芍藥苷調控LXRs-STAT3信號通路改善肝纖維化進程的研究
發(fā)布時間：2021-11-01 05:33
目的:研究顯示芍藥苷（Paeoniflorin,PAE）具有較好的肝保護作用;本研究體外擬用TGF-β刺激的HSCs細胞、體內(nèi)以腹腔注射硫代乙酰胺（TAA）的Balb/c小鼠為研究對象,建立肝纖維化模型,探究芍藥苷通過LXRs-STAT3信號通路,對肝纖維化的調控改善作用及其潛在的分子機制。方法:體外實驗選用HSCs細胞,TGF-β刺激后,給予0-200μM的芍藥苷處理24h,通過MTT法檢測芍藥苷對HSCs細胞存活率的影響。利用濃度（0、6.25、12.5、25、50、100μM）的芍藥苷孵育HSCs,24h后,提取細胞總蛋白進行蛋白印跡分析實驗,檢測HSCs細胞中LXRα、LXRβ、STAT3等蛋白的表達水平;并提取RNA,通過PCR定量分析,檢測mRNA的表達水平,以及免疫熒光染色做進一步驗證。體內(nèi)將小鼠隨機分四組,即正常組、TAA模型組、芍藥苷低劑量（10mg/kg）、高劑量（20mg/kg）給藥組,每組5只。正常組采用標準飲食;TAA模型組及芍藥苷給藥組腹腔注射TAA（100或200mg/kg）,以建立小鼠肝纖維化模型;給藥組每天灌胃芍藥苷1Omg/kg或20mg/kg,實驗...
【文章來源】：延邊大學吉林省 211工程院校
【文章頁數(shù)】：45 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
圖２?ＰＡＥ對活化的ＨＳＣｓ細胞中肝Ｘ受體的調控
介導炎癥反應。在活化狀態(tài)的ＨＳＣｓ細胞中，當ＬＸＲｓ被激活后，會釋放腺嘌呤??核苷三磷酸（ＡＴＰ），ＡＴＰ作用于嘌呤能受體Ｐ２Ｘ７ｒ，從而影響ＮＬＲＰ３炎性小??體的表達；如圖３Ａ和Ｂ所示，在活化的ＨＳＣｓ細胞中，ＡＴＰ與Ｐ２Ｘ７ｒ結合后，??模型組Ｐ２Ｘ７ｒ的蛋白及ｍＲＮＡ大量表達，并誘導了?ＮＬＲＰ３活化的增強，使ＮＬＲＰ３??炎性小體蛋白及ｍＲＮＡ含量過表達，ＰＡＥ孵育后，有效的抑制了?Ｐ２Ｘ７ｒ及ＮＬＲＰ３??的蛋白過表達現(xiàn)象，ｍＲＮＡ表達水平在濃度５０ｐＭ時亦產(chǎn)生了顯著性差異，阻止??ＮＬＲＰ３炎性小體的進一步活化，說明ＰＡＥ可能通過調控代謝產(chǎn)物ＡＴＰ與Ｐ２Ｘ７ｒ??１４??
３．５?ＰＡＥ對活化的ＨＳＣｓ細胞中ＳＴＡＴ３信號相關轉導通路的影響??ＨＳＣｓ被激活后，會誘發(fā)促炎細胞因子的釋放，而多功能細胞因子ＩＬ－６，與??肝纖維化密切相關，如圖５Ａ和Ｂ所示，在僅ＴＧＦ－Ｐ刺激活化的ＨＳＣｓ中，ＩＬ－６??與其相應受體結合后，其表達微弱，給予ＰＡＥ后，明顯上調了其蛋白及ｍＲＮＡ??的表達；ＳＴＡＴ３作為ＩＬ－６下游的重要效應物，被激活并產(chǎn)生磷酸化修飾，僅ＴＧＦ－Ｐ??刺激后，Ｐ－ＳＴＡＴ３的活化度降低，隨著ＰＡＥ給藥濃度的提高，Ｐ－ＳＴＡＴ３的蛋白??表達逐漸升高，活化增強，產(chǎn)生保護性細胞因子，阻止肝纖維化的發(fā)生；而ＳＯＣＳ３??作為ＳＴＡＴ３的負反饋調節(jié)因子，當ＳＴＡＴ３信號因子激活后，ＳＯＣＳ３與ＳＴＡＴ３??彼此產(chǎn)生競爭作用，僅ＴＧＦ－ｐ刺激的ＨＳＣｓ中ＳＯＣＳ３蛋白過表達，ＰＡＥ作用后，??活化的ＳＴＡＴ３可競爭性地抑制ＳＯＣＳ３的蛋白表達水平，與ＳＴＡＴ３形成了負反??饋作用效果
【參考文獻】：
期刊論文
[1]淺析肝纖維化治療現(xiàn)狀[J]. 陳永平. 現(xiàn)代實用醫(yī)學. 2018(03)
[2]肝X受體與炎癥相關疾病關系的研究進展[J]. 高碧聰,陳泉,孫婷,王德明,肖繼. 生理學報. 2018(03)
[3]芍藥苷通過抑制NF-κB通路減輕MRL/lpr狼瘡小鼠肝損傷[J]. 謝長好,吳冰冰,席進,王銳,張晨,李楊磊,白善旺,張佳佳,沈桐,唐笑妍,王元元. 細胞與分子免疫學雜志. 2017(11)
[4]STAT與肝纖維化[J]. 王婧帆,陳金鈴. 南通大學學報(醫(yī)學版). 2017(03)
[5]芍藥苷減輕LPS致小鼠急性腦損傷的抗炎機制[J]. 劉玲,李瑞芳,王等,楊雪梅,趙月. 中藥材. 2016(02)
[6]SOCS3結構和作用機制研究進展[J]. 牛麗娜,陳顯久. 現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學. 2014(11)
[7]扶正化瘀膠囊/片治療肝纖維化和肝硬化的臨床研究進展[J]. 趙長青,徐列明. 世界中醫(yī)藥. 2014(05)
[8]STAT3在肝癌中發(fā)揮致癌和抑癌雙重作用[J]. 王嘉興,邱雙健. 肝臟. 2012(01)
[9]AST/ALT比值與肝硬化的相關性探討[J]. 金宇,胡宏章. 熱帶醫(yī)學雜志. 2011(10)
[10]復方鱉甲軟肝片抗肝纖維化機制的臨床病理研究[J]. 周光德,李文淑,趙景民,孫艷玲,潘登,楊建法,郭順根,張玲霞,陳菊梅. 解放軍醫(yī)學雜志. 2004(07)
本文編號：3469595
【文章來源】：延邊大學吉林省 211工程院校
【文章頁數(shù)】：45 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
圖２?ＰＡＥ對活化的ＨＳＣｓ細胞中肝Ｘ受體的調控
介導炎癥反應。在活化狀態(tài)的ＨＳＣｓ細胞中，當ＬＸＲｓ被激活后，會釋放腺嘌呤??核苷三磷酸（ＡＴＰ），ＡＴＰ作用于嘌呤能受體Ｐ２Ｘ７ｒ，從而影響ＮＬＲＰ３炎性小??體的表達；如圖３Ａ和Ｂ所示，在活化的ＨＳＣｓ細胞中，ＡＴＰ與Ｐ２Ｘ７ｒ結合后，??模型組Ｐ２Ｘ７ｒ的蛋白及ｍＲＮＡ大量表達，并誘導了?ＮＬＲＰ３活化的增強，使ＮＬＲＰ３??炎性小體蛋白及ｍＲＮＡ含量過表達，ＰＡＥ孵育后，有效的抑制了?Ｐ２Ｘ７ｒ及ＮＬＲＰ３??的蛋白過表達現(xiàn)象，ｍＲＮＡ表達水平在濃度５０ｐＭ時亦產(chǎn)生了顯著性差異，阻止??ＮＬＲＰ３炎性小體的進一步活化，說明ＰＡＥ可能通過調控代謝產(chǎn)物ＡＴＰ與Ｐ２Ｘ７ｒ??１４??
３．５?ＰＡＥ對活化的ＨＳＣｓ細胞中ＳＴＡＴ３信號相關轉導通路的影響??ＨＳＣｓ被激活后，會誘發(fā)促炎細胞因子的釋放，而多功能細胞因子ＩＬ－６，與??肝纖維化密切相關，如圖５Ａ和Ｂ所示，在僅ＴＧＦ－Ｐ刺激活化的ＨＳＣｓ中，ＩＬ－６??與其相應受體結合后，其表達微弱，給予ＰＡＥ后，明顯上調了其蛋白及ｍＲＮＡ??的表達；ＳＴＡＴ３作為ＩＬ－６下游的重要效應物，被激活并產(chǎn)生磷酸化修飾，僅ＴＧＦ－Ｐ??刺激后，Ｐ－ＳＴＡＴ３的活化度降低，隨著ＰＡＥ給藥濃度的提高，Ｐ－ＳＴＡＴ３的蛋白??表達逐漸升高，活化增強，產(chǎn)生保護性細胞因子，阻止肝纖維化的發(fā)生；而ＳＯＣＳ３??作為ＳＴＡＴ３的負反饋調節(jié)因子，當ＳＴＡＴ３信號因子激活后，ＳＯＣＳ３與ＳＴＡＴ３??彼此產(chǎn)生競爭作用，僅ＴＧＦ－ｐ刺激的ＨＳＣｓ中ＳＯＣＳ３蛋白過表達，ＰＡＥ作用后，??活化的ＳＴＡＴ３可競爭性地抑制ＳＯＣＳ３的蛋白表達水平，與ＳＴＡＴ３形成了負反??饋作用效果
【參考文獻】：
期刊論文
[1]淺析肝纖維化治療現(xiàn)狀[J]. 陳永平. 現(xiàn)代實用醫(yī)學. 2018(03)
[2]肝X受體與炎癥相關疾病關系的研究進展[J]. 高碧聰,陳泉,孫婷,王德明,肖繼. 生理學報. 2018(03)
[3]芍藥苷通過抑制NF-κB通路減輕MRL/lpr狼瘡小鼠肝損傷[J]. 謝長好,吳冰冰,席進,王銳,張晨,李楊磊,白善旺,張佳佳,沈桐,唐笑妍,王元元. 細胞與分子免疫學雜志. 2017(11)
[4]STAT與肝纖維化[J]. 王婧帆,陳金鈴. 南通大學學報(醫(yī)學版). 2017(03)
[5]芍藥苷減輕LPS致小鼠急性腦損傷的抗炎機制[J]. 劉玲,李瑞芳,王等,楊雪梅,趙月. 中藥材. 2016(02)
[6]SOCS3結構和作用機制研究進展[J]. 牛麗娜,陳顯久. 現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學. 2014(11)
[7]扶正化瘀膠囊/片治療肝纖維化和肝硬化的臨床研究進展[J]. 趙長青,徐列明. 世界中醫(yī)藥. 2014(05)
[8]STAT3在肝癌中發(fā)揮致癌和抑癌雙重作用[J]. 王嘉興,邱雙健. 肝臟. 2012(01)
[9]AST/ALT比值與肝硬化的相關性探討[J]. 金宇,胡宏章. 熱帶醫(yī)學雜志. 2011(10)
[10]復方鱉甲軟肝片抗肝纖維化機制的臨床病理研究[J]. 周光德,李文淑,趙景民,孫艷玲,潘登,楊建法,郭順根,張玲霞,陳菊梅. 解放軍醫(yī)學雜志. 2004(07)
本文編號：3469595
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