目的:流感病毒感染至今仍是世界性公共衛(wèi)生難題,隨著耐藥毒株的不斷出現(xiàn),抗流感病毒藥物的效果變得較為有限。因此,探尋新型藥物、尤其是在不同于現(xiàn)有藥物作用位點發(fā)揮作用的抗流感病毒藥物變得尤為重要。前期有研究結(jié)果表明,隱孔菌（Cryptoporus volvatus）提取物能在體外和體內(nèi)有效地抑制流感病毒的復(fù)制,但其中發(fā)揮主要作用的活性成分尚未證實。為闡明隱孔菌中具有抗流感病毒活性的有效成分,本課題對隱孔菌進行了系統(tǒng)的化學(xué)成分分析,并對隱孔菌90%乙醇提取物中八種較為主要的單體化合物進行活性篩選。此外,初步探究了隱孔酸E抑制甲型流感病毒在MDCK細胞中復(fù)制的作用機制,為后續(xù)開發(fā)隱孔菌用于治療甲型流感病毒感染提供數(shù)據(jù)支持。方法:通過病毒滴度測定實驗,計算隱孔菌中8種化合物抑制甲型流感病毒活性的IC50,篩選到具有較強抗流感病毒活性的化合物隱孔酸E（Cryptoporic acid E,CAE）進行研究。通過MTT法測定化合物對于流感病毒宿主細胞增殖活力的影響,選取抗流感病毒活性較好且不影響宿主細胞增殖活力的化合物濃度用于后續(xù)研究。通過測定在不同MOI時,隱孔酸E對流感病毒生長曲線的影響,進一步... 

【文章來源】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略詞表
引言
第一部分 確定隱孔菌乙醇提取物中具有抗流感病毒作用的活性成分
    1 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 實驗方法
    2 實驗結(jié)果
        2.1 隱孔菌乙醇提取物中八種化合物抗流感病毒活性的測定
        2.2 CAE的化學(xué)結(jié)構(gòu)及其純度測定
        2.3 CAE對MDCK細胞增殖的抑制作用
        2.4 CAE對流感病毒(H1N1/pdm09毒株)復(fù)制曲線的抑制作用
    3 討論
第二部分 隱孔酸E對A型流感病毒不同類別毒株的抑制作用
    1 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 實驗方法
    2 實驗結(jié)果
        2.1 CAE對H1N1/pdm09毒株的抑制作用
        2.2 CAE對WSN (H1N1)毒株的抑制作用
        2.3 CAE對PR8 (H1N1)毒株的抑制作用
        2.4 CAE對A/Beijing/2007 (H3N2)毒株的抑制作用
    3 討論
第三部分 隱孔酸E抑制A型流感病毒復(fù)制的作用機制
    1 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 實驗方法
    2 實驗結(jié)果
        2.1 用CAE預(yù)處理MDCK細胞對其抗病毒作用的影響
        2.2 用CAE預(yù)處理H1N1/pdm09毒株對其毒力的影響
        2.3 CAE對流感病毒生命周期的不同階段的抑制作用
        2.4 CAE對病毒vRNA合成的抑制作用
        2.5 CAE對病毒mRNA合成的抑制作用
        2.6 CAE對病毒cRNA合成的抑制作用
        2.7 CAE對病毒核糖核蛋白復(fù)合物(vRNP)活性的抑制作用
        2.8 CAE對流感病毒vRNP核轉(zhuǎn)位的影響
    3 討論
參考文獻
綜述 抗流感病毒天然產(chǎn)物研究進展
    參考文獻
致謝
作者簡介及發(fā)表文章


【參考文獻】：
期刊論文
[1]云南民族民間醫(yī)藥研究的新進展[J]. 馬偉光,陳春燕.  云南中醫(yī)學(xué)院學(xué)報. 1993(01)

碩士論文
[1]隱孔菌對哮喘豚鼠氣道收縮、嗜酸粒細胞釋放和趨化的影響[D]. 趙曉燕.浙江大學(xué) 2003



本文編號：3377450