發(fā)布時(shí)間：2021-09-01 18:14

　　目的:流感病毒感染至今仍是世界性公共衛(wèi)生難題,隨著耐藥毒株的不斷出現(xiàn),抗流感病毒藥物的效果變得較為有限。因此,探尋新型藥物、尤其是在不同于現(xiàn)有藥物作用位點(diǎn)發(fā)揮作用的抗流感病毒藥物變得尤為重要。前期有研究結(jié)果表明,隱孔菌（Cryptoporus volvatus）提取物能在體外和體內(nèi)有效地抑制流感病毒的復(fù)制,但其中發(fā)揮主要作用的活性成分尚未證實(shí)。為闡明隱孔菌中具有抗流感病毒活性的有效成分,本課題對(duì)隱孔菌進(jìn)行了系統(tǒng)的化學(xué)成分分析,并對(duì)隱孔菌90%乙醇提取物中八種較為主要的單體化合物進(jìn)行活性篩選。此外,初步探究了隱孔酸E抑制甲型流感病毒在MDCK細(xì)胞中復(fù)制的作用機(jī)制,為后續(xù)開發(fā)隱孔菌用于治療甲型流感病毒感染提供數(shù)據(jù)支持。方法:通過病毒滴度測(cè)定實(shí)驗(yàn),計(jì)算隱孔菌中8種化合物抑制甲型流感病毒活性的IC50,篩選到具有較強(qiáng)抗流感病毒活性的化合物隱孔酸E（Cryptoporic acid E,CAE）進(jìn)行研究。通過MTT法測(cè)定化合物對(duì)于流感病毒宿主細(xì)胞增殖活力的影響,選取抗流感病毒活性較好且不影響宿主細(xì)胞增殖活力的化合物濃度用于后續(xù)研究。通過測(cè)定在不同MOI時(shí),隱孔酸E對(duì)流感病毒生長曲線的影響,進(jìn)一步... 

【文章來源】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略詞表
引言
第一部分 確定隱孔菌乙醇提取物中具有抗流感病毒作用的活性成分
    1 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 實(shí)驗(yàn)方法
    2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.1 隱孔菌乙醇提取物中八種化合物抗流感病毒活性的測(cè)定
        2.2 CAE的化學(xué)結(jié)構(gòu)及其純度測(cè)定
        2.3 CAE對(duì)MDCK細(xì)胞增殖的抑制作用
        2.4 CAE對(duì)流感病毒(H1N1/pdm09毒株)復(fù)制曲線的抑制作用
    3 討論
第二部分 隱孔酸E對(duì)A型流感病毒不同類別毒株的抑制作用
    1 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 實(shí)驗(yàn)方法
    2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.1 CAE對(duì)H1N1/pdm09毒株的抑制作用
        2.2 CAE對(duì)WSN (H1N1)毒株的抑制作用
        2.3 CAE對(duì)PR8 (H1N1)毒株的抑制作用
        2.4 CAE對(duì)A/Beijing/2007 (H3N2)毒株的抑制作用
    3 討論
第三部分 隱孔酸E抑制A型流感病毒復(fù)制的作用機(jī)制
    1 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 實(shí)驗(yàn)方法
    2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.1 用CAE預(yù)處理MDCK細(xì)胞對(duì)其抗病毒作用的影響
        2.2 用CAE預(yù)處理H1N1/pdm09毒株對(duì)其毒力的影響
        2.3 CAE對(duì)流感病毒生命周期的不同階段的抑制作用
        2.4 CAE對(duì)病毒vRNA合成的抑制作用
        2.5 CAE對(duì)病毒mRNA合成的抑制作用
        2.6 CAE對(duì)病毒cRNA合成的抑制作用
        2.7 CAE對(duì)病毒核糖核蛋白復(fù)合物(vRNP)活性的抑制作用
        2.8 CAE對(duì)流感病毒vRNP核轉(zhuǎn)位的影響
    3 討論
參考文獻(xiàn)
綜述 抗流感病毒天然產(chǎn)物研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡介及發(fā)表文章


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]云南民族民間醫(yī)藥研究的新進(jìn)展[J]. 馬偉光,陳春燕.  云南中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 1993(01)

碩士論文
[1]隱孔菌對(duì)哮喘豚鼠氣道收縮、嗜酸粒細(xì)胞釋放和趨化的影響[D]. 趙曉燕.浙江大學(xué) 2003



本文編號(hào)：3377450