目的通過建立LPS誘導(dǎo)人肝癌HepG2細(xì)胞炎性反應(yīng)模型,探討珍珠梅黃酮納米粒（5,2’,4’-trihydroxy-6,7,5’-trimethoxy flavonenanoparticle,TTF1-NP）抗炎作用及作用機(jī)制。方法常規(guī)培養(yǎng)人肝癌HepG2細(xì)胞,采用MTT法檢測(cè)不同濃度的LPS（0.1 mg/L、1mg/L、10mg/L 和 100mg/L）作用不同時(shí)間（0h、12h、24h、48h和 72 h）對(duì)人肝癌HepG2細(xì)胞增殖作用,篩選LPS最佳誘導(dǎo)時(shí)間和劑量;采用MTT比色法檢測(cè)不同濃度的 TTF1-NP（5 μmol/L、10 μmol/L 和 20 μmol/L）對(duì) LPS（10 mg/L）誘導(dǎo)后人肝癌HepG2細(xì)胞增殖作用;采用western blot法檢測(cè)不同濃度TTF1-NP（5μmol/L、10 μmnol/L 和 20 μmol/L）對(duì) LPS（10 mg/L）誘導(dǎo)后人肝癌 HepG2 細(xì)胞促炎因子IL-6、IL-8和TLR4蛋白表達(dá)及對(duì)Akt/mTOR信號(hào)通路相關(guān)蛋白Akt、p-Akt、mTOR和p-mTOR表達(dá)的作用;加入AKT/mTOR通路活化劑ins... 

【文章來源】：延邊大學(xué)吉林省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：42 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１肝癌病例全球分布圖??

消炎鎮(zhèn)痛的作用。后經(jīng)學(xué)者研宄發(fā)現(xiàn)，珍珠梅提取物具有抗腫瘤作用，主要的抗腫??瘤成分是：５，２’，４’－三輕基－６，７，５’－三甲氧基黃酮（５，２’，４’々腳士〇：＾－６，７，５’４１＇丨１１＾１１〇父＞＾??ｆｌａｖｏｎｅｓ，?ＴＴＦ１），其化學(xué)式結(jié)構(gòu)見圖２?Ｂ。ＴＴＦ１能夠通過調(diào)控腫瘤新生血管形成??相關(guān)基因和蛋白的表達(dá)（如：血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子２型受體等），??抑制人肝癌ＨｅｐＧ２細(xì)胞誘導(dǎo)的雞胚絨毛尿囊膜血管生成，并通過誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋??亡抑制其增殖［５３＿５４］。??圖２珍珠梅及其活性單體??Ａ珍珠梅?Ｂ?ＴＴＦ１結(jié)構(gòu)式??為進(jìn)一步促進(jìn)ＴＴＦ１水溶性，增強(qiáng)其吸收效果，有學(xué)者用硬脂酸為載體，制備??了粒徑為２００?ｎｍ左右的５，?２’，４’－三羥基－６，７，５’－三甲氧基黃酮納米粒（５，??２’，４’－ｔｒｉｈｙｄｒｏｘｙ－６，７，５’－ｔｒｉｍｅｔｈｏｘｙｆｌａｖｏｎｅｓｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ，?ＴＴＦ１－ＮＰ）丨５５１。研究發(fā)現(xiàn)，??ＴＴＦ１－ＮＰ能夠通過調(diào)控ＳＴＡＴ３活性，抑制人肝癌細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移、誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞??凋亡［５６１，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激途徑是其主要作用途徑［５７］。??有學(xué)者研宄表明

０？４８?ｈ內(nèi)ＬＰＳ促人肝癌ＨｅｐＧ２細(xì)胞增殖具有時(shí)間依賴性。由于１０?ｍｇ／Ｌ?ＬＰＳ作用??４８?ｈ時(shí)人肝癌ＨｅｐＧ２細(xì)胞增殖最明顯，因此選擇１０?ｒａｇ／Ｌ?ＬＰＳ作用４８?ｈ為實(shí)驗(yàn)用??模型制備，如圖３。??一?１．５－１?—?１００ｍｇ／Ｌ??Ｅ?一?１０ｍｇ／Ｌ??ｃ?１?ｍｇ／Ｌ??Ｓ?１．０－?’?—?０．１?ｍｇ／Ｌ??詈?匕?—?ＮＴ??虧?０．５－??＞??Ｑ??Ｏ??ＱＱ?Ｊ?，?ｌ?ｌ?Ｉ??＾?＾??＜ｖ?ｒｆ?＾??圖３?ＬＰＳ促進(jìn)人肝癌ＨｅｐＧ２細(xì)胞增殖結(jié)果??４．２?ＴＴＦ１－ＮＰ對(duì)人肝癌ＨｅｐＧ２細(xì)胞増殖作用結(jié)果??ＬＰＳ（１０ｍｇ／Ｌ）刺激人肝癌ＨｅｐＧ２細(xì)胞，同時(shí)加入不同濃度ＴＴＦ１－ＮＰ，檢測(cè)發(fā)??現(xiàn)不同濃度ＴＴＦ１－ＮＰ均能夠抑制ＬＰＳ刺激后人肝癌ＨｅｐＧ２細(xì)胞增殖，細(xì)胞增殖抑??制率分別為：１７．６±２．４、４４．３±４．８和５７．８±３．３，其抑制增殖作用具有濃度依賴性，如??圖４。??１４??

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號(hào)：3503440