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基于轉(zhuǎn)錄組測序分析苦豆子堿對產(chǎn)膜表皮葡萄球菌硫代謝通路和菌體ROS產(chǎn)生的影響

發(fā)布時間:2021-09-28 06:00
  表皮葡萄球菌是一種凝固酶陰性條件致病菌,但極易產(chǎn)生生物膜同時可作為耐藥基因儲存庫,使得耐藥性問題變得日趨嚴(yán)重。最新研究表明,中藥能夠逆轉(zhuǎn)細(xì)菌耐藥性,并且增強(qiáng)現(xiàn)有抗生素的殺菌效果,但中藥作用機(jī)制十分復(fù)雜,只有深入研究中藥對細(xì)菌作用機(jī)理,才能為中藥的臨床應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。本研究以產(chǎn)膜表皮葡萄球菌標(biāo)準(zhǔn)株(ATCC35984)和臨床分離的強(qiáng)產(chǎn)膜株S3為實(shí)驗(yàn)材料,用轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù),分析苦豆子堿作用前后表皮葡萄球菌差異基因的表達(dá)情況。結(jié)果表明,中藥苦豆子堿、苦參堿和抗生素環(huán)丙沙星在抑菌和亞抑菌濃度下對表皮葡萄球菌作用12-18 h后均有較明顯的抑制效果。轉(zhuǎn)錄組測序結(jié)果分析,發(fā)現(xiàn)抗氧化活性相關(guān)的差異表達(dá)基因占該類全部基因的比例較高。同時,有9個差異表達(dá)基因富集在硫代謝通路,富集程度最高。說明苦豆子堿通過下調(diào)半胱氨酸合成酶、絲氨酸乙酰轉(zhuǎn)移酶、亞硫酸鹽還原酶等關(guān)鍵酶的表達(dá),影響表皮葡萄球菌硫代謝功能。重點(diǎn)檢測苦豆子堿、苦參堿、環(huán)丙沙星作用后菌體內(nèi)活性氧含量的變化,同時測定一氧化氮(NO)以及抗氧化系統(tǒng)中各種酶活的變化。結(jié)果表明,藥物在MIC和1/2MIC下刺激菌體產(chǎn)生大量ROS,比用藥前菌體內(nèi)ROS含量... 

【文章來源】:寧夏大學(xué)寧夏回族自治區(qū) 211工程院校

【文章頁數(shù)】:64 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

基于轉(zhuǎn)錄組測序分析苦豆子堿對產(chǎn)膜表皮葡萄球菌硫代謝通路和菌體ROS產(chǎn)生的影響


圖2-4差異表達(dá)基因MA圖??Fig.2-4?MA?plot?ofdilTerential?expression?genes??-19-??

電泳圖,電泳圖,濃度檢測,差異表達(dá)基因


|J^T|?|W.4.SSulfur?0? ̄ ̄11.13.11.181^??._?^?J?Sulfite???^—^?'m〇sulfate?(?’??^?[npLs,,i??F?i6? ̄|?2.8.1.5?Y-??〇?H2S?。喝?tTrithiomle? ̄?Jl??|22T^]1??,?L^Homocjreteiive??1?4.4.1.8?|?O-^??吻―?I?Cys—?V???|?Cysteine?and?methionine?|??I?metabolism?J??圖2-8差異表達(dá)基因在硫代謝通路中的分布情tribution?of?differential?expression?genes?in?sulfur?meta碼該酶的鑒因下調(diào),框內(nèi)數(shù)字代表酶的編號??up,?the?enzyme?marked?by?green?frame?are?related?with?drown表達(dá)基因的實(shí)時熒光定量PCR驗(yàn)證??度及濃度檢測結(jié)果??1?2

表皮葡萄球菌,藥物,苦參堿,氧化酶


物對表皮葡萄球菌調(diào)控ROS的關(guān)鍵因素的分析結(jié)果??物影響表皮葡萄球菌NADPH氧化酶活性的測定結(jié)果??PH氧化酶、超氧化物歧化酶、過氧化氫酶是調(diào)控菌體內(nèi)ROS變化的主要,激活NADPH氧化酶是細(xì)菌產(chǎn)生ROS的一種普遍方式[125]。圖3-2顯示,子堿、苦參堿和環(huán)丙沙星作用于表皮葡萄球菌后,菌體內(nèi)的NADPH氧化著提高。在抑菌濃度下,環(huán)丙沙星相較于苦豆子堿、苦參堿更能導(dǎo)致NAD。??-33-??


本文編號:3411369

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