目的:作為催化氧化脫甲基的酶,TET1（ten-eleven translocation）酶能夠誘導(dǎo)5-甲基胞嘧啶（5mC）發(fā)生羥化生成5-羥甲基胞嘧啶（5hmC）,而后,又被證明能夠催化胸腺嘧啶（T）,轉(zhuǎn)化生成5-羥甲基尿嘧啶（5hmU）。研究表明許多中藥成分能抑制其作用,但機(jī)制尚未明確。為了探索藥物對TET1酶的作用,首先需要對TET1酶作用機(jī)制有更深入的了解。本實(shí)驗(yàn)旨在從化學(xué)角度上研究TET1酶的作用機(jī)制以及其誘導(dǎo)的羥基化反應(yīng)的選擇性,從而總結(jié)出此類反應(yīng)的一般規(guī)律,為研究核酸氧化脫甲基作用提供依據(jù),為闡明核酸羥基化與蛋白羥基化的機(jī)制提供化學(xué)依據(jù),為開發(fā)基于表觀遺傳學(xué)的新型的藥物提供理論參考。方法:本實(shí)驗(yàn)以TET1酶為研究對象,選取具有代表性的有機(jī)化合物作為底物,包括環(huán)己烷、甲基環(huán)己烷、乙基苯、異丙苯、水楊酸甲酯、水楊酸乙酯、2-氨基-4,6-二甲基嘧啶、6-甲基嘌呤、L-甲硫氨酸、茶堿以及5-乙基尿嘧啶等,在Fe（Ⅱ）和α-KG存在的條件下發(fā)生體外反應(yīng)。反應(yīng)液采用氣質(zhì)聯(lián)用和液質(zhì)聯(lián)用的檢測方法分析,通過分析產(chǎn)物質(zhì)譜圖中的碎片離子峰,判斷產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)以及被取代H原子的位置和發(fā)生反應(yīng)C-... 

【文章來源】：廣州中醫(yī)藥大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

與ShmC結(jié)合的TETl酶結(jié)構(gòu)fuel

廣州中醫(yī)巧大學(xué)２０１７屆碩女學(xué)位論文??澄黨猿道沒公：々Ａ燃裝議纖絞費(fèi)．電芯游屋酶巧田；巧總?cè)唬藿K??ａ—麵??Ｋ：．：ｙ?左巧ｎ幌一‘，＂畫??■魯?ｉｆ?！??，，‘五…．．??圖４反應(yīng)裝置圖??２．２丄２?ＧＣ－ＭＳ聯(lián)用分析條件：??柱型號：Ａｇｉｌｅｎｔ?１９０９１Ｓ－４３３?３２５°Ｃ（最高溫度），ＨＰ－５ＭＳ?５〇／〇Ｐｈｅｎｙｌ?Ｍｅｔｈｙｌ?Ｓｉｌｏｘ毛細(xì)柱３０．０ｘ２５０叫ｎｘ０．２５＾ｍｌ標(biāo)稱。??升溫程序：起始溫度８０°Ｃ，維持３ｍｉｎ，?ｌＵ２０°Ｃ／ｍｉｎ的升溫速率升至１８０°Ｃ，Ｗ?１５°Ｃ／ｍｉｎ的升溫速率升至終止溫度２８０°Ｃ。??２．２．２?ＴＥＴ１醇介導(dǎo)的Ｔ怒基化反應(yīng)的結(jié)果與討論??

圖４反應(yīng)裝置圖??ＭＳ聯(lián)用分析條件：??ｉｌｅｎｔ?１９０９１Ｓ－４３３?３２５°Ｃ（最高溫度），ＨＰ－５ＭＳ?５〇／〇Ｐｈｅｎｙｌ?Ｍｅｔｈｙｌ?０ｘ２５０叫ｎｘ０．２５＾ｍｌ標(biāo)稱。??起始溫度８０°Ｃ，維持３ｍｉｎ，?ｌＵ２０°Ｃ／ｍｉｎ的升溫速率升至１８ｎ的升溫速率升至終止溫度２８０°Ｃ。??醇介導(dǎo)的Ｔ怒基化反應(yīng)的結(jié)果與討論??豐度?離子３百Ｓ?（３Ｓ７．７到３Ｓ８．７）?＊?ＳｈｍＵ??８０００００ＣＨ?２１??７００００００?Ａ?ｉ??６００００００??５００００００．??４００００００－??３００００００??２０００如０？??１００００００－??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3299200