目的:探討蛇葡萄素（AMP）對人前列腺癌DU145細胞增殖、遷移和侵襲的影響,研究其對轉化生長因子β（TGF-β）誘導的上皮間質(zhì)轉化（EMT）模型的作用。方法:用不同濃度的AMP處理DU145細胞,采用CCK-8法和克隆形成實驗檢測細胞增殖情況;Transwell法檢測細胞的遷移和侵襲能力;細胞免疫熒光實驗表征不同濃度TGF-β處理后細胞內(nèi)E-cadherin和Vimentin表達情況,確定EMT模型最佳誘導濃度;Western blot法進一步檢測加藥后EMT模型E-cadherin和Vimentin表達情況。結果:AMP對DU145細胞增殖具有顯著的抑制作用,24、48、72 h的IC50分別為35.62、32.71、28.43μg·mL^-1;Transwell實驗顯示AMP處理后穿膜細胞數(shù)明顯減少,顯著抑制細胞的遷移和侵襲能力;細胞免疫熒光實驗表征發(fā)現(xiàn)TGF-β誘導后細胞內(nèi)E-cadherin表達下調(diào),Vimentin表達上調(diào),確定10ng·mL^-1為TGF-β誘導EMT模型的最佳濃度。Western blot法檢測顯示,與對照組相比,... 

【文章來源】：藥學與臨床研究. 2020,28(04)

【文章頁數(shù)】：5 頁

【部分圖文】：

蛇葡萄素對人前列腺癌DU145細胞增殖能力的影響

AMP是藥食兩用植物藤茶中含量甚高的一種黃酮類化合物，其食用的安全性也已得到證明[6]。大量的實驗結果顯示，AMP作為藤茶中的主要生物活性成分，具有安全有效、多途徑多靶點的藥理作用，雖與楊梅素的結構相似，但對前列腺上皮細胞的毒性低于楊梅素[7]。在本研究中，AMP可有效抑制前列腺癌DU145細胞的增殖和集落形成，并呈現(xiàn)一定的濃度和時間依賴性，提示AMP可能對前列腺癌具有一定的治療價值。侵襲和轉移是前列腺癌惡化的重要指標，也是導致前列腺癌患者死亡的主要原因，因此，抑制癌細胞侵襲和轉移成為治療前列腺癌的潛在靶點之一[8]。腫瘤細胞遷移和侵襲是一種復雜的生物學行為，主要包括細胞黏附、基質(zhì)降解和遷移運動等多個環(huán)節(jié)[9,10]。而且腫瘤細胞的遷移和侵襲速度越快，腫瘤轉移能力越強，其惡性程度越高。本研究結果顯示，在Transwell實驗中，與對照組相比，經(jīng)AMP處理后，從上室穿過基底膜的細胞數(shù)均顯著減少，并且隨著AMP濃度增加穿膜細胞數(shù)也依次減少，表明了AMP能夠有效抑制DU145細胞的遷移和侵襲。

1982年Greenburg和Hay首次提出上皮-間質(zhì)轉化（EMT）這一概念，是指上皮細胞在一定條件下轉化成間質(zhì)細胞的過程，使之具有更強的遷移、侵襲及抗凋亡能力，并以上皮表型的缺失和間質(zhì)表型的獲得為主要特征[11]。上皮源性的惡性腫瘤發(fā)生EMT能夠使腫瘤細胞擺脫細胞-細胞間連接而更具侵襲性，因此在腫瘤的侵襲和轉移過程中起著重要作用。EMT的主要特點是上皮表型標志物E-cadherin表達減少和間質(zhì)表型標志物N-cadherin、Vimentin表達增加[12]。轉化生長因子-β（TGF-β）已被證實為多種腫瘤EMT發(fā)生的主要誘導劑，進而促進腫瘤侵襲轉移[13]。本研究采用TGF-β為誘導劑，以E-cadherin表達下調(diào)和Vimentin表達上調(diào)為指標，建立了人前列腺癌DU145細胞的EMT模型。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]蛇葡萄素藥理活性研究進展[J]. 高瞻,林原,荊常鋒.  現(xiàn)代實用醫(yī)學. 2020(01)
[2]二氫楊梅素調(diào)控MAPKs信號通路抑制SMMC-7721細胞凋亡和遷移的分子機制研究[J]. 齊世美,姜琦,李強,馮遵永,張雨晴,董順利,戚之琳,章堯.  藥學學報. 2019(08)
[3]蛇葡萄素對人前列腺癌PC3細胞增殖與凋亡的影響[J]. 倪峰,姚欣,郭丹,林靜瑜,周春權,陳曉明.  中藥藥理與臨床. 2012(03)
[4]廣西藤茶總黃酮的長期毒性試驗[J]. 鐘正賢,周桂芬,陳學芬,覃潔萍.  時珍國醫(yī)國藥. 2003(04)



本文編號：3387019