近年研究指出惡性腫瘤的發(fā)病率在呈逐年上升的趨向,嚴(yán)重?fù)p害到人類的身體健康。因此研發(fā)新型抗腫瘤活性物質(zhì)對惡性腫瘤的預(yù)防治療迫在眉睫。然而惡性腫瘤、高血壓、腎臟疾病、動脈硬化、心梗、神經(jīng)變性疾病等多種疾病的發(fā)生與發(fā)展與自由基的過剩都密切相關(guān),因此開發(fā)抗氧化制劑對于疾病的防治亦具有廣闊的應(yīng)用前景。本研究以石斛酚作為石斛中的主要活性成分,具有廣泛的生理活性,但其對肝癌的作用尚不完全明確。因此進(jìn)行了體外抗腫瘤及抗氧化活性研究,本研究結(jié)果將為石斛藥材的開發(fā)利用提供科學(xué)理論依據(jù)。目的:基于人肝癌細(xì)胞HepG2與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,分別對石斛酚的抗腫瘤與抗氧化的進(jìn)行生物活性研究,并進(jìn)一步深入其發(fā)揮作用的機(jī)制。方法:1.以人肝癌細(xì)胞HepG2為研究對象,采用MTT法測定石斛酚的細(xì)胞毒作用;采用Hoechst33258,并通過熒光顯微鏡觀察染色處理的HepG2的細(xì)胞凋亡形態(tài)圖;采用Annexin V-PI雙染,通過細(xì)胞流式儀檢測HepG2的細(xì)胞凋亡率;以及采用蛋白印跡法（Western blot）檢測相關(guān)凋亡蛋白 p-Akt/Akt、PARP、p53、Caspase-3的表達(dá)能力,從而探索石斛酚的抗腫瘤作用... 

【文章來源】：廣州中醫(yī)藥大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：71 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２－５－１石斛酚對肝癌細(xì)胞ＨｅｐＧ２細(xì)胞增殖的影響??與空白對照組比較：ｗＰ＜〇．?０１??

?石斛酚通過調(diào)節(jié)ＰＩ３Ｋ／Ａｋｔ通路發(fā)揮抗腫瘤與抗氧化作用???可知，當(dāng)用石斛酚（１，４０，１５０?ＵＭ）處理細(xì)胞４８?ｈ后，與空白對照組相比，藥物??組細(xì)胞表現(xiàn)出細(xì)胞量減少，膜起泡，細(xì)胞質(zhì)縮合和核縮合染色質(zhì)典型凋亡特征。且隨??著濃度增大而凋亡形態(tài)明顯。??

石斛酚通過調(diào)節(jié)ＰＩ３Ｋ／Ａｋｔ通路發(fā)揮抗腫瘤與抗氧化作用．?４石斛酚通過調(diào)節(jié)ｐ－Ａｋｔ／Ａｋｔ蛋白表達(dá)發(fā)揮抗腫瘤作用??１，４０，１５０?的石斛酚處理?ＨｅｐＧ２?細(xì)胞?４８ｈ，Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ?檢測到?ＰＩ３Ｋ／通路的蛋白ｐ－Ａｋｔ表達(dá)變化情況，結(jié)果如下圖２－５－４，與空白對照組相比，高劑量的石斛酚可以抑制ＩｔｅｐＧ２細(xì)胞中ｐ－Ａｋｔ的磷酸化（Ｆ＜０．０１）；與石比，各濃度的石斛酚＋ＬＹ２９４００２組ｐ－Ａｋｔ蛋白的表達(dá)量均相應(yīng)的減少（戶＜０．?，Ａｋｔ的總蛋白表達(dá)水平基本上無任何變化。這說明石斛酚抑制著Ａｋｔ的翻作用。??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]流蘇石斛與其他黃草類石斛HPLC特征圖譜的比較研究[J]. 陶盛昌,陳志輝,黃凱偉,嚴(yán)慕賢,魏剛.  中藥新藥與臨床藥理. 2016(02)
[2]疊鞘石斛HPLC特征圖譜的研究[J]. 柯漢女,陳志輝,黃凱偉,陶盛昌,黃月純,魏剛.  廣東藥學(xué)院學(xué)報. 2015(06)
[3]苦參中3種生物堿成分在Caco-2細(xì)胞中的吸收特性及在大鼠肝微粒體中的代謝速率[J]. 張海,張雯,孫峰峰,余靜,柴逸峰,張國慶.  第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報. 2015(11)
[4]氧化苦參堿在大鼠腸道的吸收與代謝機(jī)制[J]. 蔡麗云,吳莉莉,于小明,劉俊瑾,韓偉超,魏強(qiáng),唐斕.  藥學(xué)學(xué)報. 2015(10)
[5]抗腫瘤活性茯苓多糖的提取、純化與結(jié)構(gòu)分析[J]. 黃燦,王玉明,趙駿.  中草藥. 2012(11)
[6]石斛酚與丁香酸聯(lián)合抗白內(nèi)障作用及其機(jī)制研究[J]. 刁紅星,易燕群,戚輝,高欣欣,方花,魏小勇,顧瓊,王嶺,王崢濤,古練權(quán).  中國中藥雜志. 2012(16)
[7]三七根及花總皂苷抗腫瘤細(xì)胞誘導(dǎo)的血小板聚集研究[J]. 可燕,蔣嘉燁,王現(xiàn)珍,曾雄義,朱春赟.  中藥材. 2010(01)
[8]中藥及其有效成分抗腫瘤作用機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 徐韜,許瑞安.  華僑大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2009(04)
[9]紫杉醇誘導(dǎo)人胃癌MGC803細(xì)胞凋亡作用研究[J]. 鄒宇,費(fèi)洪新,黃小義,孫麗慧,李林.  中國醫(yī)藥導(dǎo)報. 2008(11)
[10]紫杉醇對肺腺癌A549細(xì)胞株增殖和凋亡的影響[J]. 高寶安,杜春玲,陳世雄,丁文柏,楊俊.  天津醫(yī)藥. 2008(02)

博士論文
[1]芝麻素對人肝癌細(xì)胞系HepG2的抑制作用及機(jī)理研究[D]. 鄧鵬裔.華中科技大學(xué) 2013
[2]人參多糖免疫活性及抗腫瘤作用[D]. 倪維華.東北師范大學(xué) 2010

碩士論文
[1]川產(chǎn)道地藥材疊鞘石斛的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[D]. 吳強(qiáng).成都中醫(yī)藥大學(xué) 2013
[2]中藥大黃抗腫瘤和自然免疫調(diào)節(jié)作用的試驗研究[D]. 孫麗霞.河北醫(yī)科大學(xué) 2005



本文編號：3356355