大黃素對腦缺血再灌注損傷大鼠的保護作用及機制研究
發(fā)布時間:2021-11-17 01:06
目的本課題研究大黃素對MCAO模型大鼠的神經(jīng)保護作用,并且討論大黃素調(diào)控PTEN/PI3K/AKT通路對缺血性腦卒中大鼠神經(jīng)保護作用的影響,從分子生物學的層面探索大黃素腦保護作用的部分機理。方法(1)健康成年雄性SD大鼠60只,適應(yīng)性喂養(yǎng)1周,隨機分為假手術(shù)組(sham組)20只和造模組40只;造模組采用線栓法制作大鼠大腦中動脈梗塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,2h后再灌注,即為MCAO模型大鼠;造模成功后,抽簽法隨機分為MCAO模型對照組(MCAO組)20只、大黃素給藥組(MCAO+Emodin組)20只。于造模lh后,對sham組和MCAO組大鼠灌胃0.5%羧甲基纖維素鈉溶液(10ml · kg-1 · d-1),MCAO+Emodin組灌胃大黃素混懸液50mg · k-1 ·d-1(用0.5%羧甲基纖維素鈉溶液配制),連續(xù)給藥7d。Zea-Longa法對大鼠神經(jīng)功能損傷評分;焦油紫染色法對神經(jīng)細胞尼氏(Nissl)小體染色;RT-qPCR技術(shù)檢測大鼠缺血側(cè)腦組織炎癥細胞因子mRNA表達水平;Western blot技術(shù)檢測大鼠...
【文章來源】:福建中醫(yī)藥大學福建省
【文章頁數(shù)】:70 頁
【學位級別】:博士
【部分圖文】:
圖1:大黃素在MCAO模型大鼠調(diào)控PTEVPI3K/AKT信號途徑及抗炎作用的理論假??設(shè).加粗箭頭表示大黃素作用的方向
2.1大鼠大腦中動脈阻塞再灌注(MCAO)模型制作??大腦中腦動脈閉塞(MCAO)模型是目前研宄局灶性腦缺血/再灌注損傷的經(jīng)典模??型,本實驗大鼠MCAO模型制備方法如下圖1-1所示:??16??
?福建中醫(yī)藥大學博士學位論文霉素的RPMI1640培養(yǎng)液,每2天置換一半新鮮培養(yǎng)液,分別用LPS(100ng/mL)誘導,加入大黃素(lO^M),培養(yǎng)48小時。??2.9.3大黃素對巨噬細胞IL-6濃度的影響??(1)人外周血單核細胞(PBMC)分離與巨噬細胞培養(yǎng)、誘導和處理??取正常志愿者靜脈血5ml,肝素抗凝。采用Hcoll-Hypaque?(又稱淋巴細胞分層液)??密度梯度離心法分離PBMC。??Ficoll-Hypaque?比重:1.077±0.001??RBC和中性粒的比重:約1.09??PBMC的比重:約1.075??
【參考文獻】:
期刊論文
[1]紅景天苷對腦缺血再灌注大鼠炎性細胞因子表達的影響[J]. 魏藝聰,洪海棉,應(yīng)雄,陳建雄,張小琴,洪桂祝. 福建中醫(yī)藥. 2016(06)
[2]人參皂苷Rb1對阿爾茨海默病模型鼠海馬區(qū)神經(jīng)元NeuN表達的影響[J]. 于小琪,向君. 廣東醫(yī)學. 2013(09)
[3]GAP-43治療大鼠脊髓橫斷后神經(jīng)中絲NF200表達的變化[J]. 段艷萍,王金德,黃佑慶,戰(zhàn)雅,賀云,巴迎春. 神經(jīng)解剖學雜志. 2008(04)
[4]論通腑瀉熱化瘀法是腦血管病急性期的基本治法[J]. 何建成,陳汝興. 中國中醫(yī)急癥. 2001(06)
博士論文
[1]紅景天苷對腦缺血再灌注損傷大鼠的保護作用及機制研究[D]. 賴文芳.福建中醫(yī)藥大學 2016
碩士論文
[1]基于PTEN/PI3K/PKB通路的大黃素抑制脂肪細胞炎癥反應(yīng)的研究[D]. 田雪.福建中醫(yī)藥大學 2015
本文編號:3499922
【文章來源】:福建中醫(yī)藥大學福建省
【文章頁數(shù)】:70 頁
【學位級別】:博士
【部分圖文】:
圖1:大黃素在MCAO模型大鼠調(diào)控PTEVPI3K/AKT信號途徑及抗炎作用的理論假??設(shè).加粗箭頭表示大黃素作用的方向
2.1大鼠大腦中動脈阻塞再灌注(MCAO)模型制作??大腦中腦動脈閉塞(MCAO)模型是目前研宄局灶性腦缺血/再灌注損傷的經(jīng)典模??型,本實驗大鼠MCAO模型制備方法如下圖1-1所示:??16??
?福建中醫(yī)藥大學博士學位論文霉素的RPMI1640培養(yǎng)液,每2天置換一半新鮮培養(yǎng)液,分別用LPS(100ng/mL)誘導,加入大黃素(lO^M),培養(yǎng)48小時。??2.9.3大黃素對巨噬細胞IL-6濃度的影響??(1)人外周血單核細胞(PBMC)分離與巨噬細胞培養(yǎng)、誘導和處理??取正常志愿者靜脈血5ml,肝素抗凝。采用Hcoll-Hypaque?(又稱淋巴細胞分層液)??密度梯度離心法分離PBMC。??Ficoll-Hypaque?比重:1.077±0.001??RBC和中性粒的比重:約1.09??PBMC的比重:約1.075??
【參考文獻】:
期刊論文
[1]紅景天苷對腦缺血再灌注大鼠炎性細胞因子表達的影響[J]. 魏藝聰,洪海棉,應(yīng)雄,陳建雄,張小琴,洪桂祝. 福建中醫(yī)藥. 2016(06)
[2]人參皂苷Rb1對阿爾茨海默病模型鼠海馬區(qū)神經(jīng)元NeuN表達的影響[J]. 于小琪,向君. 廣東醫(yī)學. 2013(09)
[3]GAP-43治療大鼠脊髓橫斷后神經(jīng)中絲NF200表達的變化[J]. 段艷萍,王金德,黃佑慶,戰(zhàn)雅,賀云,巴迎春. 神經(jīng)解剖學雜志. 2008(04)
[4]論通腑瀉熱化瘀法是腦血管病急性期的基本治法[J]. 何建成,陳汝興. 中國中醫(yī)急癥. 2001(06)
博士論文
[1]紅景天苷對腦缺血再灌注損傷大鼠的保護作用及機制研究[D]. 賴文芳.福建中醫(yī)藥大學 2016
碩士論文
[1]基于PTEN/PI3K/PKB通路的大黃素抑制脂肪細胞炎癥反應(yīng)的研究[D]. 田雪.福建中醫(yī)藥大學 2015
本文編號:3499922
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