受孕后母體如果攝入過量的乙醇會使機(jī)體產(chǎn)生高水平的活性氧（ROS）,而ROS的大量聚集會干擾一碳代謝中相關(guān)酶的活性,從而干擾了早期胚胎表觀遺傳的正確建立,影響胚胎的正常發(fā)育。甜菜堿存在于胚胎早期發(fā)育的各個時期并且具有穩(wěn)定的水平,具有滲透保護(hù)作用和抗氧化功能,并且可以作為甲基供體的來源參與一碳代謝。本文主要通過體外培養(yǎng)和子宮移植以及免疫熒光染色系統(tǒng)分析了在培養(yǎng)基中添加乙醇和甜菜堿對小鼠胚胎發(fā)育的直接影響,從而驗證了甜菜堿可以有效地修復(fù)受乙醇損害后的胚胎發(fā)育并初步探究了甜菜堿的這種修復(fù)機(jī)制。1.乙醇濃度與胚胎發(fā)育之間的劑量效應(yīng)關(guān)系通過在培養(yǎng)基中添加不同濃度的乙醇,觀察乙醇對小鼠胚胎發(fā)育的直接影響并統(tǒng)計囊胚發(fā)育率,從而揭示了乙醇與胚胎發(fā)育之間的劑量效應(yīng)關(guān)系。同時我們研究發(fā)現(xiàn)在使用含有1%乙醇的培養(yǎng)基進(jìn)行早期胚胎的體外培養(yǎng),會使胚胎的早期發(fā)育產(chǎn)生顯著影響,并且乙醇對于早期胚胎的有害影響會在整個發(fā)育時期一直存在,包括較低囊胚的形成和植入的比率以及植入后胎兒發(fā)育的惡化。2.甜菜堿在胚胎培養(yǎng)基中的補(bǔ)充可以修復(fù)乙醇對小鼠胚胎發(fā)育的損傷作用通過在培養(yǎng)基中添加50μg/ml甜菜堿可以有效恢復(fù)和緩解乙醇對于早... 

【文章來源】：阜陽師范大學(xué)安徽省

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

不同濃度的乙醇對植入前胚胎發(fā)育的影響

阜陽師范學(xué)院碩士學(xué)位論文料），發(fā)現(xiàn)對照組與試驗組沒有明顯的差異，甚至實驗組胚胎囊胚的生成率略高于對照組胚胎。通過對比以前的研究，當(dāng)培養(yǎng)基乙醇濃度達(dá)到 10％時，小鼠胚胎的正常發(fā)育在 2 細(xì)胞階段就完全阻滯了。與之對應(yīng)的，在我們的實驗中當(dāng)乙醇濃度在 2.5％時，所培養(yǎng)的胚胎都在 2 細(xì)胞階段發(fā)育終止。因此，在隨后的工作中，我們使用含有 1％或1.5％乙醇的 KSOM 培養(yǎng)基來作為我們后續(xù)實驗的乙醇劑量標(biāo)準(zhǔn)，從而進(jìn)一步探究培養(yǎng)基中甜菜堿的補(bǔ)充是否有助于改善乙醇對小鼠胚胎的損傷作用并解釋其潛在的機(jī)制。2.3.2 甜菜堿可以修復(fù)乙醇對植入前胚胎發(fā)育的影響

20圖 3. 乙醇和甜菜堿對囊胚植入的影響。Figure 3. Effect of ethanol and betaine on blastocyst implantation.用于移植的囊胚從各個處理中獲得，包括對照組（NC），胚胎培養(yǎng)基中不含菜堿；甜菜堿組（Bet），胚胎培養(yǎng)基中含有甜菜堿（50μg/ ml）；乙醇組（E培養(yǎng)基中含乙醇（v / v 1％）；甜菜堿+乙醇組（Eth + Bet），胚胎培養(yǎng)基中含堿（50μg/ ml）和乙醇（v / v 1％）。在實驗中，將十枚囊胚移植到假孕鼠每邊角中。移植 24 和 30 小時后，靜脈注射 0.1ml 1％芝加哥藍(lán) B ，5 分鐘后檢位，如 Paria 的工作（Paria BC 等人，1993）所述。（A）乙醇或（和）甜菜養(yǎng)基對囊胚植入的影響。 通過囊胚轉(zhuǎn)移到子宮邊角上 24 小時后注射 100μl 的

【參考文獻(xiàn)】：
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碩士論文
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本文編號：3314174