥胺反應的速度不及其在吡啶中異構化的速度，因此出現(xiàn)2個峰[24]。通過對照品濃度及峰面積計算得出樣品中所含各單糖的摩爾數，以甘露糖為參比，得到阿拉伯糖-甘露糖-葡萄糖-半乳糖-果糖的摩爾比為6.85∶1.00∶109.21∶1.04∶21.82，可見葡萄糖和果糖為主要的組成成分，而阿拉伯糖、甘露糖和半乳糖僅作為雜糖基團修飾在聚糖糖鏈上。見圖3,4。圖3 全方多糖衍生化樣品通過GC-MS得到的TIC

圖2 全方多糖樣品及葡聚糖對照品凝膠色譜全方精多糖的紅外掃描見圖5。1 638.88 cm-1代表由于氫鍵締合影響導致偏移的酰胺Ⅰ帶，表明存在羰基鍵的伸縮振動，同時在1329.34 cm-1處出現(xiàn)酰胺Ⅲ帶，表明存在碳氮鍵的伸縮振動，提示酰胺結構的存在，其響應強度在一定程度上可顯示精多糖中蛋白含量的高低。3 289.04 cm-1處的較強的寬條帶顯示多糖結構中O-H伸縮振動，不排除多糖樣品中水分帶來的影響。2 930.06 cm-1的小信號峰是指飽和烴基的C-H伸縮振動。峰1 026.84 cm-1由C-O結構的伸縮振動產生，再結合986.80cm-1證明樣品中存在吡喃糖[25]。另外818.17 cm-1及874.16 cm-1又提示糖與糖之間的糖苷鍵存在兩種立體異構（α-糖苷鍵及β-糖苷鍵）[26]。818.17 cm-1再結合條帶934.41 cm-1提示可能存在甘露糖[27]。1 428.73 cm-1處的條帶代表COO-的伸縮振動，提示結構中可能存在糖醛酸。1 218.68 cm-1為C-CO-C伸縮振動產生，可能受酮糖（果糖）結構的影響。

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號：3589346