植物乳桿菌發(fā)酵中藥復(fù)方工藝優(yōu)化及對小鼠腸道菌群的作用研究
發(fā)布時間:2021-05-18 13:43
腸道菌群是存在于胃腸道內(nèi)最重要的生物群體,對維持人體健康和腸道穩(wěn)態(tài)有非常重要的作用,腸道菌群失調(diào)會引起宿主代謝紊亂,導(dǎo)致各種慢性疾病的發(fā)生,以腸道菌群作為靶點,通過調(diào)節(jié)腸道菌群來改善人體健康是一種新思路?诜锢枚鹊褪侵兴幤毡榇嬖诘膯栴},微生物發(fā)酵是一種長期應(yīng)用于中藥的生物轉(zhuǎn)化過程,發(fā)酵產(chǎn)物中的活菌數(shù)是影響轉(zhuǎn)化效果的關(guān)鍵因素,也是評價發(fā)酵產(chǎn)品質(zhì)量的重要因素。近年來,認為“針對多靶點的多成分”是中藥發(fā)揮療效的原理。一方面,中藥在抑制某些病原體生長的同時促進有益細菌的增殖。另一方面,腸道菌群可以代謝中藥有效成分,使其代謝產(chǎn)物更易被吸收,從而產(chǎn)生不同的治療效果。同時,中藥活性物質(zhì)可以調(diào)節(jié)腸道菌群結(jié)構(gòu),加強腸黏膜屏障,從而恢復(fù)腸道穩(wěn)態(tài)。本研究從4株分離自天然發(fā)酵乳的植物乳桿菌中篩選發(fā)酵中藥復(fù)方的最佳菌株,以發(fā)酵液中的活菌數(shù)為指標,通過單因素和正交試驗得到益生菌發(fā)酵中藥復(fù)方的最佳工藝參數(shù)。依照《保健食品檢驗與評價技術(shù)規(guī)范(2003版)》中的相關(guān)規(guī)定,使用平板計數(shù)法評價發(fā)酵產(chǎn)物調(diào)節(jié)腸道菌群的功能,并通過16s rRNA測序技術(shù)分別比較了發(fā)酵產(chǎn)物、植物乳桿菌和中藥復(fù)方對小鼠腸道菌群結(jié)構(gòu)組成和多樣...
【文章來源】:蘭州大學(xué)甘肅省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:61 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
第一章 前言
1.1 微生物發(fā)酵
1.1.1 微生物發(fā)酵中藥
1.1.2 微生物發(fā)酵產(chǎn)品
1.2 腸道菌群
1.2.1 腸道菌群與免疫
1.2.2 腸道菌群與代謝
1.2.3 腸道菌群與疾病
1.2.4 腸道菌群與飲食
1.2.5 腸道菌群與中藥
1.3 膳食補充劑
1.3.1 益生菌
1.3.2 益生元和膳食纖維
1.3.3 合生元
1.4 研究意義與技術(shù)路線
第二章 植物乳桿菌發(fā)酵中藥復(fù)方最佳工藝條件探索
2.1 引言
2.2 材料和方法
2.2.1 藥材
2.2.2 菌株
2.2.3 主要的儀器和試劑
2.2.4 植物乳桿菌的活化與復(fù)方提取液的制備
2.2.5 單因素試驗探索最佳發(fā)酵參數(shù)
2.2.6 正交試驗優(yōu)化發(fā)酵工藝條件
2.2.7 測定發(fā)酵液中的植物乳桿菌在模擬胃腸液中的存活率
2.2.8 測定發(fā)酵前后中藥復(fù)方提取液中成分的變化情況
2.2.9 數(shù)據(jù)分析與統(tǒng)計
2.3 結(jié)果
2.3.1 菌株篩選結(jié)果
2.3.2 中藥復(fù)方提取液的濃度對C3 生長的影響
2.3.3 發(fā)酵時間對C3 生長情況的影響
2.3.4 發(fā)酵溫度對C3 生長情況的影響
2.3.5 細菌接種率對菌體生長情況的影響
2.3.6 正交實驗結(jié)果和分析
2.3.7 植物乳桿菌在模擬胃液和腸液中的存活率
2.3.8 發(fā)酵前后中藥復(fù)方提取液中活性成分的變化情況
2.4 討論和小結(jié)
第三章 發(fā)酵后的中藥復(fù)方對小鼠腸道菌群的作用研究
3.1 引言
3.2 材料和方法
3.2.1 材料和儀器
3.2.2 選擇性培養(yǎng)基的配制
3.2.3 使用平板計數(shù)法評價發(fā)酵產(chǎn)物調(diào)節(jié)腸道菌群的作用
3.2.4 收集小鼠糞便樣本并分析糞便微生物
3.2.5 16srRNA測序技術(shù)分析小鼠腸道菌群的變化
3.2.6 提取糞便樣本DNA
3.2.7 糞便樣本PCR擴增和高通量測序
3.2.8 數(shù)據(jù)處理與分析
3.3 結(jié)果
3.3.1 小鼠體重變化
3.3.2 分析平板計數(shù)結(jié)果評價各處理對小鼠腸道菌群的影響作用
3.3.3 各組小鼠糞便微生物OTU分類鑒定
3.3.4 各組小鼠糞便微生物多樣性分析
3.3.5 各組小鼠糞便微生物組成分析
3.3.6 菌群代謝功能預(yù)測
3.4 討論和小結(jié)
第四章 結(jié)論與展望
4.1 結(jié)論
4.2 展望
參考文獻
附錄:調(diào)節(jié)腸道菌群功能檢驗方法
在學(xué)期間的研究成果
致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]HPLC法同時測定干髓糊劑中丁香酚和麝香草酚的含量[J]. 曹偉宇,賀文娟,雷丸,王曉娟. 中國藥房. 2017(30)
本文編號:3193895
【文章來源】:蘭州大學(xué)甘肅省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:61 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
第一章 前言
1.1 微生物發(fā)酵
1.1.1 微生物發(fā)酵中藥
1.1.2 微生物發(fā)酵產(chǎn)品
1.2 腸道菌群
1.2.1 腸道菌群與免疫
1.2.2 腸道菌群與代謝
1.2.3 腸道菌群與疾病
1.2.4 腸道菌群與飲食
1.2.5 腸道菌群與中藥
1.3 膳食補充劑
1.3.1 益生菌
1.3.2 益生元和膳食纖維
1.3.3 合生元
1.4 研究意義與技術(shù)路線
第二章 植物乳桿菌發(fā)酵中藥復(fù)方最佳工藝條件探索
2.1 引言
2.2 材料和方法
2.2.1 藥材
2.2.2 菌株
2.2.3 主要的儀器和試劑
2.2.4 植物乳桿菌的活化與復(fù)方提取液的制備
2.2.5 單因素試驗探索最佳發(fā)酵參數(shù)
2.2.6 正交試驗優(yōu)化發(fā)酵工藝條件
2.2.7 測定發(fā)酵液中的植物乳桿菌在模擬胃腸液中的存活率
2.2.8 測定發(fā)酵前后中藥復(fù)方提取液中成分的變化情況
2.2.9 數(shù)據(jù)分析與統(tǒng)計
2.3 結(jié)果
2.3.1 菌株篩選結(jié)果
2.3.2 中藥復(fù)方提取液的濃度對C3 生長的影響
2.3.3 發(fā)酵時間對C3 生長情況的影響
2.3.4 發(fā)酵溫度對C3 生長情況的影響
2.3.5 細菌接種率對菌體生長情況的影響
2.3.6 正交實驗結(jié)果和分析
2.3.7 植物乳桿菌在模擬胃液和腸液中的存活率
2.3.8 發(fā)酵前后中藥復(fù)方提取液中活性成分的變化情況
2.4 討論和小結(jié)
第三章 發(fā)酵后的中藥復(fù)方對小鼠腸道菌群的作用研究
3.1 引言
3.2 材料和方法
3.2.1 材料和儀器
3.2.2 選擇性培養(yǎng)基的配制
3.2.3 使用平板計數(shù)法評價發(fā)酵產(chǎn)物調(diào)節(jié)腸道菌群的作用
3.2.4 收集小鼠糞便樣本并分析糞便微生物
3.2.5 16srRNA測序技術(shù)分析小鼠腸道菌群的變化
3.2.6 提取糞便樣本DNA
3.2.7 糞便樣本PCR擴增和高通量測序
3.2.8 數(shù)據(jù)處理與分析
3.3 結(jié)果
3.3.1 小鼠體重變化
3.3.2 分析平板計數(shù)結(jié)果評價各處理對小鼠腸道菌群的影響作用
3.3.3 各組小鼠糞便微生物OTU分類鑒定
3.3.4 各組小鼠糞便微生物多樣性分析
3.3.5 各組小鼠糞便微生物組成分析
3.3.6 菌群代謝功能預(yù)測
3.4 討論和小結(jié)
第四章 結(jié)論與展望
4.1 結(jié)論
4.2 展望
參考文獻
附錄:調(diào)節(jié)腸道菌群功能檢驗方法
在學(xué)期間的研究成果
致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]HPLC法同時測定干髓糊劑中丁香酚和麝香草酚的含量[J]. 曹偉宇,賀文娟,雷丸,王曉娟. 中國藥房. 2017(30)
本文編號:3193895
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