目的探討通痹七物方對痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎（Gouty Arthritis,GA）大鼠的防治作用及對NOD樣受體蛋白3（NOD-like receptor protein 3,NLRP3）炎癥小體、線粒體自噬蛋白的影響。方法將36只大鼠隨機(jī)分為空白對照組,模型組,秋水仙堿組,通痹七物方低、中、高劑量組,每組6只�？瞻讓φ战M、模型組給予同體積生理鹽水,秋水仙堿組給予秋水仙堿0.3 mg·kg-1水溶液,通痹七物方低、中、高劑量組分別給予通痹七物方濃縮配方顆粒800、1 600、3 200 mg·kg^-1水溶液。上述各組連續(xù)灌胃給藥7 d。第5天給藥后,除空白對照組外,其余各組大鼠右膝關(guān)節(jié)腔注射0.1 mL單鈉尿酸鹽（Monosodium urate,MSU）結(jié)晶溶液,進(jìn)行模型制備。以上各組在模型制備24 h、48 h后進(jìn)行步態(tài)評分,實(shí)驗(yàn)結(jié)束觀察病理組織形態(tài),檢測血清腫瘤壞死因子α（TNF-α）、白細(xì)胞介素6（IL-6）的含量,檢測NLRP3、半胱氨酸蛋白酶1（Caspase-1）、白細(xì)胞介素1β（IL-1β）、自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3B（Autophagy microtubul... 

【文章來源】：中藥新藥與臨床藥理. 2020,31(07)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

各組痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎大鼠滑膜NLRP3、Caspase-1、IL-1β蛋白表達(dá)

痛風(fēng)屬于中醫(yī)學(xué)“痹證”范疇，著名醫(yī)家朱良春冠以“濁瘀痹”病名。本病多由脾虛濕盛、瘀熱互結(jié)引起，脾虛為本，濕、瘀、熱為標(biāo)，病理上呈現(xiàn)濕瘀膠著反復(fù)的特點(diǎn)�；谏鲜霾C(jī)特點(diǎn)，我院逐步完善擬定通痹七物方，本方由川牛膝、生薏苡仁、木瓜、虎杖、忍冬藤、土茯苓、桃仁組成。方中薏苡仁、木瓜健脾利濕；虎杖、忍冬藤清熱通絡(luò)，土茯苓解毒祛濁，川牛膝、桃仁活血化瘀，川牛膝兼有引藥下行的作用�，F(xiàn)代藥理提示薏苡仁可調(diào)節(jié)嘌呤代謝、減少尿酸形成[18]；土茯苓、忍冬藤、川牛膝具有抗炎鎮(zhèn)痛，抑制黃嘌呤氧化酶而降低尿酸的作用[19-20]。全方共奏健脾化濕、祛瘀清熱之功，臨床上觀察該方具有降尿酸、止痛，減少復(fù)發(fā)等作用。本研究結(jié)果表明，模型組的步態(tài)評分明顯高于空白對照組，且部分大鼠出現(xiàn)典型的三足步態(tài)，而通痹七物方治療組步態(tài)評分都有不同程度的下降。同樣，在血清TNF-α、IL-6含量比較中，通痹七物方治療組也明顯低于模型組。在組織病理形態(tài)方面，模型組滑膜細(xì)胞出現(xiàn)增生、間質(zhì)高度水腫伴大量中性粒細(xì)胞浸潤；而通痹七物方干預(yù)組可見少量中性粒細(xì)胞浸潤，未見細(xì)胞壞死，間質(zhì)水腫也較輕。這些實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，通痹七物方對痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎有較好的治療作用。單鈉尿酸鹽作為損傷相關(guān)分子模式的一種可以激活NLRP3炎癥小體，為痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎發(fā)生的重要病理基礎(chǔ)[21]。NLRP3炎性體由NLRP3、ASC、半胱天冬酶活化募集結(jié)構(gòu)域（CARD）和Caspase-1組成[22]。細(xì)菌、真菌、病毒、單鈉尿酸鹽晶體、外源性ATP、二氧化硅晶體、焦磷酸鈣等可作為配體與NLRP3結(jié)合并活化NLRP3，導(dǎo)致NLRP3蛋白構(gòu)象改變，并通過ATP發(fā)生聚合反應(yīng)形成蛋白寡聚體[23]。在NLRP3效應(yīng)結(jié)構(gòu)域PYD,ASC和Caspase-1被招募，使NLRP3炎性體裝配完成后，Caspase-1前體自動催化為活性形式，并剪切pro-IL-1β為IL-1β，分泌到細(xì)胞外產(chǎn)生各種免疫反應(yīng)[24]�，F(xiàn)代研究[25]表明，體內(nèi)尿酸代謝失衡和血尿酸過飽和都可導(dǎo)致單鈉尿酸鹽晶體析出，并沉積于關(guān)節(jié)及軟骨組織。單鈉尿酸鹽晶體作為痛風(fēng)的內(nèi)源性危險(xiǎn)信號分子被免疫細(xì)胞吞噬后，可激活NLRP3炎性體信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，調(diào)控下游活性，從而最終介導(dǎo)痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎炎癥的發(fā)生[26]。本研究結(jié)果顯示，模型組比空白對照組的NLRP3、Caspase-1、IL-1β蛋白表達(dá)量明顯升高，提示單鈉尿酸鹽誘導(dǎo)后，痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎大鼠NLRP3炎癥小體發(fā)生組裝和活化，并使炎性因子IL-1β發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)。而與模型組相比，秋水仙堿組、通痹七物方低劑量組、通痹七物方中劑量組、通痹七物方高劑量組NLRP3、Caspase-1、IL-1β蛋白表達(dá)量有不同程度的減少，通痹七物方中劑量組變化明顯，可能與作用靶點(diǎn)的量效相關(guān)。

見表2。與空白對照組比較，模型組血清TNF-α、IL-6含量明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。與模型組比較，秋水仙堿組及通痹七物方低、中、高劑量組TNF-α、IL-6含量呈下降趨勢，除通痹七物方低劑量組的IL-6含量外，其余差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01,P<0.05）。2.4 通痹七物方對痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎大鼠滑膜炎癥小體蛋白NLRP3、Caspase-1、IL-1β表達(dá)的影響

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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