補陽還五湯及其拆方對血腦屏障通透性的體外研究
發(fā)布時間:2021-06-10 15:26
目的:通過觀察補陽還五湯及其拆方對體外血腦屏障模型通透性的影響,探究治療缺血性中風(fēng)的療效機制,并明確不同構(gòu)成要素作用價值,為臨床組方用藥提供實驗室基礎(chǔ)。方法:本文從大鼠腦中提取出大腦為血環(huán)內(nèi)皮細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞,采用星型膠質(zhì)細(xì)胞和腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞建立體外BBB模型,建立共培養(yǎng)模型需要使用多孔底碟與12孔培養(yǎng)板配合使用,其底為一層多聚酯膜,其上遍布直徑為3um的小孔,以0.01%鼠尾膠包被多聚酯多孔膜。星型膠質(zhì)細(xì)胞第二代至80%融合時,消化、離心、計數(shù)、接種于多聚酯膜下面,細(xì)胞密度為5×104個/cm2,200ul/孔,加入DMEM培養(yǎng)基和b FGFlng/ml。24h后接種腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞第二代至80%融合時,消化、離心、計數(shù)、接種于多聚酯膜上面,細(xì)胞密度為5×104個/cm2,200ul/孔,培養(yǎng)基不變。48h后鏡下觀察細(xì)胞生長融合情況,并將體外BBB模型分為正常組、總方組、活血組和補氣組,每組設(shè)3個復(fù)孔。每組加入對應(yīng)含藥血清。通過辣根過氧化物酶(horsenadish peroxidase,HR...
【文章來源】:河南中醫(yī)藥大學(xué)河南省
【文章頁數(shù)】:36 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
前言
實驗材料與方法
1 實驗材料
1.1 實驗動物
1.2 實驗儀器
1.3 實驗試劑
1.4 實驗耗材
1.5 實驗藥品
2 實驗方法
2.1 制備含藥血清
2.1.1 實驗動物分組
2.1.2 灌胃
2.1.3 含藥血清的制備
2.2 BMEC和AS的提取和鑒定
2.2.1 大鼠BMEC的提取與鑒定
2.2.2 大鼠AS的提取與鑒定
2.3 細(xì)胞培養(yǎng)
2.3.1 細(xì)胞換液
2.3.2 細(xì)胞傳代
2.3.3 大鼠BMEC和AS的凍存與復(fù)蘇
2.4 體外血腦屏障模型的建立及鑒定
2.4.1 體外BBB模型的建立
2.4.2 BBBM的分組、給藥
2.4.3 體外血腦屏障模型的鑒定
3 統(tǒng)計學(xué)處理
結(jié)果
分析
結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄1
附錄2 文獻(xiàn)綜述
參考文獻(xiàn)
附錄3
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]血腦屏障的研究進(jìn)展[J]. 許兵,張俞,杜久林. 生理學(xué)報. 2016(03)
[2]血腦屏障開放方法研究進(jìn)展[J]. 張珉,張俊鈺,鐘武. 國際藥學(xué)研究雜志. 2016(01)
[3]補陽還五湯對大鼠局灶性腦缺血損傷血腦屏障的影響[J]. 饒曉,湯軼波,潘彥舒,劉希偉,劉洋,池名,馬英姿,牟天龍. 中國中醫(yī)藥信息雜志. 2014(06)
[4]補陽還五湯加減治療腦病的藥理研究及臨床應(yīng)用[J]. 姚軍強. 光明中醫(yī). 2012(12)
[5]緊密連接蛋白與血腦屏障[J]. 廖華寧,汪寧,王艷. 安徽醫(yī)藥. 2012(03)
[6]不同血腦屏障模型的建立及其功能特點[J]. 趙康峰,王翀,孔建,董力,蒲小平,張宏偉,白雪濤. 環(huán)境與健康雜志. 2012(02)
[7]周細(xì)胞的研究進(jìn)展[J]. 翟麗麗,楊迷玲,李爭艷,劉楊,王正彩,韓偉,王立峰. 現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué). 2011(08)
[8]芳香開竅藥對正常小鼠血腦屏障通透性的影響[J]. 倪彩霞,曾南,湯奇,唐永鑫,王建,夏厚林. 江蘇中醫(yī)藥. 2011(02)
[9]微波輻射后大鼠腦內(nèi)連接黏附分子-1表達(dá)與血腦屏障通透性的相關(guān)性研究[J]. 李翔,胡向軍,彭瑞云,高亞兵,王水明,王麗峰,董霽,趙黎,蘇鎮(zhèn)濤. 中華物理醫(yī)學(xué)與康復(fù)雜志. 2010 (11)
[10]緊密連接相關(guān)蛋白Claudin-5、ZO-1在大鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血后早期腦損傷中的表達(dá)及意義[J]. 陳鐸,袁江偉,宋磊,魏翔泰,關(guān)俊宏,劉云會,宗志紅. 中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2010(09)
本文編號:3222632
【文章來源】:河南中醫(yī)藥大學(xué)河南省
【文章頁數(shù)】:36 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
前言
實驗材料與方法
1 實驗材料
1.1 實驗動物
1.2 實驗儀器
1.3 實驗試劑
1.4 實驗耗材
1.5 實驗藥品
2 實驗方法
2.1 制備含藥血清
2.1.1 實驗動物分組
2.1.2 灌胃
2.1.3 含藥血清的制備
2.2 BMEC和AS的提取和鑒定
2.2.1 大鼠BMEC的提取與鑒定
2.2.2 大鼠AS的提取與鑒定
2.3 細(xì)胞培養(yǎng)
2.3.1 細(xì)胞換液
2.3.2 細(xì)胞傳代
2.3.3 大鼠BMEC和AS的凍存與復(fù)蘇
2.4 體外血腦屏障模型的建立及鑒定
2.4.1 體外BBB模型的建立
2.4.2 BBBM的分組、給藥
2.4.3 體外血腦屏障模型的鑒定
3 統(tǒng)計學(xué)處理
結(jié)果
分析
結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄1
附錄2 文獻(xiàn)綜述
參考文獻(xiàn)
附錄3
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]血腦屏障的研究進(jìn)展[J]. 許兵,張俞,杜久林. 生理學(xué)報. 2016(03)
[2]血腦屏障開放方法研究進(jìn)展[J]. 張珉,張俊鈺,鐘武. 國際藥學(xué)研究雜志. 2016(01)
[3]補陽還五湯對大鼠局灶性腦缺血損傷血腦屏障的影響[J]. 饒曉,湯軼波,潘彥舒,劉希偉,劉洋,池名,馬英姿,牟天龍. 中國中醫(yī)藥信息雜志. 2014(06)
[4]補陽還五湯加減治療腦病的藥理研究及臨床應(yīng)用[J]. 姚軍強. 光明中醫(yī). 2012(12)
[5]緊密連接蛋白與血腦屏障[J]. 廖華寧,汪寧,王艷. 安徽醫(yī)藥. 2012(03)
[6]不同血腦屏障模型的建立及其功能特點[J]. 趙康峰,王翀,孔建,董力,蒲小平,張宏偉,白雪濤. 環(huán)境與健康雜志. 2012(02)
[7]周細(xì)胞的研究進(jìn)展[J]. 翟麗麗,楊迷玲,李爭艷,劉楊,王正彩,韓偉,王立峰. 現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué). 2011(08)
[8]芳香開竅藥對正常小鼠血腦屏障通透性的影響[J]. 倪彩霞,曾南,湯奇,唐永鑫,王建,夏厚林. 江蘇中醫(yī)藥. 2011(02)
[9]微波輻射后大鼠腦內(nèi)連接黏附分子-1表達(dá)與血腦屏障通透性的相關(guān)性研究[J]. 李翔,胡向軍,彭瑞云,高亞兵,王水明,王麗峰,董霽,趙黎,蘇鎮(zhèn)濤. 中華物理醫(yī)學(xué)與康復(fù)雜志. 2010 (11)
[10]緊密連接相關(guān)蛋白Claudin-5、ZO-1在大鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血后早期腦損傷中的表達(dá)及意義[J]. 陳鐸,袁江偉,宋磊,魏翔泰,關(guān)俊宏,劉云會,宗志紅. 中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2010(09)
本文編號:3222632
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