目的:黃芪甲苷（As-IV）是黃芪中的一種小分子的活性三萜皂苷成分,目前,已經(jīng)證明對許多心血管疾病有保護作用。本實驗主要目的是研究As-IV在抗心肌缺氧/復氧損傷中的作用機制,以闡明As-IV對抗心肌缺氧/復氧損傷的保護作用主要是否通過14-3-3η蛋白介導。方法:在本實驗中,大鼠H9c2心肌細胞作為實驗載體,通過體外心肌細胞缺氧/復氧（A/R）損傷模型模擬體內(nèi)心肌缺血再灌注（I/R）損傷模型。實驗隨機分成7組,每組重復4次:（1）正常組（control組）;（2）A/R組;（3）25μM AS-IV+A/R組;（4）50μM AS-IV+A/R組;（5）100μM AS-IV+A/R組;（6）50μM As-IV+AD14-3-3ηRNAi+A/R組;（7）50μM As-IV+ADscrRNAi+A/R組。MTS法檢測細胞存活率;分光光度法檢測LDH活性;蛋白免疫印跡法（western blotting）檢測14-3-3η蛋白的表達;JC-1檢測細胞線粒體膜電位（Δψm）;DCFH-DA法檢測心肌細胞內(nèi)ROS水平;Annexin V-FITC/PI雙染法檢測細胞凋亡。結(jié)果:1.與A... 

【文章來源】：南昌大學江西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：48 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
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第1章 引言
第2章 材料與方法
    2.1 實驗細胞
    2.2 主要材料和試劑
    2.3 主要儀器和設(shè)備
    2.4 實驗方法
        2.4.1 培養(yǎng)H9c2心肌細胞
        2.4.2 心肌缺氧/復氧（A/R）損傷模型的構(gòu)建
        2.4.3 MTS法檢測H9c2心肌細胞存活率
        2.4.4 分光光度法檢測乳酸脫氫酶（LDH）的活性
        2.4.5 蛋白免疫印跡法 (Western blotting)檢測 1433η 蛋白的表達
        2.4.6 DCFH-DA法檢測H9c2心肌細胞內(nèi)ROS的含量
        2.4.7 JC-1 檢測H9c2心肌細胞線粒體膜電位(△Ψm)
        2.4.8 Annexin V-FITC/PI雙染法檢測H9c2心肌細胞凋亡
        2.4.9 數(shù)據(jù)處理
第3章 實驗結(jié)果
    3.1 AS-IV等中藥單體預(yù)處理對 1433η 蛋白表達的影響
    3.2 AS-IV最佳濃度的確定
        3.2.1 不同劑量的AS-IV組預(yù)處理對細胞存活率的影響
        3.2.2 不同劑量的AS-IV組預(yù)處理對LDH活性的影響
    3.3 AS-IV預(yù)處理對細胞存活率和LDH活性的影響
    3.4 AS-IV預(yù)處理對 1433η 蛋白表達的影響
    3.5 AS-IV預(yù)處理對ROS生成的影響
    3.6 AS-IV預(yù)處理對細胞線粒體膜電位（△Ψm）的影響
    3.7 AS-IV預(yù)處理對細胞凋亡的影響
第4章 討論
第5章 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
致謝
參考文獻
綜述
    參考文獻


【參考文獻】：
期刊論文
[1]Astragaloside IV prevents lipopolysaccharide-induced injury in H9C2 cardiomyocytes[J]. WANG Shi-Guang,XU Yan,XIE Hao,WANG Wei,CHEN Xiao-Hu.  Chinese Journal of Natural Medicines. 2015(02)
[2]14-3-3參與apelin-13促進大鼠血管平滑肌細胞增殖ERK1/2信號途徑研究（英文）[J]. 潘偉男,李峰,毛小環(huán),秦旭平,鄧水秀,封芬,陳鋒,李蘭芳,廖端芳,陳臨溪.  生物化學與生物物理進展. 2011(12)
[3]Astragaloside IV Regulates Expression of ATP-sensitive Potassium Channel Subunits after Ischemia-reperfusion in Rat Ventricular Cardiomyocytes[J]. 韓向暉,劉萍,章怡祎,張娜,陳富榮,蔡玨峰.  Journal of Traditional Chinese Medicine. 2011(04)

碩士論文
[1]黃芪甲苷抗心肌細胞缺氧復氧損傷的保護機制研究[D]. 許旻.南昌大學 2013



本文編號：3367851