目的:通過觀察補(bǔ)陽還五湯及其拆方對體外血腦屏障模型通透性的影響,探究治療缺血性中風(fēng)的療效機(jī)制,并明確不同構(gòu)成要素作用價值,為臨床組方用藥提供實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)。方法:本文從大鼠腦中提取出大腦為血環(huán)內(nèi)皮細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞,采用星型膠質(zhì)細(xì)胞和腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞建立體外BBB模型,建立共培養(yǎng)模型需要使用多孔底碟與12孔培養(yǎng)板配合使用,其底為一層多聚酯膜,其上遍布直徑為3um的小孔,以0.01%鼠尾膠包被多聚酯多孔膜。星型膠質(zhì)細(xì)胞第二代至80%融合時,消化、離心、計(jì)數(shù)、接種于多聚酯膜下面,細(xì)胞密度為5×10⁴個/cm²,200ul/孔,加入DMEM培養(yǎng)基和b FGFlng/ml。24h后接種腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞第二代至80%融合時,消化、離心、計(jì)數(shù)、接種于多聚酯膜上面,細(xì)胞密度為5×10⁴個/cm²,200ul/孔,培養(yǎng)基不變。48h后鏡下觀察細(xì)胞生長融合情況,并將體外BBB模型分為正常組、總方組、活血組和補(bǔ)氣組,每組設(shè)3個復(fù)孔。每組加入對應(yīng)含藥血清。通過辣根過氧化物酶（horsenadish peroxidase,HR... 

【文章來源】：河南中醫(yī)藥大學(xué)河南省

【文章頁數(shù)】：36 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
前言
實(shí)驗(yàn)材料與方法
    1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)動物
        1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        1.3 實(shí)驗(yàn)試劑
        1.4 實(shí)驗(yàn)耗材
        1.5 實(shí)驗(yàn)藥品
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 制備含藥血清
            2.1.1 實(shí)驗(yàn)動物分組
            2.1.2 灌胃
            2.1.3 含藥血清的制備
        2.2 BMEC和AS的提取和鑒定
            2.2.1 大鼠BMEC的提取與鑒定
            2.2.2 大鼠AS的提取與鑒定
        2.3 細(xì)胞培養(yǎng)
            2.3.1 細(xì)胞換液
            2.3.2 細(xì)胞傳代
            2.3.3 大鼠BMEC和AS的凍存與復(fù)蘇
        2.4 體外血腦屏障模型的建立及鑒定
            2.4.1 體外BBB模型的建立
            2.4.2 BBBM的分組、給藥
            2.4.3 體外血腦屏障模型的鑒定
    3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
結(jié)果
分析
結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄1
附錄2 文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
附錄3


【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號：3222632