天麻作為我國(guó)名貴中藥材,具有良好的藥用價(jià)值�！吨袊�(guó)植物志》中將天麻分為紅天麻（原變型）Gastrodia elata f.elata、烏天麻G.elata f.glauca、綠天麻G.elata f.viridis、黃天麻G.elata f.flavid和松天麻G.elataf.alba等5個(gè)變型,其中紅天麻與烏天麻的天麻素和多糖含量均較高,為栽培的優(yōu)良品系。目前市場(chǎng)上流通的天麻商品多為紅天麻、烏天麻或雜交天麻,但其傳統(tǒng)性狀鑒別特征并不明顯,無(wú)法快速、準(zhǔn)確區(qū)分。該研究旨在建立一種能夠高效、準(zhǔn)確鑒別紅天麻、烏天麻及其雜交天麻的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（polymerase chain reaction,PCR）方法。根據(jù)天麻重測(cè)序結(jié)果,篩選獲得特異性單核苷酸多態(tài)性（single nucleotide polymorphism, SNP）變異位點(diǎn),并利用變異位點(diǎn)設(shè)計(jì)2對(duì)特異性引物W291-F/W291-R和H255-F/H255-R。分別采集紅天麻、烏天麻及其雜交天麻樣品,建立并優(yōu)化PCR鑒別方法,并對(duì)其耐受性和適用性進(jìn)行考察與驗(yàn)證。使用特異性引物H255-F/H255-R、退火溫度為48℃、循環(huán)數(shù)... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)中藥雜志. 2020,45(15)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：6 頁(yè)

【部分圖文】：

不同條件對(duì)紅天麻、紅烏雜交天麻特異性PCR鑒別結(jié)果的影響

不同儀器對(duì)紅天麻、烏天麻、紅烏雜交天麻特異性PCR鑒別結(jié)果的影響

根據(jù)3.1和3.2項(xiàng)下確定的最優(yōu)PCR 鑒別體系和條件(紅天麻:95 ℃預(yù)變性5 min;95 ℃變性30 s,48 ℃退火30 s,72 ℃延伸30 s,33個(gè)循環(huán);72 ℃再延伸5 min。烏天麻:95 ℃預(yù)變性5 min;95 ℃變性30 s,51 ℃退火30 s,72 ℃延伸30 s,31個(gè)循環(huán);72 ℃再延伸5 min),對(duì)采集的天麻樣品進(jìn)行PCR擴(kuò)增,產(chǎn)物經(jīng)2%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)。結(jié)果顯示,樣品1～18號(hào)紅天麻與41～43號(hào)紅烏雜交天麻在255 bp處均出現(xiàn)單一明亮條帶;樣品19～40烏天麻與41～43號(hào)紅烏雜交天麻在291 bp處均出現(xiàn)單一明亮條帶,表明該體系能穩(wěn)定準(zhǔn)確鑒別紅天麻、烏天麻及其雜交天麻,見(jiàn)圖4。4 小結(jié)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]沙氏鹿茸草實(shí)時(shí)熒光定量PCR內(nèi)參基因篩選[J]. 郭軍,張慧,郭巧生,朱再標(biāo),施詠滔,田漢卿,黃志剛.  中國(guó)中藥雜志. 2020(08)
[2]高盧蜜環(huán)菌PCR-RFLP快速鑒別方法研究[J]. 梁宇庭,蔣超,周駿輝,胡啟跳,袁媛.  中國(guó)中藥雜志. 2019(17)
[3]特異性PCR鑒別蜈蚣及其混偽品[J]. 田娜,袁媛,金艷,楊全,趙玉洋,蔣超.  中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志. 2019(17)
[4]鹿茸、鹿角的位點(diǎn)特異性PCR鑒別[J]. 錢潤(rùn),田娜,張雪艷,蔣超,袁媛.  中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志. 2019(17)
[5]基于熒光定量PCR方法檢測(cè)金龍膠囊配方中守宮投料量的初步研究[J]. 葉浩婷,李曉蕾,晁志.  中國(guó)中藥雜志. 2018(23)
[6]特異性PCR方法鑒別鱉甲藥材和飲片[J]. 程素倩,袁媛,劉富艷,蔣超,金艷,趙玉洋.  中國(guó)中藥雜志. 2018(23)
[7]西洋參實(shí)時(shí)熒光定量PCR快速鑒別方法的建立[J]. 黃永輝,徐淼鋒,權(quán)永兵,遲遠(yuǎn)麗,林偉,廖力,張衛(wèi)東.  中國(guó)中藥雜志. 2018(20)
[8]基于COI與SRY序列建立梅花鹿、馬鹿及其雜交鹿茸的分子鑒別方法[J]. 魏藝聰,蔣超,袁媛,趙玉洋,金艷,黃璐琦.  中國(guó)中藥雜志. 2017(23)
[9]棉花雜種優(yōu)勢(shì)利用研究十年成就和未來(lái)發(fā)展[J]. 邢朝柱,郭立平,李威,吳建勇,楊代剛,戚廷香,馬雄風(fēng),張學(xué)賢.  棉花學(xué)報(bào). 2017(S1)
[10]多重位點(diǎn)特異性PCR鑒別人參、三七、西洋參摻雜[J]. 蔣超,羅宇琴,袁媛,黃璐琦,金艷,趙玉洋.  中國(guó)中藥雜志. 2017(07)

博士論文
[1]中國(guó)近代水稻育種科技發(fā)展研究[D]. 夏如兵.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009



本文編號(hào)：3220168