廣西莪術中抗鼻咽癌活性成分開發(fā)及應用
發(fā)布時間：2021-06-09 17:08
目的:體外研究莪術醇對人鼻咽癌CNE-2細胞中IGF-1R/PI3K/Akt/GSK-3β通路及其下游分子的影響;探究莪術醇誘導的CNE-2細胞增殖抑制、周期阻滯、細胞凋亡效應及其潛在分子機制,為開發(fā)IGF-1R新型抑制劑,鑒定鼻咽癌分子靶向治療的有效靶點奠定基礎,并為提高莪術醇在腫瘤臨床治療應用中的有效性提供科學依據。方法:將對數生長期的CNE-2細胞接種于培養(yǎng)板中,施以濃度遞增的莪術醇（12.5、25、50、100μg/mL）進行干預,同時設置陰性對照組;MTT法評估不同濃度的莪術醇處理CNE-2細胞24、48、72、96h后細胞增殖活力的變化;平板克隆形成實驗評估不同濃度的莪術醇處理CNE-2細胞后克隆形成及增殖能力的差異;流式細胞術檢測莪術醇作用48h后CNE-2細胞的周期進程及凋亡情況;Q-PCR、Western blotting分別檢測莪術醇處理48h后CNE-2細胞中IGF-1R/PI3K/Akt/GSK-3β通路及其下游周期相關因子和凋亡相關因子的mRNA和蛋白表達水平。莪術醇（50μg/mL）與IGF-1（50ng/mL）分別處理及聯合處理CNE-2細胞,同時設置陰性...
【文章來源】：桂林醫(yī)學院廣西壯族自治區(qū)
【文章頁數】：76 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
莪術醇誘導CNE-2細胞增殖抑制Figure1CurcumolinducedproliferationinhibitiononCNE-2cells
莪術醇（12.5、25、50、100μg/mL）處理細胞 15 天后，評估克隆增殖情況結果顯示，莪術醇處理組的細胞克隆形成能力顯著低于對照組，且在檢測濃度范圍內，CNE-2 細胞的克隆數量與莪術醇的濃度負相關（圖 2A 和 B）表明莪術醇能抑制 CNE-2 細胞的克隆形成，即誘導細胞增殖抑制。形態(tài)學上同樣可以看出，莪術醇誘導腫瘤細胞失去原有的細胞形態(tài)，胞體皺縮，核破裂，胞漿內顆粒增多（圖 2C）。
2.2 莪術醇誘導 CNE-2 細胞周期阻滯2.2.1 莪術醇誘導 CNE-2 細胞發(fā)生 G0/G1 期阻滯細胞周期進程的變化是細胞生長、增殖和分化最基本的表現。我們采用 PI 單染色法，應用流式細胞術檢測莪術醇對鼻咽癌 CNE-2 細胞周期進程的影響。結果顯示，莪術醇處理 CNE-2 細胞 48h 后，隨著莪術醇濃度的增加，G0/G1 期細胞比例增多，G2/M 期、S 期細胞比例減少（圖 3A 和 B）。表明莪術醇以劑量依賴性的方式誘導 CNE-2 細胞發(fā)生 G0/G1 期阻滯，導致DNA 合成障礙，從而引起增殖抑制。
【參考文獻】：
期刊論文
[1]人參皂苷Rg3對鼻咽癌Th1/Th2細胞因子表達情況及臨床治療效果分析[J]. 趙燕. 陜西中醫(yī). 2018(01)
[2]茶多酚對鼻咽癌細胞增殖、凋亡、遷移和侵襲的影響及機制的研究[J]. 田夢秋,袁東杰,鄭實興,李慶玉,石書婧,徐志文. 臨床耳鼻咽喉頭頸外科雜志. 2015(06)
[3]Nasopharyngeal carcinoma incidence and mortality in China in 2010[J]. Kuang-Rong Wei,Rong-Shou Zheng,Si-Wei Zhang,Zhi-Heng Liang,Zhi-Xiong Ou,Wan-Qing Chen. Chinese Journal of Cancer. 2014(08)
[4]茶多酚抑制鼻咽癌及輻射防護作用的研究進展[J]. 袁東杰,魏媛媛,徐志文. 臨床耳鼻咽喉頭頸外科雜志. 2014(04)
[5]莪術醇抑制人肝癌細胞HepG2增殖的機制[J]. 黃嵐珍,王娟,盧菲婷,楊飛城,陳旭,洪雪,蔣曉山. 中國中藥雜志. 2013(11)
[6]苦參堿及其衍生物對人鼻咽癌細胞的耐藥逆轉作用[J]. 張俊,唐安洲. 中藥材. 2012(12)
[7]茶多酚和粉防己堿聯合抗腫瘤藥物對鼻咽癌耐藥細胞株HNE-1（200）增殖的抑制作用[J]. 王洪鵬,葉琳,王馳,陳鴻雁. 中國中醫(yī)急癥. 2010(01)
[8]苦參堿通過誘導NKG2D配體高表達增強NK細胞對ABCG2high耐藥鼻咽癌細胞殺傷活性[J]. 黃宇賢,王楊,孫明,周雪云,鄧蘭,郭坤元. 南方醫(yī)科大學學報. 2009(07)
[9]胰島素樣生長因子-1受體蛋白在鼻咽癌細胞中的表達及其臨床意義[J]. 尹述成,周緒紅,彭濤,李俊,江孝清. 臨床耳鼻咽喉頭頸外科雜志. 2008(19)
[10]氧化苦參堿對鼻咽癌耐藥細胞株HNE-1（200）耐藥逆轉機制的研究[J]. 王馳,陳鴻雁,葉琳,沈娜,張潛英,余曉燕. 中國藥房. 2008(24)
碩士論文
[1]萊菔硫烷通過miRNA-124-3p靶向STAT3抑制鼻咽癌的增殖[D]. 楊興龍.南方醫(yī)科大學 2014
本文編號：3220979
【文章來源】：桂林醫(yī)學院廣西壯族自治區(qū)
【文章頁數】：76 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
莪術醇誘導CNE-2細胞增殖抑制Figure1CurcumolinducedproliferationinhibitiononCNE-2cells
莪術醇（12.5、25、50、100μg/mL）處理細胞 15 天后，評估克隆增殖情況結果顯示，莪術醇處理組的細胞克隆形成能力顯著低于對照組，且在檢測濃度范圍內，CNE-2 細胞的克隆數量與莪術醇的濃度負相關（圖 2A 和 B）表明莪術醇能抑制 CNE-2 細胞的克隆形成，即誘導細胞增殖抑制。形態(tài)學上同樣可以看出，莪術醇誘導腫瘤細胞失去原有的細胞形態(tài)，胞體皺縮，核破裂，胞漿內顆粒增多（圖 2C）。
2.2 莪術醇誘導 CNE-2 細胞周期阻滯2.2.1 莪術醇誘導 CNE-2 細胞發(fā)生 G0/G1 期阻滯細胞周期進程的變化是細胞生長、增殖和分化最基本的表現。我們采用 PI 單染色法，應用流式細胞術檢測莪術醇對鼻咽癌 CNE-2 細胞周期進程的影響。結果顯示，莪術醇處理 CNE-2 細胞 48h 后，隨著莪術醇濃度的增加，G0/G1 期細胞比例增多，G2/M 期、S 期細胞比例減少（圖 3A 和 B）。表明莪術醇以劑量依賴性的方式誘導 CNE-2 細胞發(fā)生 G0/G1 期阻滯，導致DNA 合成障礙，從而引起增殖抑制。
【參考文獻】：
期刊論文
[1]人參皂苷Rg3對鼻咽癌Th1/Th2細胞因子表達情況及臨床治療效果分析[J]. 趙燕. 陜西中醫(yī). 2018(01)
[2]茶多酚對鼻咽癌細胞增殖、凋亡、遷移和侵襲的影響及機制的研究[J]. 田夢秋,袁東杰,鄭實興,李慶玉,石書婧,徐志文. 臨床耳鼻咽喉頭頸外科雜志. 2015(06)
[3]Nasopharyngeal carcinoma incidence and mortality in China in 2010[J]. Kuang-Rong Wei,Rong-Shou Zheng,Si-Wei Zhang,Zhi-Heng Liang,Zhi-Xiong Ou,Wan-Qing Chen. Chinese Journal of Cancer. 2014(08)
[4]茶多酚抑制鼻咽癌及輻射防護作用的研究進展[J]. 袁東杰,魏媛媛,徐志文. 臨床耳鼻咽喉頭頸外科雜志. 2014(04)
[5]莪術醇抑制人肝癌細胞HepG2增殖的機制[J]. 黃嵐珍,王娟,盧菲婷,楊飛城,陳旭,洪雪,蔣曉山. 中國中藥雜志. 2013(11)
[6]苦參堿及其衍生物對人鼻咽癌細胞的耐藥逆轉作用[J]. 張俊,唐安洲. 中藥材. 2012(12)
[7]茶多酚和粉防己堿聯合抗腫瘤藥物對鼻咽癌耐藥細胞株HNE-1（200）增殖的抑制作用[J]. 王洪鵬,葉琳,王馳,陳鴻雁. 中國中醫(yī)急癥. 2010(01)
[8]苦參堿通過誘導NKG2D配體高表達增強NK細胞對ABCG2high耐藥鼻咽癌細胞殺傷活性[J]. 黃宇賢,王楊,孫明,周雪云,鄧蘭,郭坤元. 南方醫(yī)科大學學報. 2009(07)
[9]胰島素樣生長因子-1受體蛋白在鼻咽癌細胞中的表達及其臨床意義[J]. 尹述成,周緒紅,彭濤,李俊,江孝清. 臨床耳鼻咽喉頭頸外科雜志. 2008(19)
[10]氧化苦參堿對鼻咽癌耐藥細胞株HNE-1（200）耐藥逆轉機制的研究[J]. 王馳,陳鴻雁,葉琳,沈娜,張潛英,余曉燕. 中國藥房. 2008(24)
碩士論文
[1]萊菔硫烷通過miRNA-124-3p靶向STAT3抑制鼻咽癌的增殖[D]. 楊興龍.南方醫(yī)科大學 2014
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