發(fā)布時(shí)間：2021-08-20 19:32

　　目的探究尖葉假龍膽與半枝蓮配伍對(duì)人肝癌細(xì)胞Bel-7402及H22荷瘤小鼠腫瘤細(xì)胞的促凋亡作用。方法體外實(shí)驗(yàn):體外培養(yǎng)人肝癌細(xì)胞Bel-7402,制備尖葉假龍膽、半枝蓮及各配伍組含藥血清。實(shí)驗(yàn)分為空白組、尖提組、半提組、1:1組、2:1組、1:2組及陽(yáng)性藥組:采用MTT法檢測(cè)各組細(xì)胞OD值并計(jì)算細(xì)胞增殖抑制率;應(yīng)用流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)各組細(xì)胞凋亡率及細(xì)胞周期分布。體內(nèi)實(shí)驗(yàn):建立H22荷瘤小鼠模型,隨機(jī)分為模型組、尖提組、半提組、1:1組、2:1組、1:2組、陽(yáng)性藥組及空白對(duì)照組:觀察各組小鼠一般生存狀態(tài),測(cè)量瘤重并計(jì)算抑瘤率;各組瘤組織包埋切片處理后進(jìn)行HE染色、TUNEL染色觀察腫瘤細(xì)胞凋亡情況;通過(guò)免疫組化檢測(cè)腫瘤組織內(nèi)Bax、Bcl-2,caspase-3表達(dá)水平。結(jié)果1.體外實(shí)驗(yàn)1.1MTT法檢測(cè)結(jié)果顯示,與空白組比較,各給藥組均能抑制Bel-7402細(xì)胞增殖,各中藥組中2:1組抑制率最高。1.2流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡率結(jié)果顯示,與空白組比較,各給藥組均能誘導(dǎo)Bel-7402細(xì)胞凋亡,各中藥組中2:1組細(xì)胞凋亡率最高。1.3流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期分布結(jié)果顯示,與空白組比較,各給藥組... 

【文章來(lái)源】：黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)黑龍江省

【文章頁(yè)數(shù)】：72 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
縮略語(yǔ)表
中文摘要
ABSTRACT
引言
文獻(xiàn)綜述
    1. 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì)原發(fā)性肝癌的研究進(jìn)展
        1.1 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì)肝癌的認(rèn)識(shí)
        1.2 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì)肝癌病因及發(fā)病機(jī)制的研究
        1.3 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì)肝癌的治療現(xiàn)狀
    2. 中醫(yī)對(duì)原發(fā)性肝癌的研究進(jìn)展
        2.1 中醫(yī)對(duì)肝癌的認(rèn)識(shí)
        2.2 病因病機(jī)
        2.3 辨證論治
        2.4 中藥抗肝癌作用機(jī)制的研究進(jìn)展
    3. 尖葉假龍膽的研究進(jìn)展
        3.1 尖葉假龍膽的藥材研究
        3.2 尖葉假龍膽的化學(xué)成分研究
        3.3 尖葉假龍膽抗肝癌作用研究
    4. 半枝蓮的研究進(jìn)展
        4.1 半枝蓮的藥材研究
        4.2 半枝蓮的化學(xué)成分研究
        4.3 半枝蓮抗肝癌作用研究
實(shí)驗(yàn)研究
    體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)研究
        1. 實(shí)驗(yàn)材料
            1.1 儀器設(shè)備
            1.2 主要試劑
            1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
            1.4 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
        2. 實(shí)驗(yàn)方法
            2.1 藥物制備
            2.2 含藥血清制備
            2.3 細(xì)胞培養(yǎng)
            2.4 實(shí)驗(yàn)分組
            2.5 MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖情況
            2.6 流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡和周期分布
            2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
        3. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
            3.1 MTT法檢測(cè)結(jié)果
            3.2 流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡結(jié)果
            3.3 流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期結(jié)果
    動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究
        1. 實(shí)驗(yàn)材料
            1.1 儀器設(shè)備
            1.2 主要試劑
            1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
            1.4 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
        2. 實(shí)驗(yàn)方法
            2.1 H_(22)細(xì)胞的培養(yǎng)
            2.2 藥物制備
            2.3 荷瘤小鼠模型建立
            2.4 實(shí)驗(yàn)分組
            2.5 觀察荷瘤小鼠一般生存狀態(tài)
            2.6 腫瘤抑制率的測(cè)定
            2.7 HE染色觀察腫瘤組織
            2.8 TUNEL法觀察腫瘤細(xì)胞凋亡情況
            2.9 免疫組化檢測(cè)腫瘤組織Bax、 Bcl-2、活化的caspase-3水平
            2.10 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
        3. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
            3.1 荷瘤小鼠一般生存狀態(tài)
            3.2 腫瘤抑制率測(cè)定結(jié)果
            3.3 HE染色腫瘤組織結(jié)果
            3.4 TUNEL染色觀察腫瘤組織凋亡情況結(jié)果
            3.5 免疫組化檢測(cè)腫瘤組織Bax、Bcl-2、caspase-3水平結(jié)果
討論
    1. 實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵饬x
    2. 中藥血清藥理學(xué)
    3. 藥物及模型的選擇
    4. 指標(biāo)的選擇及結(jié)果評(píng)價(jià)
        4.1 體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
        4.2 體內(nèi)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
發(fā)表論文情況
個(gè)人簡(jiǎn)歷


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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本文編號(hào)：3354100