目的探究尖葉假龍膽與半枝蓮配伍對人肝癌細(xì)胞Bel-7402及H22荷瘤小鼠腫瘤細(xì)胞的促凋亡作用。方法體外實驗:體外培養(yǎng)人肝癌細(xì)胞Bel-7402,制備尖葉假龍膽、半枝蓮及各配伍組含藥血清。實驗分為空白組、尖提組、半提組、1:1組、2:1組、1:2組及陽性藥組:采用MTT法檢測各組細(xì)胞OD值并計算細(xì)胞增殖抑制率;應(yīng)用流式細(xì)胞技術(shù)檢測各組細(xì)胞凋亡率及細(xì)胞周期分布。體內(nèi)實驗:建立H22荷瘤小鼠模型,隨機(jī)分為模型組、尖提組、半提組、1:1組、2:1組、1:2組、陽性藥組及空白對照組:觀察各組小鼠一般生存狀態(tài),測量瘤重并計算抑瘤率;各組瘤組織包埋切片處理后進(jìn)行HE染色、TUNEL染色觀察腫瘤細(xì)胞凋亡情況;通過免疫組化檢測腫瘤組織內(nèi)Bax、Bcl-2,caspase-3表達(dá)水平。結(jié)果1.體外實驗1.1MTT法檢測結(jié)果顯示,與空白組比較,各給藥組均能抑制Bel-7402細(xì)胞增殖,各中藥組中2:1組抑制率最高。1.2流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡率結(jié)果顯示,與空白組比較,各給藥組均能誘導(dǎo)Bel-7402細(xì)胞凋亡,各中藥組中2:1組細(xì)胞凋亡率最高。1.3流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞周期分布結(jié)果顯示,與空白組比較,各給藥組... 

【文章來源】：黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)黑龍江省

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
縮略語表
中文摘要
ABSTRACT
引言
文獻(xiàn)綜述
    1. 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對原發(fā)性肝癌的研究進(jìn)展
        1.1 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對肝癌的認(rèn)識
        1.2 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對肝癌病因及發(fā)病機(jī)制的研究
        1.3 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對肝癌的治療現(xiàn)狀
    2. 中醫(yī)對原發(fā)性肝癌的研究進(jìn)展
        2.1 中醫(yī)對肝癌的認(rèn)識
        2.2 病因病機(jī)
        2.3 辨證論治
        2.4 中藥抗肝癌作用機(jī)制的研究進(jìn)展
    3. 尖葉假龍膽的研究進(jìn)展
        3.1 尖葉假龍膽的藥材研究
        3.2 尖葉假龍膽的化學(xué)成分研究
        3.3 尖葉假龍膽抗肝癌作用研究
    4. 半枝蓮的研究進(jìn)展
        4.1 半枝蓮的藥材研究
        4.2 半枝蓮的化學(xué)成分研究
        4.3 半枝蓮抗肝癌作用研究
實驗研究
    體外細(xì)胞實驗研究
        1. 實驗材料
            1.1 儀器設(shè)備
            1.2 主要試劑
            1.3 實驗動物
            1.4 實驗細(xì)胞
        2. 實驗方法
            2.1 藥物制備
            2.2 含藥血清制備
            2.3 細(xì)胞培養(yǎng)
            2.4 實驗分組
            2.5 MTT法檢測細(xì)胞增殖情況
            2.6 流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡和周期分布
            2.7 統(tǒng)計學(xué)處理
        3. 實驗結(jié)果
            3.1 MTT法檢測結(jié)果
            3.2 流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡結(jié)果
            3.3 流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞周期結(jié)果
    動物實驗研究
        1. 實驗材料
            1.1 儀器設(shè)備
            1.2 主要試劑
            1.3 實驗動物
            1.4 實驗細(xì)胞
        2. 實驗方法
            2.1 H_(22)細(xì)胞的培養(yǎng)
            2.2 藥物制備
            2.3 荷瘤小鼠模型建立
            2.4 實驗分組
            2.5 觀察荷瘤小鼠一般生存狀態(tài)
            2.6 腫瘤抑制率的測定
            2.7 HE染色觀察腫瘤組織
            2.8 TUNEL法觀察腫瘤細(xì)胞凋亡情況
            2.9 免疫組化檢測腫瘤組織Bax、 Bcl-2、活化的caspase-3水平
            2.10 統(tǒng)計學(xué)處理
        3. 實驗結(jié)果
            3.1 荷瘤小鼠一般生存狀態(tài)
            3.2 腫瘤抑制率測定結(jié)果
            3.3 HE染色腫瘤組織結(jié)果
            3.4 TUNEL染色觀察腫瘤組織凋亡情況結(jié)果
            3.5 免疫組化檢測腫瘤組織Bax、Bcl-2、caspase-3水平結(jié)果
討論
    1. 實驗?zāi)康暮鸵饬x
    2. 中藥血清藥理學(xué)
    3. 藥物及模型的選擇
    4. 指標(biāo)的選擇及結(jié)果評價
        4.1 體外細(xì)胞實驗
        4.2 體內(nèi)動物實驗
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
發(fā)表論文情況
個人簡歷


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]中藥治療肝癌機(jī)制的研究進(jìn)展[J]. 賀珊,廖長秀.  中成藥. 2017(01)
[2]半枝蓮含藥血清對人卵巢癌SKOV3細(xì)胞增殖的影響[J]. 李冀,張睿蘇,高彥宇,張鐵林,馬育軒,蘆沖.  中醫(yī)藥信息. 2016(03)
[3]半枝蓮醇提物含藥血清對人結(jié)腸癌HT-29細(xì)胞增殖、凋亡和周期的影響[J]. 蘆沖,張睿蘇,高彥宇,馬育軒,趙志宏,王琳,李杰明,李冀.  中醫(yī)藥學(xué)報. 2016(02)
[4]齊墩果酸誘導(dǎo)人肝癌Bel-7402細(xì)胞G2/M期阻滯及凋亡的機(jī)制研究[J]. 劉玲,趙建龍,王建剛.  中國中藥雜志. 2015(24)
[5]齊墩果酸抗原發(fā)性肝癌作用機(jī)制的研究[J]. 王悅,呂邵娃,孫爽,李永吉.  哈爾濱商業(yè)大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2014(06)
[6]中國2010年惡性腫瘤發(fā)病與死亡[J]. 陳萬青,張思維,曾紅梅,鄭榮壽,鄒小農(nóng),趙平,吳良有,李光琳,赫捷.  中國腫瘤. 2014(01)
[7]半枝蓮對大鼠原發(fā)性肝癌組織中ADAM10表達(dá)的影響[J]. 康志強(qiáng),李平,段剛峰.  腫瘤. 2013(10)
[8]熊果酸抑制人肝癌SMMC-7721細(xì)胞生長及凋亡的實驗研究[J]. 崔兵兵,程麗芳,侯立靜,楊青,劉瑾,牟艷玲,閆雪生,李克明.  中國實驗方劑學(xué)雜志. 2013(18)
[9]補(bǔ)腎健脾方及其拆方對移植性原發(fā)性肝癌小鼠腫瘤生長的影響及差異研究[J]. 鐘薏,羅春蕾,張安君,趙喜,周榮耀,劉慧.  中國中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2011(02)
[10]補(bǔ)腎健脾中藥聯(lián)合5-FU對肝癌HepG2細(xì)胞增殖和凋亡影響的血清藥理學(xué)研究[J]. 閔亮.  遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報. 2010(08)

博士論文
[1]參桃軟肝膠囊抗肝癌作用及其機(jī)理初探[D]. 賈建偉.廣州中醫(yī)藥大學(xué) 2013
[2]中藥抗瘤膠囊抗人肝癌細(xì)胞的血清藥理學(xué)研究[D]. 閆智勇.成都中醫(yī)藥大學(xué) 2001

碩士論文
[1]尖葉假龍膽化學(xué)成分及含量測定研究[D]. 魏茜.北京中醫(yī)藥大學(xué) 2014
[2]半枝蓮抗腫瘤活性成分的研究[D]. 黃敏.湖北中醫(yī)學(xué)院 2006



本文編號：3354100