目的我們的前期研究通過(guò)對(duì)土木香有效成分的分離提取,得到了具有抗腫瘤活性的混合物:土木香提取物（inula helenium L.ethyl acetate extract,EEIHL）。本研究將探討EEIHL抗胰腺腫瘤的作用,并對(duì)其可能的作用機(jī)制進(jìn)行研究,為抗胰腺癌候選藥物的篩選和研究提供可靠依據(jù)和開(kāi)發(fā)方向。方法采用CCK8法檢測(cè)EEIHL對(duì)胰腺癌細(xì)胞的增殖作用的影響,并通過(guò)克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)EEIHL對(duì)細(xì)胞增殖的變化;采用PI染色法檢測(cè)EEIHL作用后細(xì)胞周期的分布情況以及細(xì)胞凋亡率;采用DAPI染核法觀察EEIHL作用后細(xì)胞核形態(tài)的變化;采用JC-1染色法檢測(cè)給藥后細(xì)胞線粒體膜電位的變化;采用BioVision試劑盒檢測(cè)Caspase-3的活性變化;采用劃痕實(shí)驗(yàn)觀察EEIHL對(duì)胰腺癌細(xì)胞遷移作用的影響;熒光定量PCR法檢測(cè)E-Cadherin mRNA、Snail mRNA的表達(dá);采用Western blot法檢測(cè)相關(guān)蛋白的表達(dá)。結(jié)果EEIHL能抑制胰腺癌細(xì)胞的增殖,EEIHL對(duì)胰腺癌細(xì)胞Capan-2和CFPAC-1在48h 的 IC50 分別為 4.68±0.17 μg/ml 和... 

【文章來(lái)源】：浙江中醫(yī)藥大學(xué)浙江省

【文章頁(yè)數(shù)】：57 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
前言
一、材料與方法
    (一) 實(shí)驗(yàn)材料
        1. 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
        2. 實(shí)驗(yàn)藥品
        3. 主要實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備
        4. 實(shí)驗(yàn)試劑
    (二) 實(shí)驗(yàn)方法
        1. 細(xì)胞培養(yǎng)
        2. CCK8實(shí)驗(yàn)
        3. 集落形成實(shí)驗(yàn)
        4. 流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定細(xì)胞周期
        5. 流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定細(xì)胞凋亡
        6. DAPI熒光染色實(shí)驗(yàn)
        7. JC-1染色測(cè)定線粒體膜電位變化
        8. Caspase-3活性檢測(cè)
        9. 劃痕實(shí)驗(yàn)
        10. Real-time PCR
        11. Western blot
        12. 數(shù)據(jù)分析
二、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    (一) EEIHL抑制胰腺癌細(xì)胞Capan-2和CFPAC-1的增殖
    (二) EEIHL引起胰腺癌細(xì)胞CFPAC-1周期阻滯
    (三) EEIHL誘導(dǎo)胰腺癌細(xì)胞Capan-2和CFPAC-1發(fā)生凋亡
    (四) EEIHL降低胰腺癌細(xì)胞Capan-2和CFPAC-1線粒體膜電位
    (五) EEIHL激活胰腺癌細(xì)胞CFPAC-1的Caspase-3活性
    (六) EEIHL抑制胰腺癌細(xì)胞CFPAC-1遷移
    (七) EEIHL可能通過(guò)抑制EMT相關(guān)蛋白抑制胰腺癌細(xì)胞CFPAC-1轉(zhuǎn)移
    (八) EEIHL對(duì)胰腺癌細(xì)胞Capan-2和CFPAC-1凋亡蛋白的影響
三、分析和討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附圖
致謝
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]土木香化學(xué)成分及藥理研究概況[J]. 張樂(lè),方羽,陸國(guó)紅.  中成藥. 2015(06)
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本文編號(hào)：3206087