目的分離、鑒定黃精化學(xué)成分,并進(jìn)一步探討以活性為先導(dǎo)的化合物分離方法;結(jié)合藥理試驗(yàn)確定黃精中具有活性的物質(zhì),為黃精的資源開(kāi)發(fā)提供依據(jù)。方法1、對(duì)黃精含化學(xué)成分進(jìn)行系統(tǒng)分離,確定黃精所含的化合物組成。2、本文將細(xì)胞膜親和色譜技術(shù)和磁性微球技術(shù)結(jié)合,建立細(xì)胞膜磁性微球“垂釣”方法,用于分析中藥藥效物質(zhì),并以該方法為先導(dǎo)分離確定黃精中潛在的活性化學(xué)成分。3、采用活性試驗(yàn)對(duì)所分離獲得的化合物進(jìn)行研究,確定具有活性的化合物。結(jié)果:1、本文采用傳統(tǒng)的分離方法對(duì)黃精化學(xué)成分進(jìn)行了分離鑒定。共得到10個(gè)甾體皂苷類(lèi)成分,6個(gè)高異黃酮類(lèi)成分,1個(gè)生物堿類(lèi)成分,分別如下:（25R）-螺甾-5-烯-3β,17α-二醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基（1→4）-β-D-吡喃巖藻糖苷（1）,（25S）-螺甾-5-烯-3β,17α-二醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基（1→4）-β-D-吡喃巖藻糖苷（2）,（25R）-螺甾-5-烯-3β,17α-二醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基（1→2）-β-D-吡喃葡萄糖基（1→4）-β-D-吡喃巖藻糖苷（3）,（25S）-螺甾-5-烯-3β-醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基（1→... 

【文章來(lái)源】：天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

細(xì)胞膜磁性微球制備示意圖

天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文 二、細(xì)胞膜磁球色譜篩選黃精藥效物質(zhì)置于生化培養(yǎng)箱中，在 37℃條件下共同孵育 30min，磁力吸附去除上清液，加入 1mLPBS，振搖洗滌，收集最后一次洗滌液于管中。加入 1mL20%乙酸水溶液孵育，使細(xì)胞膜表面的靶點(diǎn)失活，釋放化合物，磁力吸附細(xì)胞膜磁性微球，棄去，上清液 4℃儲(chǔ)存，備用。分別對(duì)所制備樣品原液、各次 PBS 洗液，以及 20%乙酸解離液進(jìn)行測(cè)定分析。各樣品濃縮至干后，乙腈復(fù)溶，采用 HPLC/MS 測(cè)定。色譜條件：色譜柱：Aglient XDB 250*4.6 5μm；流動(dòng)相：乙腈：0.1%甲酸水=30:70；檢測(cè)波長(zhǎng) 230nm。

34 對(duì)照品色譜圖（A 對(duì)照品原液、B 對(duì)照品乙酸變性后樣液、C 空白、D 噬細(xì)胞細(xì)胞膜磁性微球色譜分析黃精活性成分固相萃取柱處理后的黃精提取液與該細(xì)胞膜磁性微球共同孵育，結(jié)合的成分，解離得到的解離液，測(cè)定結(jié)果如圖 2.4 所示。提取液多個(gè)色譜峰（圖 2.4A），經(jīng)細(xì)胞膜磁性微球“垂釣”后的解離液的譜峰明顯減少，只存在一個(gè)保留時(shí)間為 24.6min 的色譜峰（圖 2.


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