莪術(shù)醇抗人肺癌H460細(xì)胞的藥效學(xué)及其作用機(jī)制研究
發(fā)布時(shí)間:2021-08-14 23:35
目前癌癥的治療仍是公認(rèn)的難題,我國(guó)肺癌的發(fā)病率及死亡率仍居高不下,傳統(tǒng)的化療藥物的選擇性較低,在殺死癌細(xì)胞的往往會(huì)對(duì)機(jī)體某些正常細(xì)胞也造成一定的損害,嚴(yán)重影響患者治療療效和生活質(zhì)量甚至威脅生命,因此,對(duì)肺癌的靶向性治療進(jìn)行研究并尋找具有高效低毒的抗肺癌新藥顯得相當(dāng)重要。有著悠久歷史的中藥蘊(yùn)藏著我們未知治療領(lǐng)域的巨大成藥潛力,采用現(xiàn)代分子藥理學(xué)的技術(shù)方法對(duì)中藥單體的藥效評(píng)價(jià)及作用機(jī)制的闡明,可為中藥現(xiàn)代化發(fā)展提供新思路,故對(duì)莪術(shù)醇的抗癌作用的深入探討及其作用靶標(biāo)的充分闡明意義重大,本文通過以下方面對(duì)莪術(shù)醇的藥效進(jìn)行探究:第一節(jié):研究莪術(shù)醇在體外對(duì)H460肺癌細(xì)胞生長(zhǎng)的影響:(1)采用MTT法篩選莪術(shù)醇抑制H460肺癌細(xì)胞株生長(zhǎng)的有效作用濃度和時(shí)間,并利用正常肺成纖維細(xì)胞株MRC-5作為衡量藥物作用毒性的大小,結(jié)果發(fā)現(xiàn),隨著莪術(shù)醇濃度的增大與時(shí)間的延長(zhǎng),其抑制人肺癌H460細(xì)胞生長(zhǎng)的作用越明顯,IC50值分別為:248.2μmol/L(24 h),165.3μmol/L(48 h),105.3μmol/L(72 h),并表現(xiàn)出對(duì)人正常肺纖維MRC-5細(xì)胞無明顯毒性作用...
【文章來源】:廣東藥科大學(xué)廣東省
【文章頁數(shù)】:72 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
細(xì)胞凋亡相關(guān)部分信號(hào)通路Fig.1.Thepartofapoptosisrelatedsignalpathway.
A:H460 細(xì)胞的抑制率;B:MRC-5 細(xì)胞的抑制率圖 1-1. 不同濃度的莪術(shù)醇作用不同時(shí)間對(duì) H460 和 MRC-5 細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率的影響Fig.1-1. The cell inhibition effect of H460 and MRC-5 cells incubated with different concentrationof curcumol for different times.3.2 臺(tái)盼藍(lán)排染法檢測(cè)莪術(shù)醇對(duì)細(xì)胞的增殖抑制作用結(jié)果通過顯微鏡下觀察計(jì)數(shù),實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表 1-2 所示,空白對(duì)照組與 1.6%乙醇溶媒對(duì)照組在 24、48、72 h 時(shí)的細(xì)胞存活率均達(dá) 90%以上,說明 1.6%的乙醇對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)無明顯的影響。經(jīng) GraphPad prism 5.0 軟件模擬得到各時(shí)間點(diǎn)的 IC50值分別為:307.8 μmol/L(24 h),175.9 μmol/L(48 h),112.4 μmol/L(72 h),說明莪術(shù)醇對(duì) H460 細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用呈明顯的時(shí)間與濃度依賴性(p<0.01)。表 1-2. 不同濃度的莪術(shù)醇作用不同時(shí)間對(duì) H460 細(xì)胞存活率的影響(%, Mean±SD, n=3)Tab.1-2. The cell viability effect of H460 cells incubated with different concentration of curcumolfor different times(%, Mean±SD, n=3).
測(cè)緩沖液:裂解液=900 μL:100 μL)配制如表 3-1 中的濃度作為標(biāo)準(zhǔn)品,各取 100μL 到 96 孔細(xì)胞培養(yǎng)板中,用酶標(biāo)儀于 405 nm 波長(zhǎng)處測(cè)定 OD 值,并計(jì)算凈 OD值:凈 OD 值=OD各組樣品-OD空白對(duì)照組,以各組凈 OD 值為 Y 軸,ρNA 的濃度為 X 軸繪圖并擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線 y= 321.32x-0.2326,R2=0.9973,如圖 3-1。表 3-1. Caspase3 分光光度計(jì)法標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制Tab.3-1. Drawing of the standard curve of Caspase3 spectrophotometer.組別 ρNA 濃度(μmol/L) 凈 OD 值空白組 0 0C110 0.019C220 0.074C350 0.146C4100 0.325C5200 0.615
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]EGFR基因變異對(duì)吉非替尼治療非小細(xì)胞肺癌臨床療效的影響研究進(jìn)展[J]. 王陽,朱江. 海南醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2018(02)
[2]紫杉醇治療子宮頸癌與子宮內(nèi)膜癌的效果研究[J]. 劉永剛. 中國(guó)繼續(xù)醫(yī)學(xué)教育. 2017(14)
[3]溶劑及其體積分?jǐn)?shù)對(duì)6種肺癌細(xì)胞的細(xì)胞毒作用[J]. 董芳蕊,臧詩蕾,黎莉莉,郭紀(jì)全,臧林泉. 中國(guó)藥理學(xué)通報(bào). 2017(04)
[4]PI3K/AKT/mTOR信號(hào)通路在誘導(dǎo)膠質(zhì)瘤細(xì)胞凋亡中的作用[J]. 張春,李清漪,董海影,牛建國(guó),牛英才,王峰. 中國(guó)新藥雜志. 2016(16)
[5]蝦青素通過阻斷JAK1/STAT3通路抑制肺癌A549細(xì)胞增殖并促進(jìn)其凋亡[J]. 吳春濤,張晉冀,劉鐵楠,焦桂梅,李長(zhǎng)仔,胡寶山. 細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2016(06)
[6]淫羊藿素通過PI3K/AKT信號(hào)通路抑制非小細(xì)胞肺癌H460細(xì)胞增殖[J]. 馬丁丁,陳艷,黃尤光,劉馨,金從國(guó),王熙才. 現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué). 2016(14)
[7]分子靶向藥特羅凱對(duì)晚期肺癌的抗腫瘤活性分析[J]. 鄔紅霞,矯艷艷,冒小燕. 實(shí)用癌癥雜志. 2015(08)
[8]格列衛(wèi)激活caspase-3誘導(dǎo)K562細(xì)胞凋亡[J]. 蒲俏虹,吳清清,金小寶,王偉章. 藥學(xué)學(xué)報(bào). 2014(08)
[9]肺癌的流行病學(xué)及治療現(xiàn)狀[J]. 姚曉軍,劉倫旭. 現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué). 2014(08)
[10]抗腫瘤中藥單體研究進(jìn)展[J]. 秦崢,鄭尚季. 中國(guó)藥物評(píng)價(jià). 2014(02)
碩士論文
[1]莪術(shù)醇通過ROS/JNK信號(hào)通路誘導(dǎo)肺癌細(xì)胞凋亡[D]. 董芳蕊.廣東藥科大學(xué) 2017
[2]新型抗腫瘤藥物不良反應(yīng)調(diào)查分析[D]. 王亞楠.山東大學(xué) 2014
本文編號(hào):3343390
【文章來源】:廣東藥科大學(xué)廣東省
【文章頁數(shù)】:72 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
細(xì)胞凋亡相關(guān)部分信號(hào)通路Fig.1.Thepartofapoptosisrelatedsignalpathway.
A:H460 細(xì)胞的抑制率;B:MRC-5 細(xì)胞的抑制率圖 1-1. 不同濃度的莪術(shù)醇作用不同時(shí)間對(duì) H460 和 MRC-5 細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率的影響Fig.1-1. The cell inhibition effect of H460 and MRC-5 cells incubated with different concentrationof curcumol for different times.3.2 臺(tái)盼藍(lán)排染法檢測(cè)莪術(shù)醇對(duì)細(xì)胞的增殖抑制作用結(jié)果通過顯微鏡下觀察計(jì)數(shù),實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表 1-2 所示,空白對(duì)照組與 1.6%乙醇溶媒對(duì)照組在 24、48、72 h 時(shí)的細(xì)胞存活率均達(dá) 90%以上,說明 1.6%的乙醇對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)無明顯的影響。經(jīng) GraphPad prism 5.0 軟件模擬得到各時(shí)間點(diǎn)的 IC50值分別為:307.8 μmol/L(24 h),175.9 μmol/L(48 h),112.4 μmol/L(72 h),說明莪術(shù)醇對(duì) H460 細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用呈明顯的時(shí)間與濃度依賴性(p<0.01)。表 1-2. 不同濃度的莪術(shù)醇作用不同時(shí)間對(duì) H460 細(xì)胞存活率的影響(%, Mean±SD, n=3)Tab.1-2. The cell viability effect of H460 cells incubated with different concentration of curcumolfor different times(%, Mean±SD, n=3).
測(cè)緩沖液:裂解液=900 μL:100 μL)配制如表 3-1 中的濃度作為標(biāo)準(zhǔn)品,各取 100μL 到 96 孔細(xì)胞培養(yǎng)板中,用酶標(biāo)儀于 405 nm 波長(zhǎng)處測(cè)定 OD 值,并計(jì)算凈 OD值:凈 OD 值=OD各組樣品-OD空白對(duì)照組,以各組凈 OD 值為 Y 軸,ρNA 的濃度為 X 軸繪圖并擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線 y= 321.32x-0.2326,R2=0.9973,如圖 3-1。表 3-1. Caspase3 分光光度計(jì)法標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制Tab.3-1. Drawing of the standard curve of Caspase3 spectrophotometer.組別 ρNA 濃度(μmol/L) 凈 OD 值空白組 0 0C110 0.019C220 0.074C350 0.146C4100 0.325C5200 0.615
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[2]紫杉醇治療子宮頸癌與子宮內(nèi)膜癌的效果研究[J]. 劉永剛. 中國(guó)繼續(xù)醫(yī)學(xué)教育. 2017(14)
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[4]PI3K/AKT/mTOR信號(hào)通路在誘導(dǎo)膠質(zhì)瘤細(xì)胞凋亡中的作用[J]. 張春,李清漪,董海影,牛建國(guó),牛英才,王峰. 中國(guó)新藥雜志. 2016(16)
[5]蝦青素通過阻斷JAK1/STAT3通路抑制肺癌A549細(xì)胞增殖并促進(jìn)其凋亡[J]. 吳春濤,張晉冀,劉鐵楠,焦桂梅,李長(zhǎng)仔,胡寶山. 細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2016(06)
[6]淫羊藿素通過PI3K/AKT信號(hào)通路抑制非小細(xì)胞肺癌H460細(xì)胞增殖[J]. 馬丁丁,陳艷,黃尤光,劉馨,金從國(guó),王熙才. 現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué). 2016(14)
[7]分子靶向藥特羅凱對(duì)晚期肺癌的抗腫瘤活性分析[J]. 鄔紅霞,矯艷艷,冒小燕. 實(shí)用癌癥雜志. 2015(08)
[8]格列衛(wèi)激活caspase-3誘導(dǎo)K562細(xì)胞凋亡[J]. 蒲俏虹,吳清清,金小寶,王偉章. 藥學(xué)學(xué)報(bào). 2014(08)
[9]肺癌的流行病學(xué)及治療現(xiàn)狀[J]. 姚曉軍,劉倫旭. 現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué). 2014(08)
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碩士論文
[1]莪術(shù)醇通過ROS/JNK信號(hào)通路誘導(dǎo)肺癌細(xì)胞凋亡[D]. 董芳蕊.廣東藥科大學(xué) 2017
[2]新型抗腫瘤藥物不良反應(yīng)調(diào)查分析[D]. 王亞楠.山東大學(xué) 2014
本文編號(hào):3343390
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