目的觀察苦參堿對(duì)血管平滑肌細(xì)胞增殖和凋亡的影響,并探討其作用機(jī)制。方法取血管平滑肌細(xì)胞MOVAS進(jìn)行培養(yǎng),分別加入0.5、1、5、10、100μmol/L苦參堿溶液,作用24、48、72 h后,采用CCK-8法檢測(cè)細(xì)胞增殖情況,根據(jù)增殖曲線進(jìn)行回歸計(jì)算,苦參堿對(duì)MOVAS細(xì)胞增殖抑制的EC50是7.6μmol/L,因此選擇5、10μmol/L作用濃度進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞,分為5μmol/L苦參堿組、10μmol/L苦參堿組及對(duì)照組,分別加入5、10μmol/L苦參堿和無(wú)菌PBS溶液。采用PI染色法檢測(cè)各組細(xì)胞周期,ELISA法檢測(cè)細(xì)胞凋亡率和凋亡相關(guān)蛋白Caspase-3活性,Western blotting法檢測(cè)AKT/m TOR信號(hào)通路相關(guān)蛋白AKT、m TOR及其下游底物p70S6K、4EBP1磷酸化蛋白表達(dá)。結(jié)果與對(duì)照組比較,5μmol/L苦參堿組、10μmol/L苦參堿組G1期細(xì)胞比例升高,S期和G2/M期細(xì)胞比例降低（P <0.05或<0.01）;細(xì)胞凋亡率升高,Caspase-3活性增加（P <0.05或<0.01）; p-AKT、p-m... 

【文章來(lái)源】：山東醫(yī)藥. 2020,60(26)

【文章頁(yè)數(shù)】：4 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2細(xì)胞培養(yǎng)
    1.3 苦參堿最佳作用濃度的篩選
    1.4 細(xì)胞周期檢測(cè)
    1.5 細(xì)胞凋亡檢測(cè)
    1.6 Caspase-3活性檢測(cè)
    1.7 AKT、m TOR、p70S6K、4EBP1蛋白活性檢測(cè)
    1.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 各組細(xì)胞周期比較
    2.2 各組細(xì)胞凋亡率比較
    2.3 各組Caspase-3活性比較
    2.4 各組AKT、m TOR、p70S6K、4EBP1蛋白活性比較
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]苦參堿對(duì)人體外培養(yǎng)宮頸癌HeLa細(xì)胞增殖的抑制作用[J]. 程熠,郭秋云,于世英,黃南,秦凱,趙荊,熊慧華.  醫(yī)藥導(dǎo)報(bào). 2019(10)
[2]山豆根主要成分苦參堿誘導(dǎo)人正常肝細(xì)胞L-02凋亡及其對(duì)細(xì)胞周期的影響[J]. 耿婭,邵珍,王清然,符勝光,鄧中平.  中國(guó)新藥雜志. 2019(07)



本文編號(hào)：3459430