目的:研究苓桂術(shù)甘湯中多糖的結(jié)構(gòu),包括單糖組成以及官能團(tuán)檢測(cè),并對(duì)其抗氧化能力進(jìn)行評(píng)估,為體外生物測(cè)定法運(yùn)用于苓桂術(shù)甘湯的質(zhì)量評(píng)價(jià)提供基礎(chǔ)。方法:利用高效凝膠色譜對(duì)全方多糖分子量進(jìn)行研究;進(jìn)一步采用氣相色譜-質(zhì)譜（GC-MS）柱前衍生化法及紅外光譜掃描分析全方多糖結(jié)構(gòu)組成;采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）及羥基自由基測(cè)定全方粗多糖及精多糖的抗氧化能力。結(jié)果:全方多糖由單一峰組成,且相對(duì)分子質(zhì)量為3 689 Da,主要由阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖、果糖組成,摩爾比為6. 85∶1. 00∶109. 21∶1. 04∶21. 82,其中葡萄糖和果糖為主要組成成分;紅外結(jié)果顯示聚糖結(jié)構(gòu)中存在吡喃糖及糖醛酸,并且糖苷鍵存在2種立體異構(gòu)（α-糖苷鍵及β-糖苷鍵）;抗氧化研究發(fā)現(xiàn)全方多糖有一定清除DPPH自由基及羥基自由基的能力,粗多糖的活性優(yōu)于精多糖。進(jìn)一步采用LC-Q-TOF-MS對(duì)粗多糖中的其他成分進(jìn)行定性分析,提示這與甘草中五環(huán)三萜類成分的吸附有關(guān)。結(jié)論:苓桂術(shù)甘湯中多糖及五環(huán)三萜類物質(zhì)均是苓桂術(shù)甘湯抗氧化作用的物質(zhì)基礎(chǔ),利用體外生物測(cè)定法測(cè)定抗氧化活性可作為全面控制苓... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志. 2020,26(16)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：8 頁(yè)

【部分圖文】：

450～800 nm紫外吸收波長(zhǎng)掃描結(jié)果比較

全方多糖經(jīng)過(guò)三氟乙酸水解并衍生化后進(jìn)樣，通過(guò)GC-MS分析并與NIST Mass Spectrometry Data Center提供的質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行匹配，初步鑒定出5種單糖衍生物，推測(cè)分別由阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖、果糖演變而成。進(jìn)一步利用單糖對(duì)照品經(jīng)過(guò)衍生化進(jìn)樣，并進(jìn)行保留時(shí)間的比對(duì)，確定各單糖衍生物的保留時(shí)間分別為16.03,21.93,22.22,22.78,28.92/29.18 min，與樣品各峰出峰時(shí)間一致。值得注意的是，果糖衍生化后出現(xiàn)2個(gè)峰，可能因?yàn)楣桥c鹽酸羥胺反應(yīng)的速度不及其在吡啶中異構(gòu)化的速度，因此出現(xiàn)2個(gè)峰[24]。通過(guò)對(duì)照品濃度及峰面積計(jì)算得出樣品中所含各單糖的摩爾數(shù)，以甘露糖為參比，得到阿拉伯糖-甘露糖-葡萄糖-半乳糖-果糖的摩爾比為6.85∶1.00∶109.21∶1.04∶21.82，可見(jiàn)葡萄糖和果糖為主要的組成成分，而阿拉伯糖、甘露糖和半乳糖僅作為雜糖基團(tuán)修飾在聚糖糖鏈上。見(jiàn)圖3,4。圖3 全方多糖衍生化樣品通過(guò)GC-MS得到的TIC

圖2 全方多糖樣品及葡聚糖對(duì)照品凝膠色譜全方精多糖的紅外掃描見(jiàn)圖5。1 638.88 cm-1代表由于氫鍵締合影響導(dǎo)致偏移的酰胺Ⅰ帶，表明存在羰基鍵的伸縮振動(dòng)，同時(shí)在1329.34 cm-1處出現(xiàn)酰胺Ⅲ帶，表明存在碳氮鍵的伸縮振動(dòng)，提示酰胺結(jié)構(gòu)的存在，其響應(yīng)強(qiáng)度在一定程度上可顯示精多糖中蛋白含量的高低。3 289.04 cm-1處的較強(qiáng)的寬條帶顯示多糖結(jié)構(gòu)中O-H伸縮振動(dòng)，不排除多糖樣品中水分帶來(lái)的影響。2 930.06 cm-1的小信號(hào)峰是指飽和烴基的C-H伸縮振動(dòng)。峰1 026.84 cm-1由C-O結(jié)構(gòu)的伸縮振動(dòng)產(chǎn)生，再結(jié)合986.80cm-1證明樣品中存在吡喃糖[25]。另外818.17 cm-1及874.16 cm-1又提示糖與糖之間的糖苷鍵存在兩種立體異構(gòu)（α-糖苷鍵及β-糖苷鍵）[26]。818.17 cm-1再結(jié)合條帶934.41 cm-1提示可能存在甘露糖[27]。1 428.73 cm-1處的條帶代表COO-的伸縮振動(dòng)，提示結(jié)構(gòu)中可能存在糖醛酸。1 218.68 cm-1為C-CO-C伸縮振動(dòng)產(chǎn)生，可能受酮糖（果糖）結(jié)構(gòu)的影響。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]經(jīng)典名方苓桂術(shù)甘湯的物質(zhì)基準(zhǔn)量值傳遞分析[J]. 劉冬涵,薛宇濤,羅菊元,梁軍,田灣灣,張琦,劉蕾蕾,張鈺明,杜守穎,白潔,陸洋,武慧超.  中國(guó)中藥雜志. 2019(24)
[2]纖維素酶和果膠酶提取對(duì)甘草渣多糖抗氧化和抗腫瘤性能的影響[J]. 李菀,胡月,李光霞,殷勝友,姚惠文.  食品工業(yè)科技. 2020(09)
[3]經(jīng)典名方苓桂術(shù)甘湯HPLC指紋圖譜的建立及3種成分含量測(cè)定[J]. 陳蒙,林龍飛,劉宇靈,王春民,李慧,楊宇杰.  中草藥. 2019(17)
[4]苓桂術(shù)甘湯藥理作用及其機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 陳君媚,周春祥.  中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志. 2019(14)
[5]苓桂術(shù)甘湯含藥血清對(duì)過(guò)氧化氫誘導(dǎo)的乳鼠原代心肌細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷及細(xì)胞凋亡的影響[J]. 丁婉雪,葛瑞瑞,黃金玲,周鵬,王靚,甘賢兵,施慧,范曉蕓.  安徽中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào). 2019(02)
[6]苓桂術(shù)甘湯加減聯(lián)合常規(guī)西藥治療慢性心力衰竭隨機(jī)對(duì)照臨床研究Meta分析[J]. 張洪源,劉悅,王洋,劉光輝,張哲,楊關(guān)林.  中醫(yī)雜志. 2019(06)
[7]不同產(chǎn)地紅棗多糖抗氧化性比較[J]. 李霄,馬向榮,溫俊峰,杜芳艷,李紅梅.  當(dāng)代化工. 2019(02)
[8]木槿花多糖的組成分析及抗氧化活性研究[J]. 金友權(quán),張四杰,錢正,張新鳳,斯金平.  中國(guó)中藥雜志. 2019(09)
[9]苓桂術(shù)甘湯在脾胃病治療中的應(yīng)用價(jià)值[J]. 路偉偉.  深圳中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2019(02)
[10]加味苓桂術(shù)甘湯治療冠心病無(wú)癥狀性心肌缺血的臨床研究[J]. 李曉曼,艾克榮.  中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志. 2018(20)

碩士論文
[1]硫磺熏蒸對(duì)白術(shù)藥材質(zhì)量的影響研究[D]. 孫學(xué).南京中醫(yī)藥大學(xué) 2017



本文編號(hào)：3589346