目的:探討三七總皂苷（PNS）對缺氧缺糖/復(fù)氧復(fù)糖（OGD/R）誘導(dǎo)的SH-SY5Y細胞焦亡的調(diào)控作用。方法:以O(shè)GD/R誘導(dǎo)構(gòu)建體外缺血再灌注SH-SY5Y細胞模型,觀察PNS對SH-SY5Y細胞活力（CCK-8法）及細胞膜通透性[表示為乳酸脫氫酶（LDH）漏出率和碘化丙啶（PI）染色陽性細胞比例]的影響,分析PNS對細胞中g(shù)asdermin D（GSDMD）、GSDMD N端片段（GSDMD-N）、caspase-1和caspase-4蛋白水平變化以及白細胞介素1β（IL-1β）和IL-18釋放的影響。結(jié)果:OGD/R誘導(dǎo)的SH-SY5Y細胞活力顯著降低（P<0. 01）,LDH漏出率和PI染色陽性細胞比例顯著升高（P<0. 01）,即細胞通透性增加;細胞內(nèi)GSDMD、GSDMD-N、caspase-1及caspase-4蛋白水平顯著升高,IL-1β和IL-18釋放顯著增加（P<0. 01）。PNS干預(yù)可增強OGD/R抑制的SH-SY5Y細胞活力（P<0. 01）,降低LDH漏出率和PI染色陽性細胞比例（P<0. 05或P<0. 01）,即降低細... 

【文章來源】：中國病理生理雜志. 2020,36(07)北大核心CSCD

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【部分圖文】：

PNS對SH-SY5Y細胞活力的影響

PNS對SH-SY5Y細胞LDH漏出率的影響

細胞焦亡是一種炎癥相關(guān)的細胞死亡方式，介導(dǎo)了腦缺血再灌注損傷的發(fā)生和發(fā)展過程[16]，因此本研究從細胞焦亡途徑探討PNS抗腦缺血再灌注損傷機制。細胞焦亡的主要特征為細胞膜穿孔，通透性變大，細胞焦亡執(zhí)行蛋白GSDMD被活化[3]。本研究結(jié)果顯示OGD/R誘導(dǎo)的SH-SY5Y細胞LDH漏出率明顯升高，PI染色紅色熒光增強，PI陽性細胞比例明顯升高，表明細胞膜通透性增加，同時結(jié)果顯示OGD/R誘導(dǎo)的SH-SY5Y細胞GSDMD蛋白及其主要活化產(chǎn)物GSDMD-N的表達明顯增加，這與已有研究結(jié)果一致[4]，再結(jié)合OGD/R可誘導(dǎo)原代星形膠質(zhì)細胞和PC12細胞焦亡的報道[5,17]，表明OGD/R可誘導(dǎo)SH-SY5Y細胞焦亡。而PNS干預(yù)后LDH漏出率明顯降低，PI染色紅色熒光減弱，PI陽性細胞比例顯著降低，細胞GSDMD蛋白及其主要活化產(chǎn)物GSDMD-N的表達明顯減少，結(jié)合抑制GSDMD可以抑制細胞焦亡、減輕腦缺血再灌注損傷的報道[4-5]，提示PNS可能通過抑制細胞焦亡減輕OGD/R誘導(dǎo)的SH-SY5Y細胞損傷。圖4 PNS對SH-SY5Y細胞GSDMD和GSDMD-N蛋白表達水平的影響

【參考文獻】：
期刊論文
[1]細胞焦亡參與腦缺血再灌注損傷的初步研究[J]. 佘顏,胡雨琴,張荊,蒿玉興,蔡媛,張蟈蟈,王睿智,鄧常清,劉新春.  中國病理生理雜志. 2019(08)
[2]細胞焦亡與腦卒中[J]. 唐標,鄧常清.  生理學報. 2018(01)
[3]線粒體生成與腦缺血再灌注損傷的研究進展[J]. 王來,祝世功.  中國病理生理雜志. 2016(08)
[4]三七總皂苷抗腦缺血再灌注損傷的藥理研究進展[J]. 楊鵬飛,宋修云,陳乃宏.  藥學學報. 2016(07)
[5]Chinese preparation Xuesaitong promotes the mobilization of bone marrow mesenchymal stem cells in rats with cerebral infarction[J]. Jin-sheng Zhang,Bao-xia Zhang,Mei-mei Du,Xiao-ya Wang,Wei Li.  Neural Regeneration Research. 2016(02)



本文編號：3228280