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蛇床子素及多吡啶釕,銥配合物抗腫瘤活性研究

發(fā)布時間:2021-11-11 22:31
  目前,惡性腫瘤的治療依然是世界上一大醫(yī)學(xué)難題,隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展,科學(xué)家們不斷的尋求新的抗腫瘤藥物,深入研究其抗腫瘤機制,為人類戰(zhàn)勝惡性腫瘤而不斷努力。我國中醫(yī)藥具有深厚的歷史,以其低毒,溫和的藥性而備受矚目,在新時代的今天,借助新的科學(xué)方法與技術(shù)開發(fā)出傳統(tǒng)中藥新的藥理性質(zhì),成為了一項熱點,蛇床子素作為傳統(tǒng)中藥具有多種療效,并在新的研究中發(fā)現(xiàn)其獨特的抗腫瘤功效,但是機制尚未完全清楚,因此本文對蛇床子素在胃癌細胞SGC-7901上的抗腫瘤作用機制進行研究。同時,在多樣化的抗腫瘤藥物的探索中,金屬配合物占據(jù)著一個極其重要的位置,并有著許多突破性的進展,但是其應(yīng)用上仍具有局限性,因此開發(fā)出具有靶向性,高效低毒的金屬配合物抗癌藥物仍然需要我們繼續(xù)努力,本論文因此合成了兩個新的銥(Ⅲ)配合物和一個系列的釕(Ⅱ)配合物,并對其抗腫瘤機制進行研究與討論。在本論文研究的抗腫瘤藥物中,蛇床子素為中藥單體。釕(Ⅱ)、銥(Ⅲ)配合物是由實驗室設(shè)計合成和純化,并通過質(zhì)譜、紅外、核磁的分析手段進行表征。本論文主要從體外細胞毒性、細胞凋亡、活性氧水平、線粒體膜電位變化、DNA損傷、細胞周期分布、侵襲作用、自噬和凋... 

【文章來源】:廣東藥科大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】:104 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
縮略語
第一章 緒論
    1.1 引言
    1.2 蛇床子素及釕,銥金屬配合物的抗腫瘤研究進展
        1.2.1 蛇床子素的抗腫瘤活性研究進展
        1.2.2 釕金屬配合物的抗腫瘤活性研究進展
        1.2.3 銥金屬配合物的抗腫瘤活性研究進展
    1.3 蛇床子素及釕,銥金屬配合物的抗腫瘤研究方法
        1.3.1 細胞凋亡的含義
        1.3.2 體外細胞毒性實驗
        1.3.3 細胞凋亡形態(tài)學(xué)變化檢測
        1.3.4 細胞內(nèi)吞和定位檢測
        1.3.5 Annexin-V/PI雙染法
        1.3.6 JC-1檢測線粒體膜電位
        1.3.7 DCFH-DA檢測ROS(活性氧)
        1.3.8 Flow Cytometry檢測細胞周期
        1.3.9 單細胞凝膠電泳(SCGE)
        1.3.10 Western blot免疫印跡法
        1.3.11 細胞侵襲實驗
        1.3.12 自噬
    1.4 選題意義及研究展望
    參考文獻
第二章 蛇床子素的體外抗腫瘤活性研究
    2.1 引言
    2.2 實驗材料
        2.2.1 實驗試劑
        2.2.2 實驗儀器
    2.3 Osthole抗腫瘤活性研究
        2.3.1 常用溶液的配置
        2.3.2 細胞培養(yǎng)
        2.3.3 細胞毒性實驗
        2.3.4 AO/EB雙熒光染色法
        2.3.5 流式細胞儀檢測細胞凋亡
        2.3.6 單細胞凝膠電泳實驗
        2.3.7 內(nèi)吞實驗
        2.3.8 ROS的檢測
        2.3.9 線粒體膜電位檢測
        2.3.10 細胞周期的測定
        2.3.11 白噬實驗
        2.3.12 Transwell侵襲實驗
        2.3.13 免疫印跡實驗(Western Blot)
    2.4 實驗結(jié)果與討論
        2.4.1 體外細胞毒性
        2.4.2 AO/EB染色
        2.4.3 流式檢測細胞凋亡
        2.4.4 彗星電泳結(jié)果分析
        2.4.5 細胞內(nèi)吞實驗
        2.4.6 線粒體膜電位結(jié)果分析
        2.4.7 活性氧含量分析
        2.4.8 Western Blot結(jié)果
        2.4.9 流式細胞周期結(jié)果分析
        2.4.10 自噬AO染色及LC3蛋白表達
        2.4.11 transwell侵襲實驗結(jié)果分析
    2.5 小結(jié)
    參考文獻
第三章 具有抗腫瘤活性銥(Ⅲ)配合物合成及其機制研究
    3.1 引言
    3.2 實驗材料
        3.2.1 實驗試劑
        3.2.2 實驗儀器
    3.3 配合物的合成
        3.3.1 配體及配合物合成路線
        3.3.2 1,10-鄰菲羅啉-5,6-二酮的合成
        3.3.3 配體BTCP的合成與表征
        3.3.4 Cis-[Ir(ppy)_2Cl_2]_2的合成
        3.3.5 [Ir(ppy)_2(BTCP)]PF_6(Ir-1)的合成
    3.4 配合物抗腫瘤活性的檢測方法
        3.4.1 Hochest 33258熒光染色法
        3.4.2 自噬實驗
    3.5 實驗結(jié)果與討論
        3.5.1 體外細胞毒性
        3.5.2 AO/EB和Hoechst 3325染色結(jié)果分析
        3.5.3 Annexin V/PI雙染法檢測細胞凋亡
        3.5.4 內(nèi)吞實驗
        3.5.5 DNA損傷實驗結(jié)果
        3.5.6 線粒體膜電位檢測及線粒體定位
        3.5.7 ROS檢測結(jié)果
        3.5.8 Western Blot結(jié)果
        3.5.9 細胞周期檢測
        3.5.10 自噬檢測結(jié)果
        3.5.11 Transwell侵襲實驗
    3.6 小結(jié)
    參考文獻
第四章 具有光活性的銥(Ⅲ)配合物的合成及其抗腫瘤活性研究
    4.1 引言
    4.2 實驗材料
        4.2.1 實驗試劑
        4.2.2 實驗儀器
    4.3 配合物的合成
        4.3.1 配體及配合物合成路線
        4.3.2 配體FBPIP的合成與表征
        4.3.3 [Ir(ppy)_2(FBPIP)]PF_6(Ir-1)的合成
    4.4 配合物抗腫瘤活性的檢測方法
    4.5 實驗結(jié)果與討論
        4.5.1 體外細胞毒性
        4.5.2 細胞凋亡檢測
        4.5.3 ROS結(jié)果分析
        4.5.4 線粒體膜電位結(jié)果分析
        4.5.5 細胞侵襲實驗
        4.5.6 細胞自噬檢測結(jié)果
        4.5.7 細胞周期檢測
        4.5.8 凋亡蛋白表達
    4.6 小結(jié)
    參考文獻
第五章 多吡啶釕(Ⅱ)配合物合成及其抗腫瘤活性研究
    5.1 引言
    5.2 實驗材料
        5.2.1 實驗試劑
        5.2.2 實驗儀器
    5.3 配合物的合成
        5.3.1 配體及配合物合成路線
        5.3.2 配體BTCP的合成與表征
        5.3.3 Cis-[Ru(dmb)_2Cl_2]·2H_2O的合成
        5.3.4 Cis-[Ru(bpy)_2Cl_2]·2H_2O的合成
        5.3.5 Cis-[Ru(ttbpy)_2Cl_2]·2H_2O的合成
        5.3.6 Cis-[Ru(phen)_2Cl_2]·2H_2O的合成
        5.3.7 Cis-[Ru(dmp)_2Cl_2]·2H_2O的合成
        5.3.8 [Ru(dmb)_2(BTCP)](PF_6)_2(1)的合成
        5.3.9 [Ru(bpy)_2(BTCP)](PF_6)_2(2)的合成
        5.3.10 [Ru(ttbpy)_2(BTCP)](PF_6)_2(3)的合成
        5.3.11 [Ru(phen)_2(BTCP)](PF_6)_2(4)的合成
        5.3.12 [Ru(dmp)_2(BTCP)](PF_6)_2(5)的合成
    5.4 實驗結(jié)果與討論
        5.4.1 體外細胞毒性
        5.4.2 AO/EB染色實驗
        5.4.3 流式細胞儀凋亡檢測
        5.4.4 ROS檢測
        5.4.5 線粒體膜電位檢測
        5.4.6 細胞周期檢測
        5.4.7 細胞侵襲實驗
        5.4.8 Western Blot實驗分析
    5.5 小結(jié)
    參考文獻
總結(jié)
碩士期間發(fā)表學(xué)術(shù)論文情況
致謝


【參考文獻】:
期刊論文
[1]蛇床子素誘導(dǎo)HeLa細胞凋亡的作用機制研究[J]. 趙曉娟.  中國醫(yī)藥導(dǎo)報. 2016(12)
[2]蛇床子素抑制膀胱癌細胞生長和侵襲的機制[J]. 劉軍,徐冉,趙曉昆.  中南大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2016(04)
[3]蛇床子素通過抑制PI3K/AKT信號通路誘導(dǎo)K562細胞凋亡和增殖抑制[J]. 潘莉萍,郭靜明,袁偉.  臨床血液學(xué)雜志. 2016(02)
[4]抗腫瘤靶向藥物研究現(xiàn)狀[J]. 權(quán)修權(quán),樸惠順,康琳,尹學(xué)哲,高鐘鎬.  中國藥理學(xué)通報. 2015(05)
[5]腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機制研究進展[J]. 伊日貴,徐曉艷,李時榮.  中華實用診斷與治療雜志. 2014(10)
[6]鉑類藥物化療處方分析[J]. 楊康,武星.  中國醫(yī)藥導(dǎo)刊. 2014(09)
[7]中國癌癥流行病學(xué)與防治研究現(xiàn)狀[J]. 曾紅梅,陳萬青.  化學(xué)進展. 2013(09)
[8]蛇床子素藥理作用及其相關(guān)機制研究進展[J]. 張曉平,陳新梅,崔清華,田景振.  中國執(zhí)業(yè)藥師. 2013(11)
[9]小分子銥配合物及其電致發(fā)光[J]. 廖章金,朱彤珺,密保秀,高志強,范曲立,黃維.  化學(xué)進展. 2011(08)
[10]蛇床子化學(xué)及藥理研究進展[J]. 汪文來,于智敏,鞠大宏,張立石,王震,楊立新,趙紅霞.  中國中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志. 2011(06)

碩士論文
[1]吳茱萸堿誘導(dǎo)人肝癌細胞HepG2細胞周期阻滯機制研究[D]. 劉溪.哈爾濱商業(yè)大學(xué) 2012



本文編號:3489654

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