目的:肺癌是世界范圍內(nèi)死亡率和發(fā)病率均居首位的惡性腫瘤。化療已達(dá)到其療效平臺(tái),而靶向藥物僅對(duì)某些基因突變型有效及產(chǎn)生原發(fā)性和獲得性耐藥均限制了它的使用。.近年來,石菖蒲提取物β-細(xì)辛醚在抗癌方面的研究引起廣泛關(guān)注,并在各種惡性腫瘤中表現(xiàn)出良好的抗癌作用,但其作用機(jī)制未明。本研究旨在研究β-細(xì)辛醚對(duì)肺癌細(xì)胞株增殖、遷移、侵襲、凋亡的影響,并基于Wnt/β-catenin信號(hào)通路探討其可能的機(jī)制,為β-細(xì)辛醚為代表的中藥單體對(duì)肺癌等惡性腫瘤的治療作用提供新的觀點(diǎn)和理論基礎(chǔ)。方法:1.四種肺癌細(xì)胞株（A549、NCI-H1299、NCI-H1650和HCC827）培養(yǎng)基中加入不同濃度β-細(xì)辛醚共培養(yǎng)（0μM、200μM、400μM和800μ M）,應(yīng)用MTT法檢測(cè)不同時(shí)間點(diǎn)（24h、48h、72h和96h）細(xì)胞的增殖活性。2.應(yīng)用Transwell小室檢測(cè)不同濃度β-細(xì)辛醚（0 μ M、100 μ M、200 μ M和400 μ M）對(duì)肺癌細(xì)胞株遷移、侵襲能力的影響;并檢測(cè)β-細(xì)辛醚對(duì)肺癌細(xì)胞株粘附能力的影響。3.應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)Annexin V/PI染色法檢測(cè)不同濃度β-細(xì)辛醚（0μM、1... 

【文章來源】：廣州中醫(yī)藥大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
引言
第1章 文獻(xiàn)研究
    1.1 肺癌的中醫(yī)藥治療進(jìn)展
        1.1.1 中醫(yī)藥治療肺癌的臨床研究
        1.1.2 中醫(yī)藥治療肺癌的基礎(chǔ)研究
    1.2 經(jīng)典Wnt信號(hào)通路與肺癌
        1.2.1 經(jīng)典Wnt信號(hào)通路的簡介
        1.2.2 NSCLC中的經(jīng)典Wnt通路
    1.3 細(xì)胞凋亡
        1.3.1 內(nèi)源性通路(線粒體途徑)
        1.3.2 外源性通路(死亡受體途徑)
        1.3.3 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)途徑
    1.4 Wnt/β-catenin信號(hào)通路對(duì)細(xì)胞增殖的調(diào)控
    1.5 Wnt/β-catenin信號(hào)通路對(duì)細(xì)胞凋亡的調(diào)控
    1.6 β-細(xì)辛醚抗腫瘤研究進(jìn)展
    1.7 石菖蒲在腫瘤治療方面的臨床應(yīng)用
第2章 β-細(xì)辛醚通過Wnt/β-catenin通路誘導(dǎo)肺癌細(xì)胞凋亡
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
        2.1.2 藥物及常用試劑的配制
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)試劑與耗材
        2.1.4 實(shí)驗(yàn)儀器
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 細(xì)胞復(fù)蘇
        2.2.2 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2.3 細(xì)胞傳代
        2.2.4 細(xì)胞凍存
        2.2.5 細(xì)胞計(jì)數(shù)
        2.2.6 MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖
        2.2.7 Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移和細(xì)胞侵襲
        2.2.8 流式細(xì)胞術(shù)Annexin V/PI染色法檢測(cè)細(xì)胞凋亡
        2.2.9 JC-1染色測(cè)定線粒體膜電位的變化
        2.2.10 雙熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)檢測(cè)β-catenin信號(hào)通路活性
        2.2.11 線粒體蛋白分離實(shí)驗(yàn)
        2.2.12 RT-PCR檢測(cè)相關(guān)mRNA表達(dá)
        2.2.13 Western Blot檢查相關(guān)蛋白的表達(dá)
        2.2.14 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    2.3 研究結(jié)果
        2.3.1 β-細(xì)辛醚對(duì)肺癌細(xì)胞株增殖抑制率的影響
        2.3.2 β-細(xì)辛醚對(duì)肺癌細(xì)胞株遷移、侵襲、粘附能力的影響
        2.3.3 β-細(xì)辛醚對(duì)肺癌細(xì)胞株凋亡的影響
        2.3.4 β-細(xì)辛醚促進(jìn)A549細(xì)胞凋亡相關(guān)機(jī)制的研究
        2.3.5 β-細(xì)辛醚對(duì)A549細(xì)胞Wnt/β-catenin通路的影響
        2.3.6 激活Wnt/β -catenin通路逆轉(zhuǎn)β-細(xì)辛醚誘導(dǎo)的抗腫瘤效應(yīng)
    2.4 討論
結(jié)語
參考文獻(xiàn)
附錄
在校期間發(fā)表論文情況
致謝
附件



本文編號(hào)：3194595