發(fā)布時(shí)間：2021-11-26 06:28

　　目的:本研究通過觀察人參皂苷Re對(duì)Aβ_25-35誘導(dǎo)的SH-SY5Y細(xì)胞損傷的影響,探索人參皂苷Re對(duì)神經(jīng)元的保護(hù)作用以及其可能的機(jī)制。方法:1、使用Aβ_25-35和人參皂苷Re處理SH-SY5Y細(xì)胞,CCK-8法檢測(cè)細(xì)胞活力,確定構(gòu)建AD細(xì)胞模型的Aβ_25-35的濃度、作用時(shí)間以及后續(xù)實(shí)驗(yàn)中人參皂苷Re的濃度。2、各組SH-SY5Y細(xì)胞給予Aβ_25-35和人參皂苷Re處理后,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡比率;Caspase活性檢測(cè)試劑盒對(duì)Caspase活性進(jìn)行檢測(cè)。3、流式細(xì)胞技術(shù)測(cè)定細(xì)胞內(nèi)ROS含量和線粒體膜電位;紫外分光光度法檢測(cè)ATP含量。分離SH-SY5Y細(xì)胞胞漿和線粒體,蛋白免疫印跡法檢測(cè)細(xì)胞色素C釋放、Bcl-2及Bax蛋白表達(dá)水平。4、各組SH-SY5Y細(xì)胞給予Aβ_25-35和人參皂苷Re處理后,分離細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì),蛋白免疫印跡法檢測(cè)目標(biāo)蛋白的表達(dá)水平和Nrf2細(xì)胞核轉(zhuǎn)移;TRIzol法提取細(xì)胞總RNA;熒光定量PCR法檢測(cè)目標(biāo)基因轉(zhuǎn)錄水平表達(dá)變化。結(jié)果:1、人參皂苷... 

【文章來源】：長春中醫(yī)藥大學(xué)吉林省

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

阿爾茨海默病致病示意圖

25-35誘導(dǎo)的細(xì)胞活力降低，且濃度為25uM時(shí)保護(hù)作用最明顯（P<0.0001），細(xì)胞活力增加43.51%（圖2）。圖2 不同濃度人參皂苷Re對(duì)Aβ25-35誘導(dǎo)的SH-SY5Y細(xì)胞毒性的保護(hù)作用（與空白對(duì)照組比較，****p<0.0001；與模型組比較，###p<0.001，####p<0.0001）3.2 人參皂苷 Re 對(duì) Aβ25-35誘導(dǎo)的 SH-SY5Y 細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用AnnexinⅤ-FITC/PI染色和流式細(xì)胞儀分析結(jié)果顯示，不同濃度人參皂苷Re處理細(xì)

25-35誘導(dǎo)的SH-SY5Y細(xì)胞相比，細(xì)胞凋亡率從25.88%降至10.23%，且當(dāng)人參皂苷Re濃度為25μM時(shí)作用效果最明顯，與前期研究結(jié)果相一致（圖3，圖4）。圖3 不同濃度人參皂苷Re對(duì)Aβ25-35誘導(dǎo)的SH-SY5Y細(xì)胞凋亡的影響圖4 不同濃度人參皂苷Re對(duì)Aβ25-35誘導(dǎo)的SH-SY5Y細(xì)胞凋亡程度統(tǒng)計(jì)圖（與空白對(duì)照組比較，****p<0.0001；與模型組比較，##p<0.01，###p<0.001）


本文編號(hào)：3519584