目的:肺癌是世界范圍內(nèi)死亡率和發(fā)病率均居首位的惡性腫瘤�；熞堰_(dá)到其療效平臺(tái),而靶向藥物僅對(duì)某些基因突變型有效及產(chǎn)生原發(fā)性和獲得性耐藥均限制了它的使用。.近年來,石菖蒲提取物β-細(xì)辛醚在抗癌方面的研究引起廣泛關(guān)注,并在各種惡性腫瘤中表現(xiàn)出良好的抗癌作用,但其作用機(jī)制未明。本研究旨在研究β-細(xì)辛醚對(duì)肺癌細(xì)胞株增殖、遷移、侵襲、凋亡的影響,并基于Wnt/β-catenin信號(hào)通路探討其可能的機(jī)制,為β-細(xì)辛醚為代表的中藥單體對(duì)肺癌等惡性腫瘤的治療作用提供新的觀點(diǎn)和理論基礎(chǔ)。方法:1.四種肺癌細(xì)胞株（A549、NCI-H1299、NCI-H1650和HCC827）培養(yǎng)基中加入不同濃度β-細(xì)辛醚共培養(yǎng)（0μM、200μM、400μM和800μ M）,應(yīng)用MTT法檢測(cè)不同時(shí)間點(diǎn)（24h、48h、72h和96h）細(xì)胞的增殖活性。2.應(yīng)用Transwell小室檢測(cè)不同濃度β-細(xì)辛醚（0 μ M、100 μ M、200 μ M和400 μ M）對(duì)肺癌細(xì)胞株遷移、侵襲能力的影響;并檢測(cè)β-細(xì)辛醚對(duì)肺癌細(xì)胞株粘附能力的影響。3.應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)Annexin V/PI染色法檢測(cè)不同濃度β-細(xì)辛醚（0μM、1... 

【文章來源】：廣州中醫(yī)藥大學(xué)廣東省

【文章頁(yè)數(shù)】：76 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
引言
第1章 文獻(xiàn)研究
    1.1 肺癌的中醫(yī)藥治療進(jìn)展
        1.1.1 中醫(yī)藥治療肺癌的臨床研究
        1.1.2 中醫(yī)藥治療肺癌的基礎(chǔ)研究
    1.2 經(jīng)典Wnt信號(hào)通路與肺癌
        1.2.1 經(jīng)典Wnt信號(hào)通路的簡(jiǎn)介
        1.2.2 NSCLC中的經(jīng)典Wnt通路
    1.3 細(xì)胞凋亡
        1.3.1 內(nèi)源性通路(線粒體途徑)
        1.3.2 外源性通路(死亡受體途徑)
        1.3.3 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)途徑
    1.4 Wnt/β-catenin信號(hào)通路對(duì)細(xì)胞增殖的調(diào)控
    1.5 Wnt/β-catenin信號(hào)通路對(duì)細(xì)胞凋亡的調(diào)控
    1.6 β-細(xì)辛醚抗腫瘤研究進(jìn)展
    1.7 石菖蒲在腫瘤治療方面的臨床應(yīng)用
第2章 β-細(xì)辛醚通過Wnt/β-catenin通路誘導(dǎo)肺癌細(xì)胞凋亡
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
        2.1.2 藥物及常用試劑的配制
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)試劑與耗材
        2.1.4 實(shí)驗(yàn)儀器
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 細(xì)胞復(fù)蘇
        2.2.2 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2.3 細(xì)胞傳代
        2.2.4 細(xì)胞凍存
        2.2.5 細(xì)胞計(jì)數(shù)
        2.2.6 MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖
        2.2.7 Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移和細(xì)胞侵襲
        2.2.8 流式細(xì)胞術(shù)Annexin V/PI染色法檢測(cè)細(xì)胞凋亡
        2.2.9 JC-1染色測(cè)定線粒體膜電位的變化
        2.2.10 雙熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)檢測(cè)β-catenin信號(hào)通路活性
        2.2.11 線粒體蛋白分離實(shí)驗(yàn)
        2.2.12 RT-PCR檢測(cè)相關(guān)mRNA表達(dá)
        2.2.13 Western Blot檢查相關(guān)蛋白的表達(dá)
        2.2.14 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    2.3 研究結(jié)果
        2.3.1 β-細(xì)辛醚對(duì)肺癌細(xì)胞株增殖抑制率的影響
        2.3.2 β-細(xì)辛醚對(duì)肺癌細(xì)胞株遷移、侵襲、粘附能力的影響
        2.3.3 β-細(xì)辛醚對(duì)肺癌細(xì)胞株凋亡的影響
        2.3.4 β-細(xì)辛醚促進(jìn)A549細(xì)胞凋亡相關(guān)機(jī)制的研究
        2.3.5 β-細(xì)辛醚對(duì)A549細(xì)胞Wnt/β-catenin通路的影響
        2.3.6 激活Wnt/β -catenin通路逆轉(zhuǎn)β-細(xì)辛醚誘導(dǎo)的抗腫瘤效應(yīng)
    2.4 討論
結(jié)語(yǔ)
參考文獻(xiàn)
附錄
在校期間發(fā)表論文情況
致謝
附件



本文編號(hào)：3194595