目的:本研究以不同濃度花青素對(duì)支氣管上皮細(xì)胞進(jìn)行預(yù)處理,利用過(guò)氧化氫建立氧化應(yīng)激模型,探討花青素對(duì)過(guò)氧化氫誘導(dǎo)氣道上皮細(xì)胞凋亡的作用以及可能的作用機(jī)制。方法:利用過(guò)氧化氫對(duì)人支氣管上皮樣細(xì)胞I6HBE進(jìn)行處理,誘導(dǎo)氧化應(yīng)激模型的建立。1.MTT法檢測(cè)花青素對(duì)過(guò)氧化氫誘導(dǎo)的16HBE細(xì)胞活性抑制的影響;2.16HBE細(xì)胞內(nèi)裝載DCFH-DA探針,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)花青素對(duì)細(xì)胞內(nèi)活性氧（ROS）水平的影響;3.比色法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GPx）活性的變化;4.Hoechst33342染色熒光顯微鏡下觀察細(xì)胞凋亡情況;5.細(xì)胞內(nèi)裝載JC-1探針,檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)線(xiàn)粒體膜電位變化;6.Western Blot法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)抗凋亡蛋白bcl-2和促凋亡蛋白bax表達(dá)水平的變化;PTEN蛋白的表達(dá)、AMPK以及AKT磷酸化水平的變化。結(jié)果:1.MTT結(jié)果表明,過(guò)氧化氫能夠抑制16HBE細(xì)胞活性,并呈濃度依賴(lài)性;125gg/ml和250μg/ml的花青素能夠明顯上調(diào)過(guò)氧化氫處理后的細(xì)胞活性（P<0.05）;2.花青素和抗氧化劑NAC能夠明顯抑制過(guò)氧... 

【文章來(lái)源】：延邊大學(xué)吉林省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：44 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略語(yǔ)
第一章 前言
    1.1 氣道上皮屏障
    1.2 活性氧
    1.3 腺苷酸活化蛋白激酶
    1.4 同源性磷酸酶-張力蛋白
    1.5 花青素
第二章 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
    2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    2.3 實(shí)驗(yàn)試劑
    2.4 實(shí)驗(yàn)方法
第三章 結(jié)果
    3.1 花青素對(duì)H2O2誘導(dǎo)的細(xì)胞活性的影響
    3.2 花青素對(duì)16HBE細(xì)胞氧化應(yīng)激的影響
    3.3 花青素對(duì)16HBE細(xì)胞凋亡的影響
    3.4 花青素對(duì)16HBE細(xì)胞線(xiàn)粒體損傷的影響
    3.5 花青素對(duì)AMPK/PTEN/AKT信號(hào)通路的影響
    3.6 花青素對(duì)bcl-2和bax的影響
第四章 討論
    4.1 花青素抑制16HBE細(xì)胞氧化應(yīng)激
    4.2 花青素抑制16HBE細(xì)胞凋亡
    4.3 花青素抑制16HBE細(xì)胞線(xiàn)粒體損傷
    4.4 花青素調(diào)控AMPK/PTEN/AKT信號(hào)通路
    4.5 花青素通過(guò)調(diào)控bcl-2和bax抑制16HBE細(xì)胞凋亡
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士期間發(fā)表的論文


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]氧化應(yīng)激和自噬在特發(fā)性肺纖維化中的研究進(jìn)展[J]. 劉洪艷,伍義蘭,謝婷婷,閔香玉,趙勇.  臨床肺科雜志. 2019(01)
[2]花青素通過(guò)Nrf-2/HO-1信號(hào)通路調(diào)控哮喘氣道炎癥[J]. 劉宇彤,車(chē)楠,李莉,李良昌,馬立光.  免疫學(xué)雜志. 2019(01)
[3]花青素穩(wěn)定性影響因素與應(yīng)用研究進(jìn)展[J]. 卓毓光,劉儒華,古福生,曾善榮.  廣東化工. 2018(24)
[4]活性氧與線(xiàn)粒體損傷研究概述[J]. 李澤君,呼丹,熊克朝,吳純啟,丁日高,王茜莎,王全軍.  中南藥學(xué). 2014(10)



本文編號(hào)：3205591