夏枯草果實(shí)的成分分析及其抗炎抗氧化活性研究
發(fā)布時(shí)間:2021-10-30 19:50
目的:夏枯草為唇形科植物夏枯草(Prunella vulgaris L.)的干燥果穗,味苦、辛,性寒,歸肝膽經(jīng),具有散結(jié)消腫、清肝明目的功效,現(xiàn)代研究表明其具有降糖、降壓、抗菌消炎、免疫抑制、清除自由基及抗氧化、抗腫瘤、抑制病毒生長(zhǎng)等多種藥理活性,對(duì)多種疾病均有良好的臨床治療效果。目前,對(duì)夏枯草的研究主要是對(duì)果穗及其黃酮、酚酸類為主的小分子物質(zhì)進(jìn)行藥理研究,對(duì)夏枯草果實(shí)部位以及果實(shí)揮發(fā)油等大分子物質(zhì)的研究甚少,造成夏枯草資源嚴(yán)重浪費(fèi)。本文以夏枯草果實(shí)為原料,對(duì)其小極性部位揮發(fā)油與極性部位甲醇提取物的成分表征進(jìn)行較系統(tǒng)的研究,并就其抗炎抗氧化活性進(jìn)行初步探討,為進(jìn)一步認(rèn)識(shí)夏枯草奠定基礎(chǔ),為新藥研發(fā)與中藥材全方位開發(fā)利用拓寬思路。方法:1.利用GC-MS與HPLC法分析30批果實(shí)成分,采用“中藥色譜指紋圖譜計(jì)算機(jī)相似性評(píng)價(jià)系統(tǒng)”軟件進(jìn)行模式分析及相似度計(jì)算,對(duì)共有特征峰成分進(jìn)行檢識(shí),使用主成分分析比較不同產(chǎn)地夏枯草果實(shí)之間的差異。2.藥物干預(yù)脂多糖(LPS,0.1μg?mL-1)建立細(xì)胞炎癥模型,利用噻唑藍(lán)(MTT)比色法考察不同濃度的藥物對(duì)RAW264.7細(xì)胞增殖的...
【文章來源】:湖南中醫(yī)藥大學(xué)湖南省
【文章頁數(shù)】:68 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
英文縮略語表
引言
第一章 夏枯草果實(shí)揮發(fā)油GC-MS指紋圖譜
1 試驗(yàn)材料與儀器
1.1 藥材
1.2 試劑
1.3 主要儀器
2 方法
2.1 揮發(fā)油的提取
2.1.1 藥材前處理
2.1.2 提取方法
2.2 甲酯化前處理
2.3 GC-MS分析條件
2.4 GC-MS數(shù)據(jù)采集
2.5 方法學(xué)
2.5.1 穩(wěn)定性試驗(yàn)
2.5.2 重復(fù)性試驗(yàn)
2.5.3 精密度試驗(yàn)
3 結(jié)果與分析
3.1 唇形科12種不同植物果實(shí)揮發(fā)油成分分析
3.2 夏枯草果實(shí)揮發(fā)油GC-MS指紋圖譜分析
3.2.1 樣品分析
3.2.2 共有峰的認(rèn)定
3.2.3 相似度評(píng)價(jià)
3.2.4 主成分分析
3.2.5 正交偏最小二乘-判別分析
3.2.6 差異標(biāo)記物的篩選以及鑒定
4 小結(jié)與討論
第二章 夏枯草果實(shí)甲醇提取物的HPLC指紋圖譜與活性成分含量測(cè)定
1 試驗(yàn)材料與儀器
1.1 藥材
1.2 試劑
1.3 主要儀器
2 方法
2.1 對(duì)照品溶液的制備
2.2 供試溶液的制備
2.3 色譜條件
2.4 方法學(xué)考察
2.4.1 精密度試驗(yàn)
2.4.2 重復(fù)性試驗(yàn)
2.4.3 穩(wěn)定性試驗(yàn)
2.4.4 線性范圍
2.4.5 加樣回收試驗(yàn)
2.5 多元統(tǒng)計(jì)分析
3 結(jié)果與分析
3.1 HPLC指紋圖譜分析
3.1.1 共有峰的確定與指認(rèn)
3.1.2 相似度評(píng)價(jià)
3.1.3 主成分分析
3.1.4 正交偏最小二乘-判別分析
3.1.5 差異標(biāo)記物的篩選以及鑒定
3.2 夏枯草果實(shí)甲醇提取物活性成分HPLC含量測(cè)定
4 小結(jié)與討論
第三章 夏枯草果實(shí)的抗氧化、抗炎作用
1 試驗(yàn)儀器與材料
1.1 原料
1.2 試劑
1.3 主要儀器
2 方法
2.1 抗氧化能力測(cè)定
2.1.1 ABTS法
2.1.2 DPPH法
2.1.3 FRAP法
2.2 抗炎活性測(cè)定
2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
2.2.2 LPS刺激濃度選擇
2.2.3 細(xì)胞毒實(shí)驗(yàn)
2.2.4 炎癥因子IL-6、TNF-α、NO含量檢測(cè)
2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3 結(jié)果與分析
3.1 抗氧化能力測(cè)定結(jié)果
3.1.1 不同濃度PSV、PSM對(duì) ABTS·~+自由基清除能力
3.1.2 不同濃度PSV、PSM對(duì) DPPH自由基清除能力
3.1.3 FRAP法測(cè)定不同濃度PSV、PSM抗氧化能力
3.2 抗炎作用
3.2.1 LPS刺激濃度的選擇
3.2.2 MTT法測(cè)定PSV對(duì) LPS誘導(dǎo)的RAW264.7 細(xì)胞活性影響
3.2.3 PSV、PSM對(duì) LPS誘導(dǎo)RAW264.7 細(xì)胞分泌TNF-α、IL-6及NO的影響
4 小結(jié)與討論
總結(jié)
參考文獻(xiàn)
綜述
參考文獻(xiàn)
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]紫蘇藥理作用及其化學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)研究進(jìn)展[J]. 何育佩,郝二偉,謝金玲,韋瑋,秦健峰,侯小濤,鄧家剛. 中草藥. 2018(16)
[2]中藥揮發(fā)油傳統(tǒng)功效與現(xiàn)代研究進(jìn)展[J]. 王雅琪,楊園珍,伍振峰,熊耀坤,楊明. 中草藥. 2018(02)
[3]天然產(chǎn)物活性成分提取分離研究進(jìn)展[J]. 章懷云,劉俊,毛紹名,孫漢洲. 經(jīng)濟(jì)林研究. 2017(03)
[4]中藥揮發(fā)油提取技術(shù)研究概況[J]. 李歐,金堯,蔡小燕,王藝淞. 中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志. 2017(02)
[5]野生與栽培夏枯草HPLC指紋圖譜研究及模式識(shí)別分析[J]. 皮勝玲,胡玉珍,彭曦,李亞梅,林麗美,夏伯候,吳萍. 中國藥學(xué)雜志. 2017(05)
[6]當(dāng)歸揮發(fā)油對(duì)高血脂小鼠動(dòng)脈粥樣硬化的保護(hù)作用[J]. 吳國泰,劉五州,牛亭惠,杜麗東,王瑞瓊,任遠(yuǎn),郭玫. 中藥材. 2016(09)
[7]生物測(cè)定法用于中藥質(zhì)量評(píng)價(jià)的探索研究——以夏枯草抗氧化活性與總酚酸含量相關(guān)性的研究為例[J]. 馮偉紅,李春,信偉梅,林麗美,夏伯候,榮立新,楊立新,易紅,張永欣,陳兩綿,王智民. 中國中藥雜志. 2016(14)
[8]中藥指紋圖譜技術(shù)在中國藥典2015年版一部中的應(yīng)用[J]. 祝明,陳碧蓮,石上梅. 中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué). 2016(05)
[9]超臨界CO2萃取法與水蒸氣蒸餾法提取垂絲海棠葉揮發(fā)油成分及其抗氧化活性的比較[J]. 衛(wèi)強(qiáng),李前榮,尹浩,紀(jì)小影,徐飛. 中成藥. 2015(11)
[10]滁菊揮發(fā)油的成分分析及其在卷煙中的應(yīng)用[J]. 徐秀娟,王甜,何保江,李國棟,秦廣雍,屈展,胡軍,卓浩廉. 天然產(chǎn)物研究與開發(fā). 2015(09)
碩士論文
[1]GC-MS法對(duì)石菖蒲揮發(fā)油的質(zhì)量分析及β-細(xì)辛醚、α-細(xì)辛醚的藥動(dòng)學(xué)研究[D]. 李晶.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué) 2014
[2]甜杏仁油揮發(fā)性成分的分析及其在油脂品質(zhì)分析中的應(yīng)用[D]. 康晶晶.中南林業(yè)科技大學(xué) 2013
[3]八角茴香油化學(xué)成分、香氣性能及活性研究[D]. 郭向陽.浙江工業(yè)大學(xué) 2013
[4]中藥揮發(fā)油綠色提取技術(shù)的研究[D]. 曹明宇.河北科技大學(xué) 2011
本文編號(hào):3467325
【文章來源】:湖南中醫(yī)藥大學(xué)湖南省
【文章頁數(shù)】:68 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
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摘要
Abstract
英文縮略語表
引言
第一章 夏枯草果實(shí)揮發(fā)油GC-MS指紋圖譜
1 試驗(yàn)材料與儀器
1.1 藥材
1.2 試劑
1.3 主要儀器
2 方法
2.1 揮發(fā)油的提取
2.1.1 藥材前處理
2.1.2 提取方法
2.2 甲酯化前處理
2.3 GC-MS分析條件
2.4 GC-MS數(shù)據(jù)采集
2.5 方法學(xué)
2.5.1 穩(wěn)定性試驗(yàn)
2.5.2 重復(fù)性試驗(yàn)
2.5.3 精密度試驗(yàn)
3 結(jié)果與分析
3.1 唇形科12種不同植物果實(shí)揮發(fā)油成分分析
3.2 夏枯草果實(shí)揮發(fā)油GC-MS指紋圖譜分析
3.2.1 樣品分析
3.2.2 共有峰的認(rèn)定
3.2.3 相似度評(píng)價(jià)
3.2.4 主成分分析
3.2.5 正交偏最小二乘-判別分析
3.2.6 差異標(biāo)記物的篩選以及鑒定
4 小結(jié)與討論
第二章 夏枯草果實(shí)甲醇提取物的HPLC指紋圖譜與活性成分含量測(cè)定
1 試驗(yàn)材料與儀器
1.1 藥材
1.2 試劑
1.3 主要儀器
2 方法
2.1 對(duì)照品溶液的制備
2.2 供試溶液的制備
2.3 色譜條件
2.4 方法學(xué)考察
2.4.1 精密度試驗(yàn)
2.4.2 重復(fù)性試驗(yàn)
2.4.3 穩(wěn)定性試驗(yàn)
2.4.4 線性范圍
2.4.5 加樣回收試驗(yàn)
2.5 多元統(tǒng)計(jì)分析
3 結(jié)果與分析
3.1 HPLC指紋圖譜分析
3.1.1 共有峰的確定與指認(rèn)
3.1.2 相似度評(píng)價(jià)
3.1.3 主成分分析
3.1.4 正交偏最小二乘-判別分析
3.1.5 差異標(biāo)記物的篩選以及鑒定
3.2 夏枯草果實(shí)甲醇提取物活性成分HPLC含量測(cè)定
4 小結(jié)與討論
第三章 夏枯草果實(shí)的抗氧化、抗炎作用
1 試驗(yàn)儀器與材料
1.1 原料
1.2 試劑
1.3 主要儀器
2 方法
2.1 抗氧化能力測(cè)定
2.1.1 ABTS法
2.1.2 DPPH法
2.1.3 FRAP法
2.2 抗炎活性測(cè)定
2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
2.2.2 LPS刺激濃度選擇
2.2.3 細(xì)胞毒實(shí)驗(yàn)
2.2.4 炎癥因子IL-6、TNF-α、NO含量檢測(cè)
2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3 結(jié)果與分析
3.1 抗氧化能力測(cè)定結(jié)果
3.1.1 不同濃度PSV、PSM對(duì) ABTS·~+自由基清除能力
3.1.2 不同濃度PSV、PSM對(duì) DPPH自由基清除能力
3.1.3 FRAP法測(cè)定不同濃度PSV、PSM抗氧化能力
3.2 抗炎作用
3.2.1 LPS刺激濃度的選擇
3.2.2 MTT法測(cè)定PSV對(duì) LPS誘導(dǎo)的RAW264.7 細(xì)胞活性影響
3.2.3 PSV、PSM對(duì) LPS誘導(dǎo)RAW264.7 細(xì)胞分泌TNF-α、IL-6及NO的影響
4 小結(jié)與討論
總結(jié)
參考文獻(xiàn)
綜述
參考文獻(xiàn)
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]紫蘇藥理作用及其化學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)研究進(jìn)展[J]. 何育佩,郝二偉,謝金玲,韋瑋,秦健峰,侯小濤,鄧家剛. 中草藥. 2018(16)
[2]中藥揮發(fā)油傳統(tǒng)功效與現(xiàn)代研究進(jìn)展[J]. 王雅琪,楊園珍,伍振峰,熊耀坤,楊明. 中草藥. 2018(02)
[3]天然產(chǎn)物活性成分提取分離研究進(jìn)展[J]. 章懷云,劉俊,毛紹名,孫漢洲. 經(jīng)濟(jì)林研究. 2017(03)
[4]中藥揮發(fā)油提取技術(shù)研究概況[J]. 李歐,金堯,蔡小燕,王藝淞. 中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志. 2017(02)
[5]野生與栽培夏枯草HPLC指紋圖譜研究及模式識(shí)別分析[J]. 皮勝玲,胡玉珍,彭曦,李亞梅,林麗美,夏伯候,吳萍. 中國藥學(xué)雜志. 2017(05)
[6]當(dāng)歸揮發(fā)油對(duì)高血脂小鼠動(dòng)脈粥樣硬化的保護(hù)作用[J]. 吳國泰,劉五州,牛亭惠,杜麗東,王瑞瓊,任遠(yuǎn),郭玫. 中藥材. 2016(09)
[7]生物測(cè)定法用于中藥質(zhì)量評(píng)價(jià)的探索研究——以夏枯草抗氧化活性與總酚酸含量相關(guān)性的研究為例[J]. 馮偉紅,李春,信偉梅,林麗美,夏伯候,榮立新,楊立新,易紅,張永欣,陳兩綿,王智民. 中國中藥雜志. 2016(14)
[8]中藥指紋圖譜技術(shù)在中國藥典2015年版一部中的應(yīng)用[J]. 祝明,陳碧蓮,石上梅. 中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué). 2016(05)
[9]超臨界CO2萃取法與水蒸氣蒸餾法提取垂絲海棠葉揮發(fā)油成分及其抗氧化活性的比較[J]. 衛(wèi)強(qiáng),李前榮,尹浩,紀(jì)小影,徐飛. 中成藥. 2015(11)
[10]滁菊揮發(fā)油的成分分析及其在卷煙中的應(yīng)用[J]. 徐秀娟,王甜,何保江,李國棟,秦廣雍,屈展,胡軍,卓浩廉. 天然產(chǎn)物研究與開發(fā). 2015(09)
碩士論文
[1]GC-MS法對(duì)石菖蒲揮發(fā)油的質(zhì)量分析及β-細(xì)辛醚、α-細(xì)辛醚的藥動(dòng)學(xué)研究[D]. 李晶.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué) 2014
[2]甜杏仁油揮發(fā)性成分的分析及其在油脂品質(zhì)分析中的應(yīng)用[D]. 康晶晶.中南林業(yè)科技大學(xué) 2013
[3]八角茴香油化學(xué)成分、香氣性能及活性研究[D]. 郭向陽.浙江工業(yè)大學(xué) 2013
[4]中藥揮發(fā)油綠色提取技術(shù)的研究[D]. 曹明宇.河北科技大學(xué) 2011
本文編號(hào):3467325
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